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マイコバクテリアに対するハイスループット薬物スクリーニングのためのアッセイ開発
マイコバクテリアに対するハイスループット薬物スクリーニングのためのアッセイ開発
JoVE Journal
Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Assay Development for High-Throughput Drug Screening Against Mycobacteria

マイコバクテリアに対するハイスループット薬物スクリーニングのためのアッセイ開発

Full Text
2,332 Views
07:50 min
October 25, 2024

DOI: 10.3791/66860-v

Gabriel S. Oliveira1,2, Clara M. Bento1,3,4, António Pombinho1,3, Rita Reis1,3, Kevin Van Calster5,6, Linda De Vooght5, André F. Maia1,3, Paul Cos5, Maria Salomé Gomes1,2, Tânia Silva1,2

1i3S – Instituto de Investigação e Inovação em Saúde da Universidade do Porto, 2ICBAS – Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar, Universidade do Porto, 3IBMC - Instituto de Biologia Molecular e Celular, Universidade do Porto, 4Programa Doutoral em Biologia Molecular e Celular (MCBiology),Instituto de Ciências Biomédicas Abel Salazar da Universidade do Porto, 5Laboratory for Microbiology,Parasitology and Hygiene (LMPH), 6Department of Infectious Diseases in Humans, Immune Response,Sciensano

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

この研究では、最近作成されたダブルレポーター株を用いた マイコバクテリウム・アブセッサス に対するハイスループットスクリーニングのためのアッセイを開発し、蛍光と発光を使用して細菌の生存率を迅速に評価しました。このプロトコルは、この薬剤耐性菌に対する新薬のスクリーニングを目指す研究者に関連しています。

マイコバクテリウム・アブセッサスは抗生物質に対して非常に耐性があり、承認された治療法がない多剤耐性結核に匹敵するだけです。私たちの研究は、ダブルレポーター株とI3S技術を使用したスケーラブルな薬物スクリーニングプロトコルの開発に焦点を当てています。このアプローチは、検査の効率を高め、効果的で毒性の低い薬剤の発見を加速し、マイコバクテリウム・アブセッサスの潜在的な治療法を合理化することを目的としています。

膿瘍M.abscessus感染症の医薬品開発は、コロニー形成ユニットのような従来の時間のかかる方法に依存しており、これは労働集約的で、スループットが低く、人間の偏見に左右されやすいものです。細菌の耐性が高いため、ヒットが少なくなります。したがって、新しい治療法を見つけるためには、何千もの化合物のハイスループットスクリーニングが不可欠です。

しかし、従来の方法では、これは実用的ではありません。私たちのプロトコルは、自社開発のマイコバクテリウム・アブセッサスのダブルレポーター株を使用しており、発光と蛍光の両方を放出します。これにより、研究者は試薬やステップを追加することなく化合物の治療効果を評価でき、スピードと再現性が向上します。

さらに、I3S Biosciencesスクリーニングプラットフォームは、ハイスループットスクリーニングアッセイにロボット自動化を採用し、人間の介入なしに105枚のマイクロプレートを処理できるため、エラーを減らしながら効率を高めることができます。このプロトコルにより、マイコバクテリウム・アブセッサスに対する薬物スクリーニングの迅速化と再現性が向上し、新たなヒットの同定に役立ちます。主要な細菌標的や化合物の官能基を明らかにすることができ、成功した候補と失敗した候補の両方についての洞察を得ることができます。

このアプローチは、医薬品開発パイプラインを合理化し、将来の研究を導き、マイコバクテリウム・アブセッサスに対する潜在的なヒットの特定を加速します。

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アッセイ開発 ハイスループットスクリーニング マイコバクテリウム膿虫 薬剤耐性 薬物再利用 細菌生存率 リキッドハンドリングロボティクス 自動顕微鏡 ダブルレポーター株 発光 蛍光 スクリーニングプロトコール 創薬ツール 多剤耐性結核

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