Name: 生および調理済み鶏肉製品中の サルモネラ菌 を定量するための修正最確数アッセイ (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-31T14:55:00.000+00:00
Duration: 8 min 19 s
Description: 学ぶ 修正最確数アッセイを用いた生および調理済み鶏肉製品中のSalmonella enterica serovar Typhimuriumの定量法。FSIS基準に準拠した迅速かつ高感度な食品衛生検査手法を確立し、食中毒菌の正確な検出と公衆衛生の向上に貢献します。

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<ol><li>Batz, M., Hoffmann, S., Morris, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disease-outcome+trees%2C+eq-5d+scores%2C+and+estimated+annual+losses+of+quality-adjusted+life+years+%28qalys%29+for+14+foodborne+pathogens+in+the+united+states%5BTitle%5D)+AND+%22Foodborne+Pathogens+and+Disease%22%5BJournal%5D)">Disease-outcome trees, eq-5d scores, and estimated annual losses of quality-adjusted life years (qalys) for 14 foodborne pathogens in the united states.</a> Foodborne Pathogens and Disease. 11 (5), 395-402 (2014).</li>
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<li>Irwin, P., Reed, S., Brewster, J., Nguyen, L., He, Y. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-stochastic+sampling+error+in+quantal+analyses+for+campylobacter+species+on+poultry+products%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+and+Bioanalytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Non-stochastic sampling error in quantal analyses for campylobacter species on poultry products.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 405 (7), 2353-2369 (2013).</li>
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<li>Jarvis, B., Wilrich, C., Wilrich, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reconsideration+of+the+derivation+of+most+probable+numbers%2C+their+standard+deviations%2C+confidence+bounds+and+rarity+values%5BTitle%5D)+AND+%22J+Appl+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Reconsideration of the derivation of most probable numbers, their standard deviations, confidence bounds and rarity values.</a> J Appl Microbiol. 109 (5), 1660-1667 (2010).</li>
<li>Stevens, R., Poppe, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+clinical+prediction+models%3A+What+does+the+%26%2334%3Bcalibration+slope%26%2334%3B+really+measure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Epidemiology%22%5BJournal%5D)">Validation of clinical prediction models: What does the &#34;calibration slope&#34; really measure.</a> Journal of Clinical Epidemiology. 118, (2019).</li>
<li>Miller, M. E., Hui, S. L., Tierney, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+techniques+for+logistic+regression+models%5BTitle%5D)+AND+%22Statistics+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">Validation techniques for logistic regression models.</a> Statistics in Medicine. 10 (8), 1213-1226 (1991).</li>
<li>Galán-Relaño, Á, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Salmonella+and+salmonellosis%3A+An+update+on+public+health+implications+and+control+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Animals%22%5BJournal%5D)">Salmonella and salmonellosis: An update on public health implications and control strategies.</a> Animals. 13 (23), 3666(2023).</li>
<li>Gorski, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+assessment+of+salmonella+enterica+multi-serovar+populations+in+poultry+rinsates+with+commonly+used+enrichment+and+plating+media%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Growth assessment of salmonella enterica multi-serovar populations in poultry rinsates with commonly used enrichment and plating media.</a> Food Microbiology. 119, 104431(2024).</li>
<li>Schmidt, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+methods+for+identifying+poultry+wing+rinses+with+salmonella+concentrations+greater+than+or+equal+to+10+cfu%2Fml%5BTitle%5D)+AND+%22J+Food+Prot%22%5BJournal%5D)">Evaluation of methods for identifying poultry wing rinses with salmonella concentrations greater than or equal to 10 cfu/ml.</a> J Food Prot. 87 (11), 100362(2024).</li>
<li>Gorski, A., Liang, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+enrichment+medium+on+real-time+detection+of+salmonella+enterica+from+lettuce+and+tomato+enrichment+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Food+Protection%22%5BJournal%5D)">Effect of enrichment medium on real-time detection of salmonella enterica from lettuce and tomato enrichment cultures.</a> Journal of Food Protection. 73 (6), 1047-1056 (2010).</li>
<li>Guillén, S., Nadal, L., Álvarez, I., Mañas, P., Cebrián, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+the+resistance+responses+to+stress+conditions+encountered+in+food+and+food+processing+environments+on+the+virulence+and+growth+fitness+of+non-typhoidal+salmonellae%5BTitle%5D)+AND+%22Foods%22%5BJournal%5D)">Impact of the resistance responses to stress conditions encountered in food and food processing environments on the virulence and growth fitness of non-typhoidal salmonellae.</a> Foods. 10 (3), 617(2021).</li>
<li>Rohde, A., Hammerl, J. A., Appel, B., Dieckmann, R., Al Dahouk, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sampling+and+homogenization+strategies+significantly+influence+the+detection+of+foodborne+pathogens+in+meat%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Sampling and homogenization strategies significantly influence the detection of foodborne pathogens in meat.</a> BioMed Research International. 2015, (2015).</li>
<li>Wang, D., Wang, Z., He, F., Kinchla, A. J., Nugen, S. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enzymatic+digestion+for+improved+bacteria+separation+from+leafy+green+vegetables%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Food+Protection%22%5BJournal%5D)">Enzymatic digestion for improved bacteria separation from leafy green vegetables.</a> Journal of Food Protection. 79 (8), 1378-1386 (2016).</li>
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<li>Hannah, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+stomaching+on+numbers+of+bacteria+recovered+from+chicken+skin%5BTitle%5D)+AND+%22Poultry+Science%22%5BJournal%5D)">Effect of stomaching on numbers of bacteria recovered from chicken skin.</a> Poultry Science. 90 (2), 491-493 (2011).</li>
<li>Mcmeekin, T., Thomas, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retention+of+bacteria+on+chicken+skin+after+immersion+in+bacterial+suspensions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Bacteriology%22%5BJournal%5D)">Retention of bacteria on chicken skin after immersion in bacterial suspensions.</a> Journal of Applied Bacteriology. 45 (3), 383-387 (1978).</li>
<li>Rodrigues-Szulc, U., Ventoura, G., Mackey, B., Payne, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+physicochemical+detachment%2C+separation+and+concentration+of+bacteria+from+beef+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Bacteriology%22%5BJournal%5D)">Rapid physicochemical detachment, separation and concentration of bacteria from beef surfaces.</a> Journal of Applied Bacteriology. 80 (6), 673-681 (1996).</li>
<li>Vibbert, H. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerating+sample+preparation+through+enzyme-assisted+microfiltration+of+salmonella+in+chicken+extract%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnol+Prog%22%5BJournal%5D)">Accelerating sample preparation through enzyme-assisted microfiltration of salmonella in chicken extract.</a> Biotechnol Prog. 31 (6), 1551-1562 (2015).</li>
<li>Armstrong, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+a+commercial+tissue+dissociation+system+to+detect+salmonella-contaminated+poultry+products%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+and+Bioanalytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Use of a commercial tissue dissociation system to detect salmonella-contaminated poultry products.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 416 (3), 621-626 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>48ディープウェルブロック4.6ml</td><td>Fisher Scientific International, Inc</td><td>NC1964628</td><td></td></tr><tr><td>寒天 - 固化剤 (Difco)</td><td>Becton, Dickinson and Company (BD)</td><td>281230</td><td></td></tr><tr><td>分析天びん</td><td>メトラー・トレド</td><td>JL602-G/L</td><td>機器&nbsp;</td></tr><tr><td>分析天びん</td><td>メトラー・トレド</td><td>AB54-S</td><td>装置&nbsp;</td></tr><tr><td>オートクレーブ - Amsco Lab250、実験室用蒸気滅菌器</td><td>Steris plc</td><td>LV-250</td><td>Equipment&nbsp;</td></tr><tr><td>バイオセーフティキャビネット タイプA2 清浄機ロジック+</td><td>Labconco Corporation</td><td>302411101</td><td>Equipment&nbsp;</td></tr><tr><td>Brain Heart Infusion (BHI) Broth</td><td>Becton, Dickinson and Company (BD)</td><td>237500</td><td></td></tr><tr><td>バッファード ペプトン水</td><td>Bio-Rad Laboratories Inc.</td><td></td><td></td>3564684</tr><tr><td>セルスプレッダー - L字型</td><td>VWR</td><td>76208-438</td><td></td></tr><tr><td>遠心分離機 微量遠心分離機 5424</td><td>エッペンドルフ</td><td>5424</td><td>機器</td></tr><tr><td>遠心分離機、Avanti J-25</td><td>Beckman Coulter, Inc.&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>装置: DNA 抽出 - PreMan Ultra サンプル調製試薬&nbsp;</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック社&nbsp;</td><td></td><td></td>4318930</tr><tr><td>鶏ひき肉&nbsp;</td><td>地元の小売業者</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IACフォワード&nbsp;プライマー:5'-GGCGCGCCTAACACACATCT-3'Integrated</td> <td>DNA Technologies&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>IACプローブ:5'-TTACAACGGGAGAAGACAATGC CACCA-3'を5' TAMRA/3' BHQ-2</td><td>Biosearch Technologies</td><td></td><td></td>で標識</tr><tr><td>IACリバースプライマー:5'-TGGAAGCAATGCCAAATGTA-3'Integrated</td> <td>DNA Technologies&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>インキュベーター - Inova 4230インキュベーターシェーカー</td><td>New Brunswick Scientific</td><td>4230</td><td>Equipment&nbsp;</td></tr><tr><td>接種ループ - Combi Loop&nbsp; 10&micro;Lおよび1&micro;L&nbsp;</td><td>フィッシャーサイエンティフィックインターナショナル株式会社</td><td>22-363-602</td><td></td></tr><tr><td>invAフォワードプライマー:5'-GTTGAGGATGTTATTCGCAAAG G-3'Integrated</td> <td>DNA Technologies&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>invAプローブ:5'-CCGTCAGACCTCTGGCAGTAC CTTCCTC-3'標識、5' Cal Fluor Orange 560/3' BHQ-1</td><td>Biosearch Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>、invAリバースプライマー:5'-GGAGGCTTCCGGGTCAAG-3'Integrated</td> <td>DNA Technologies&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>照射治療テ</td><td>キサスA&M Agrilife Research National Center for Electron Beam Research</td><td></td><td>Service</td></tr><tr><td>Luria Bertani (LB) Broth</td><td>Becton, Dickinson and Company (BD)</td><td>244620</td><td></td></tr><tr><td>手動ピペット Pipet-Lite LTS ピペット L-1000XLS+</td><td>メトラー・トレド</td><td>17014382</td><td>装置</td></tr><tr><td>手動ピペット Pipet-Lite LTS ピペット L-100XLS+</td><td>メトラー・トレド</td><td>17014384</td><td>装置</td></tr><tr><td>手動ピペット Pipet-Lite LTS ピペット L-10XLS+</td><td>メトラー・トレド</td><td>17014388</td><td>機器</td></tr><tr><td>手動ピペット Pipet-Lite LTS ピペット L-200XLS+</td><td>メトラー・トレド</td><td>17014391</td><td>機器</td></tr><tr><td>手動ピペット Pipet-Lite LTS ピペット L-20XLS+</td><td>メトラー・トレド</td><td>17014392</td><td>機器</td></tr><tr><td>手動ピペット Pipet-Lite マルチピペット L8-200XLS+</td><td>メトラー・トレド</td><td>17013805</td><td>装置</td></tr><tr><td>マニュアルピペット Pipet-Lite マルチピペット L8-20XLS+</td><td>メトラー・トレド</td><td>17013803</td><td>装置</td></tr><tr><td>用メディア収納ボトル -PYREX 1L 角ガラス&nbsp;ボトル、GL45スクリューキャップ付き</td><td>Corning Inc.</td><td>1396-1L</td><td>機器</td></tr><tr><td>メディア収納ボトル -PYREX 2L丸型広口ボトル、GLS80スクリューキャップ付き</td><td>Corning Inc.</td><td>1397-2L</td><td>機器</td></tr><tr><td>マイクロタイタープレート、96ウェルプレート、平底、ポリスチレン、0.34cm2、滅菌、108/cs</td><td>MilliporeSigma</td><td>Z707902</td><td></td></tr><tr><td>ミキサー - Vortex Genie 2</td><td>Scientific Industries Inc.</td><td>SI-0236</td><td></td></tr><tr><td>装置 分子検出アッセイ 2-サルモネラ菌キット</td><td>Neogen</td><td>MDA2SAL96</td><td></td></tr><tr><td>分子検出装置&nbsp;</td><td>ネオジェン</td><td>MDS100</td><td>機器&nbsp;</td></tr><tr><td>電動ピペットコントローラー</td><td>PIPETBOY2 INTEGRA Biosciences Corp.</td><td>155019</td><td>機器</td></tr><tr><td>PCRマスターミックス2&times;TaqMan 遺伝子発現&nbsp;</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック社&nbsp;</td><td></td><td></td>4369542</tr><tr><td>ペトリ皿ローテーター -&nbsp; bioWORLD 接種ターンテーブル</td><td>フィッシャーサイエンティフィックインターナショナル株式会社</td><td>3489E20</td><td></td></tr><tr><td>クリアリッド付きペトリ皿 (100 mm x 15mm)</td><td>フィッシャーサイエンティフィックインターナショナル株式会社</td><td>FB0875713</td><td></td></tr><tr><td>ピペットチップ GP LTS 1000&micro;L S 768A/8</td><td>メトラー・トレド</td><td>&nbsp;</td><td></td>30389273</tr><tr><td>ピペットチップGP LTS 20&micro;L 960A/10</td><td>メトラー・トレド</td><td>30389270</td><td></td></tr><tr><td>ピペットチップ GP LTS 200&micro;L F 960A/10</td><td>メトラー・トレド</td><td>30389276</td><td></td></tr><tr><td>鶏肉製品を調理する準備ができ</td>ました <td>地元の小売店</td><td></td><td></td></tr><tr><td>試薬リザーバー、マルチチャンネルピペッターで使用される25 mL滅菌リザーバー</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック社&nbsp;</td><td>8093-11</td><td></td></tr><tr><td>リアルタイム PCR - 7500 リアルタイム PCR システム&nbsp;</td><td>(Applied Biosystems, Foster City, CA)</td><td>2750036476</td><td>Equipment</td></tr><tr><td>Serological Pipettes, Nunc Serological Pipettes (10 mL)</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック社&nbsp;</td><td>170356N</td><td></td></tr><tr><td>血清ピペット、Nunc 血清ピペット (2 mL)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.&nbsp;</td><td>170372N</td><td></td></tr><tr><td>血清ピペット、Nunc 血清ピペット (25 mL)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.&nbsp;</td><td>170357N</td><td></td></tr><tr><td>血清ピペット、Nunc 血清ピペット (50 mL)</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc.&nbsp;</td><td>170376N</td><td></td></tr><tr><td>スプレッダー - フィッシャーブランド L 字型セルスプレッダー</td><td>フィッシャー・サイエンティフィック・インターナショナル社</td><td>14-665-230</td><td></td></tr><tr><td>ストマッカーバッグ、Nasco Whirl-Pak ライトオン ホモジナイザー ブレンダー フィルターバッグ</td><td>サーモフィッシャーサイエンティフィック社&nbsp;</td><td>01-812</td><td></td></tr><tr><td>Stomacher 80 Biomaster Lab Blender</td><td>Seward</td><td>30010019</td><td>Equipment</td></tr><tr><td>Thermocycler (GeneAmp PCR system 9700)</td><td>Applied Biosystems</td><td>535028293</td><td>Equipment</td></tr><tr><td>Water Filtration - Elga Veolia Purelab Flex&nbsp;</td><td>Elga LabWater</td><td>PF2XXXXM1-US</td><td>Equipment</td></tr><tr><td>Whirlpakバッグ1.63L&nbsp;</td><td>フォルクスワール</td><td>11216-777</td><td></td></tr></tbody></table>

生および調理済み鶏肉製品中の サルモネラ菌 を定量するための修正最確数アッセイ

Modified Most Probable Number Assay to Quantify Salmonella in Raw and Ready-to-Cook Chicken Products

照射肉 回帰分析では、傾き 1 は、独立変数 (x 軸) が単位増加するごとに、従属変数 (y 軸) が正確に 1 単位増加することを示します。これは、2 つの変数間の比例関係を示唆しており、従属変数の変化は独立変数の変化を反映していることを意味します。切片が 0 の場合、独立変数が 0 の場合、従属変数も 0 になります。これは、2つの変数間の関係に固定オフセットやバイアスがないことを示唆しています。傾き 1 と切片 0 を合わせると、変数11,12 が一致していることが示唆されます。この理想的なシナリオは、系統的なエラーやバイアスがないことを示しており、測定値が予測と完全に一致する、適切に調整されたシステムで期待される結果になります。
図3A は、ステップ3.1.1のノートで説明したスプレッドプレート分析によって検証された理論上の接種物に対してプロットされたMPN...

Salmonella is a leading cause of foodborne illness in the United States, particularly in poultry products. Traditional methods for detecting Salmonella ...

modified-most-probable-number-assay-to-quantify-salmonella-raw-ready

Research

JoVE Journal

Biology

生物学

このプロトコルは、急速な細胞全体の検出に続いてトマトや他の生鮮食品の表面のサンプリングのための簡単​​な粘着テープベースのアプローチを、説明して...

粘着テープベースのサンプリングと蛍光の組み合わせその場で</emの迅速検出のための>ハイブリダイゼーションサルモネラ生鮮食品について

大量の農業用水に含まれる食品媒介病原体の統合濃度、濃縮、エンドポイント比色検出を含むプロトコルがここに提示されています。...

比色検出の紙ベース<em&gt;エシェリヒア·コリ</em&gt;<em&gt;サルモネラ</em&gt;属、および<em&gt;リステリア菌</em&gt;農業大量の水から

サルモネラ赤痢は下痢に起因する一般的な病原体。ここでは、サルモネラ属菌のスクリーニングのための高スループット プラットフォームについて述べる/リアルタイム PCR...

サルモネラ属菌のスクリーニングのための高スループット プラットフォーム/赤痢菌属

ここでは、協調検出およびサルモネラの quasimetagenomic シーケンスを通じてサブタイピングの食糧および環境内細菌叢解析からの DNA のサンプルを準備するためのプロトコルを提案する.併用文化濃縮、原因菌分離 (IMS)、複数の変位の増幅 (MDA) により、サルモネラ食糧および環境試料からゲノム DNA...

食品および環境試料からのサルモネラの準メタゲノム解析

細菌の適合性を決定するためのこの分子ベースのアプローチは、デジタルPCRを介して定量化されたユニークなゲノムDNAバーコードを使用して微生物の正確かつ正確な検出を容易にします。プロトコルは、サルモネラ株の競争力指数の計算について説明します。しかし、この技術は、遺伝的に可鍛性の生物の絶対的な定量を必要とするプロトコルに容易に適応可能である。...

サルモネラ菌におけるフィットネスのハイスループット分析に関するデジタルPCRベースの競争指数

ここでは、NF-κB::ルシフェラーゼレポーター構築物を発現する細胞株における活性化B細胞(NF-κB)の核因子カッパ軽鎖増強剤を迅速かつ容易に測定するプロトコルを提示し、細胞溶解物中の発光の測定を行う。さらに、遺伝子発現は、サルモネラ・チフィムリウムに感染した細胞から単離されたRT-qPCRを介して決定される。...

サルモネラ感染組織培養細胞におけるNF-κB依存性ルシフェラーゼ活性化と遺伝子発現の定量

ループ媒介等温増幅(LAMP)は、病原体検出分野に広く関心を集めている等温核酸増幅試験(iNAAT)です。ここでは、動物性食品中のサルモネラ菌をスクリーニングし、培養分離から推定サルモネラ菌を確認するための迅速で信頼性の高い、堅牢な方法として、マルチラボ検証されたサルモネラLAMPプロトコルを提示します。...

動物性食品中の サルモネラ菌 をスクリーニングし、培養分離から サルモネラ菌 を確認するためのループ媒介等温増幅

λ-Red媒介組換え系を用いて、小さなノンコーディングRNA micCの欠失変異体を作製した。...

ノンコード低分子RNA MicCは、 サルモネラ ・エンテリティディスの外膜タンパク質の病原性に寄与します

ここでは、インテリジェントなハイスループット抗菌感受性試験/ファージスクリーニングシステムの原理、構造、および指示を紹介します。その応用例は、中国山東省の家禽から分離された サルモネラ菌...

インテリジェントハイスループット抗菌感受性試験/ファージスクリーニングシステムの適用と薬剤耐性指数

カンピロバクター は、世界中の細菌性食品媒介性胃腸炎の主な原因です。施設が施設全体の蔓延を減らすための対策を講じているにもかかわらず、汚染された製品は一貫して消費者に届いています。過去12年間に開発されたこの技術は、生肉から カンピロバクター...

生肉からの カンピロバクター 属菌の検出と分離

学ぶ 修正最確数アッセイを用いた生および調理済み鶏肉製品中のSalmonella enterica serovar Typhimuriumの定量法。FSIS基準に準拠した迅速かつ高感度な食品衛生検査手法を確立し、食中毒菌の正確な検出と公衆衛生の向上に貢献します。

生および調理済み鶏肉製品中のサルモネラ菌を定量するための修正最確数アッセイ

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生および調理済み鶏肉製品中の サルモネラ菌 を定量するための修正最確数アッセイ

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