2025年4月4日
この原稿では、ラットモデルにおける正中線開腹術による鋭い両極端切除術による5/6腎摘出術の標準化されたプロトコルを紹介し、腎実質縮小による腎不全の状態を非常に系統的な精度で誘導し、技術的エラーのリスクを低く抑えることを目的としています。
私たちの研究のこの特定の領域の範囲は、特定の状態や疾患に対して高度に標準化され制御された動物モデルを提供することです。このプロトコルを腎小全摘術に使用して、ラットの腎不全の標準化されたモデルを提供します。私たちのプロトコルは、腹腔内軸が他の内臓臓器に有利に働くことを生かしています。
これは、目的の動物モデルに他の臓器での同時処置が必要な場合に特に価値があります。最も関連性のある現在の実験的課題は、標準化された量で全体的な腎実質を外科的に減少させることが、必ずしも同程度の腎不全をもたらすとは限らないという事実です。したがって、ラボテストによるさらなる術後認証が必要になる場合があります。
まず、ポリフィラメント結紮糸、シリコン血管ループ、鈍いオーバーホールクランプ、細かい準備はさみ、鉗子、止血パッチ、露光装置、加熱パッド、および手術準備フックを手術台に配置します。麻酔をかけたラットには、新生児フェイスマスクを通じて100%の酸素を投与します。70%エタノールとポビドンヨードを交互にスクラブして、滅菌した綿棒を円を描くように塗布して、目的のアクセス領域を剃り、手術部位を消毒します。
中央値ミニ開腹術を行うには、最初に腹部に約 3 cm の中央皮膚切開を行い、続いてアルバ線に沿って筋膜を切開します。外科的湿布と準備フックを配置することにより、腎臓の外科的露出を達成します。次に、加湿綿棒で腎実質に触れるだけです。
Gerotaの筋膜に付着した腎周囲脂肪をつかんで腎臓を露出させます。緊張をかけて、筋膜を腎実質から局所的に持ち上げます。1つのはさみの刃の鋭い端で筋膜を切開して弱体化させ、Gerotaの筋膜の縦方向の解剖を続けます。
次に、閉じたハサミを使用して、ジェロタの筋膜の鈍いデグロブリングを行います。実質の周りの筋膜を徐々に弱体化させ、筋膜嚢を内側に折ります。腎門をシリコン血管ループで吊り下げて、血管制御を改善します。
鉗子の先端を後腹膜腔に配置して腎臓を安定させ、切断プロセス中に腎臓が背側から逃げるのを防ぎます。次に、はさみを使用して、頭蓋の鋭い3分の1の腎結腸切除術を1回の正確な目的のストロークで実行します。止血パッチを貼るか、鈍器による手動圧迫を使用して止血を達成します。
または、血流を減らすためにhilar YASARGILクランプを適用します。.尾側鋭角の3分の1腎結腸切除術を頭蓋結腸切除術と同じ方法で実施します。角張った解剖面を使用して、肺門側により多くの腎実質を保持し、外側に保持することで、肺門の損傷を防ぎ、骨盤系からの尿漏れを減らします。
腎臓を動員した後、鈍いオーバーホールクランプを使用して腎門をトンネルし、ポリフィラメント結紮糸で腎門をスリングします。腹部血管に近い腎門にしっかりとスライドする結び目を置き、腎血流と尿管を閉塞します。ハサミを使用して門を鋭く解剖し、腎臓を切除します。
次に、止血をコントロールし、結紮糸の端を切り取ります。ポリフィラメント縫合糸を使用して腹部筋膜に角縫合糸を配置します。ランニング縫合糸で腹部筋膜を縫合し続け、一口あたり約2ミリメートルの組織をつかみ、各バイトの間隔を4ミリメートル離します。
皮膚層をシングルステッチで縫合し、一口につき3ミリメートルの組織をつかみ、各ステッチの間に6ミリメートルを残します。残存腎実質の生理学的値は、約60%の酸素化レベルを示し、切除後の生存率を示しました。灌流不良の腎組織は、生存不能組織と一致する20.9%で、酸素化レベルが有意に低下しました。
灌流値は、残存腎臓での生理学的灌流を示し、組織の生存率を強化しました。
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本稿では、ラットモデルにおいて鋭的双極切除による5/6腎摘出術を行うための標準化されたプロトコルを提示します。その目的は、技術的誤差を最小限に抑え、精密に腎不全を誘発することにあります。
ラットにおける標準化された5/6腎切除術は、慢性腎臓病の堅牢な前臨床モデルを提供し、腎臓研究におけるメカニズムのリスク低減とトランスレーショナルな継続性を可能にします。このモデルは、再現性のある生物学的複雑性と術中イメージングによる検証へのアクセスを提供することで、製薬および生物分子研究を支援します。その精度と再現性は、腎臓病治療薬の創薬におけるパイプラインの意思決定および部門横断的なR&Dの連携において極めて重要です。
このモデルは、創薬から前臨床段階に至る連続的なプロセスに組み込まれ、腎臓研究におけるリード化合物の同定、メカニズム解析、およびトランスレーショナルなバイオマーカーの検証を支援します。