トランスレーショナルマウス脳卒中研究のための標準化された神経学的スコアリングを備えたマウス脳卒中ユニットプロトコル

血管内閉塞を伴うマウス脳卒中モデルは、現在の血栓摘出術と再灌流治療をうまく変換しますが、効果的な臨床脳卒中ユニットルーチンを変換しません。このビデオでは、実績のあるマウス脳卒中ユニットの概念と標準化された神経学的評価尺度を実演します。私たちのプロトコルの最初の方法は、マウスストロークユニットを指します。

動物の臨床状態を毎日評価し、ここに示すようにポイントを合計してリスク認定スコアを計算します。RSSと動物の脳卒中後の段階に応じて、サポートの頻度と強度を適応させます。積極的な栄養サポートのために、マウスを首の毛皮から優しく、しかししっかりとつかんで保持します。

中指で頬を安定させ、中指をマウスの鼻に向かって頬に滑り込ませ、位置を保持します。注射器の先端を歯の間から頬の内側に向けて置きます。毎回約40〜50マイクロリットルのジェル食品を与えます。

マウスをケージにそっと戻し、1〜2分後に給餌を繰り返します。次に、Experimental Stroke Scaleの焦点成分を示します。まずは、前肢麻痺の検査から始めましょう。

マウスを尾の付け根からそっと持ち上げ、前肢を調べます。対称的な前方伸展と前肢の可動性にゼロを付けます。軽度の屈曲と対人肢の動きの減少に対して1点を獲得します。

対病変肢の軽度の屈曲で2点を獲得します。対肢の体幹への付着については3点を獲得し、手足や体の動きがない麻痺肢の場合は4点を獲得します。次に、後肢麻痺を評価します。

テスト1に従って、マウスのテールベースを保持し続けます。後肢を調べ、対称的な伸展と後肢の動きにゼロ点を付けます。後肢の非対称性に対して 1 点を獲得し、動きが大幅に減少し、対病変後肢の位置が非対称になります。

マウスの尾根を持ち続けて、体幹の対称性を評価します。両側への正常な対称的な体幹の屈曲と、垂直軸に対して30度を超える持続的な体幹の屈曲がない場合、スコアは0です。対病変優位で垂直軸に対して 30 度を超える顕著な体幹屈曲に対して 1 点を獲得します。

次に、旋回動作をテストします。マウスを平らな面にそっと置き、少なくとも1分間自由に動かしておきます。その動きのパターンを観察します。

マウスが速く直線的に動く場合はスコアが 0 です。1点を取れば、片側を向く傾向があり、接近した円ではない場合です。片側に閉じた不定円の場合は2点を獲得します。

片側に常に接近している円の場合は3点、ピボット、揺れ、またはまったく動かない場合は4点を獲得します。次に、体の対称性をテストします。テスト4から続けて、マウスを平らな面上で自由に動かします。

機首から尾までの軸を観察します。通常の姿勢、ベンチからの体幹の上昇、まっすぐな尾でスコア0。体がわずかに片側に曲がり、尾が遠位に曲がっているときのわずかな非対称性で1点を獲得します。

体が対側に傾いたり曲がったりして、尾が近位に曲がっている場合の中程度の非対称性で2点を獲得します。体が曲がっているとき、片側がベンチにあるとき、尾がはっきりと曲がっているときの顕著な非対称性で3点を獲得します。また、体が曲がっていて、片側が常にベンチに横たわっている場合の極端な非対称性については4点を獲得します。

さて、テスト6では、テスト5から続けて、その歩行を観察します。歩行運動障害がないか確認してください。手足が柔軟で、対称的で、速い場合、通常の歩行でスコアはゼロです。

足を引きずらずに硬く、柔軟性がなく、ゆっくりとした歩行で1点を獲得します。非対称の動きで明確な足を引きずる場合は2点を獲得します。軽く押した後、震えたり、漂ったり、転んだりした場合は3点を獲得します。

自発的な散歩をしないために4点を獲得します。次に、強制旋回をテストします。マウスの尾根を持ち、前肢で歩くように表面から少し持ち上げます。

その動きを観察します。通常の直線運動のスコアは 0 です。片側を向く傾向に対して1点を獲得します。

マウスが完全に閉じた円で片側に円を描くと、2点を獲得します。ピボットして動きが遅い場合は3点を獲得します。そして、マウスが進まず、トランクの前部がベンチにあるときに4点を獲得します。

ここでは、ポスチャテストの実行方法について説明します。ビデオに示すようにマウスを手のひらに置き、ゆっくりと前後に振ります。マウスが直立位置を保持し、横方向の力に対してバランスを取り、体が手のひらや指に接触しないことに注意してください。

そのテストのさまざまなスコアの映像は、そのスコアリングが手によって感じられるマウスの迅速で微妙な動きの検出に大きく依存しており、視覚的な手がかりはスコアリングに十分ではないため、役に立ちません。各スコアは、お客様の便宜のためにテキスト形式で説明しています。次に、前肢の配置を評価します。

マウスを背中またはテールベースから持ち、到達するターゲットとしてビームに向けます。対称的なリーチアウトを観察します。次に、ビームをつかんだら、そっと引き離し、前肢が対称的に解放されるのを観察します。

対称的なリーチアウトとリリースのスコアはゼロです。非対称性に対して 1 点を獲得します。次に、前肢の感覚運動障害をテストします。

示されているようにマウスを背中で保持し、細い先端で前足を連続して刺激します。通常のプロンプト把持動作でスコア0。対人前足の把握が欠如しているか、明らかに遅れている場合は1点を獲得します。

次に、ビームの歩行をテストします。マウスをノーズテール軸と平行にしてビームの上に置き、バランスをとるかビームの上を歩くようにします。バランス、手足の麻痺、転倒を観察します。

動物が落ちた場合に備えて、常に手を動物の下に置いてください。マウスが安定した姿勢でバランスを取り、ビームの片側に向かって歩くと、スコアは0になります。梁の側面をつかみ、その上を歩かない場合は1点を獲得します。

ビームの上でバランスをとるのに時間がかかる場合があることに注意してください。片方の手足が梁から落ちたら2点を獲得します。2本の手足が梁から落ちたら3点を獲得します。

マウスがビームでバランスを取ろうとしたが、40秒後に落ちると4点を獲得します。このテストでは、マウスを最大60秒間観察する必要があることに注意してください。20秒から40秒の間に落下が発生した場合は、5点を獲得します。

そして、バランスを取ろうとしたり、ビームにぶら下がろうとしなかったときには6点を獲得します。ひげの感覚を評価します。マウスを開いたベンチトップに置き、細い長い先端の綿棒でひげをうまく刺激します。

ブラインドアングルから来て、その回転反応を観察します。両側刺激による通常の素早い回転でゼロを獲得します。ゆっくりとした対症反応に対して1点を獲得します。

反対反応がない場合、2点を獲得します。対病変性がなく、イプシレシオナル反応が遅い場合は 3 点を獲得します。そして、二国間不在回答で4点を獲得しました。

クライミング能力をテストします。マウスをゴムでコーティングされた表面の中央に45度の角度で置き、登ろうとしたときの反応を観察します。マウスが表面の上部にすばやく登ったときにスコア0を獲得します。

緊張して登り、手足の脱力がある場合は1点を獲得します。斜面につかまり、滑ったり登ったりしないときに2点を獲得します。転倒を防ぐ努力にもかかわらず斜面を滑り落ちると3点を獲得します。

そして、転倒を防ぐ努力なしに滑ると4点を獲得します。マウス脳卒中ユニットのプロトコルは、糸状中大脳動脈閉塞後のマウスの生存を再現可能にサポートしており、80%の生存率を維持しています焦点ESSは、神経学的欠損の検出、回復の捕捉、および脳卒中後最大6ヶ月間の感度の維持に優れています。フォーカルESSを補完するものとして、ラダーラングテストを使用して、最大6か月間、前肢と後肢の両方の衰弱を検出および定量化できます。