Performing an In Vitro Genome-Wide CRISPR Knockout Screen in Chimeric Antigen Receptor T Cells

Carli Stewart; Claudia Manriquez Roman; Saad S. Kenderian

doi:10.3791/67338

キメラ抗原受容体T細胞におけるIn vitroゲノムワイドCRISPRノックアウトスクリーニングの実施

JoVE Journal
Cancer Research

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Performing an In Vitro Genome-Wide CRISPR Knockout Screen in Chimeric Antigen Receptor T Cells

キメラ抗原受容体T細胞におけるIn vitroゲノムワイドCRISPRノックアウトスクリーニングの実施

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07:37 min

January 31, 2025

DOI: 10.3791/67338-v

Carli Stewart^1,2,3, Claudia Manriquez Roman^1,4, Saad S. Kenderian^1,5,6

¹T Cell Engineering,Mayo Clinic, ²Mayo Clinic Graduate School of Biomedical Sciences,Mayo Clinic, ³Department of Molecular Pharmacology and Experimental Therapeutics,Mayo Clinic, ⁴Center for Regenerative Biotherapeutics,Mayo Clinic, ⁵Division of Hematology,Mayo Clinic, ⁶Department of Immunology,Mayo Clinic

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この記事では、健康なドナーキメラ抗原受容体T細胞におけるゲノムワイドCRISPRノックアウトスクリーニングを完了するための消耗に対する in vitro モデルの適用に関するプロトコルについて説明しています。

カー T 細胞療法は、10 年以上にわたって寛解をもたらしてきた革新的なタイプのがん免疫療法です。ただし、永続的な応答の割合は依然として限られています。このプロトコルにより、耐性の背後にあるメカニズムの理解を深め、CAR T 細胞療法に対する反応を改善するツールを作成することを目指しています。

現在、CAR T 細胞療法を改善するために、併用療法や CAR 設計の最適化など、多くのアプローチが採用されています。しかし、注入前のCAR T細胞産物のエピジェネティックプロファイルが重要な決定反応であるという証拠が増えているため、遺伝子編集技術が一般的なツールになっています。

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