Standardized Modular Assembly of Polycistronic Operons with Modular Cloning (MoClo) using the <em>In-Cloning</em> toolkit

Jelmar de Vries; Timon A. Lindeboom; Stijn T. de Vries; Daniel Schindler; Stefan A. Hoffmann

doi:10.3791/68103

In-Cloning ツールキットを使用したモジュラークローニング (MoClo) によるポリシストロニック...

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Bioengineering

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Standardized Modular Assembly of Polycistronic Operons with Modular Cloning (MoClo) using the In-Cloning toolkit

In-Cloning ツールキットを使用したモジュラークローニング (MoClo) によるポリシストロニックオペロンの標準化されたモジュラーアセンブリ

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06:28 min

September 2, 2025

DOI: 10.3791/68103-v

Jelmar de Vries¹, Timon A. Lindeboom², Stijn T. de Vries², Daniel Schindler^2,3,4, Stefan A. Hoffmann¹

¹Laboratory of Systems and Synthetic Biology (SSB),Wageningen University and Research, Agrotechnology and Food Sciences, ²Max Planck Institute for Terrestrial Microbiology, ³Center for Molecular Biology of Heidelberg University (ZMBH), ⁴Center for Synthetic Microbiology,Philipps-University Marburg

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

この記事では、モジュラークローニング(MoClo)をポリシストロンオペロンクローニングにどのように適応させることができるかを示すステップバイステップのプロトコルを紹介します。

私は、小さな個々の分子部品から染色体サイズの構造体までモジュール式DNA組み立てを可能にする方法を開発し、これらの人工染色体で細胞を再プログラムする技術を開発しました。この分野における重要な革新の一つは、標準化された分子部品ライブラリから多遺伝子構成体をモジュール化組み立て可能なモジュールクローンツールキットの開発です。モジュール式クローニングツールキットは通常、モノシストロン転写単位のクローンを目的に設計されています。

このプロトコルは、インクローニングツールキットを用いたポリシストロン転写単位の組み立ての汎用的な方法を示しています。このポリシストロニック転写単位のクローニング戦略により、コーディング配列は個々の転写単位でもポリシストロニック配列でも柔軟に使用可能となります。まず、レベル0の部品を選択して転写ユニットに組み立てます。

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