Name: 定量的研究のための小動物血管系の迅速なホールマウント高分解能イメージング (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-05-23T14:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 49 s
Description: 学ぼう、ライトシート蛍光顕微鏡と計算流体力学を用いた小動物血管系の迅速なホールマウント三次元イメージング法。鶏胚咽頭弓動脈モデルで血流力を定量化し、先天性心疾患の病態形成メカニズム解明に貢献します。

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<ol><li>Lindsey, S. E., Butcher, J. T., Vignon-Clementel, I. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cohort-based+multiscale+analysis+of+hemodynamic-driven+growth+and+remodeling+of+the+embryonic+pharyngeal+arch+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Cohort-based multiscale analysis of hemodynamic-driven growth and remodeling of the embryonic pharyngeal arch arteries.</a> Development. 145 (20), dev162578(2018).</li>
<li>Lindsey, S. E., Vignon-Clementel, I. E., Butcher, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+early+cardiac+outflow+tract+adaptive+responses+through+combined+experimental-computational+manipulations%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">Assessing early cardiac outflow tract adaptive responses through combined experimental-computational manipulations.</a> Ann Biomed Eng. 49 (12), 3227-3242 (2021).</li>
<li>Salman, H. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+left+atrial+ligation-driven+altered+inflow+hemodynamics+on+embryonic+heart+development%3A+Clues+for+prenatal+progression+of+hypoplastic+left+heart+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Biomech+Model+Mechanobiol%22%5BJournal%5D)">Effect of left atrial ligation-driven altered inflow hemodynamics on embryonic heart development: Clues for prenatal progression of hypoplastic left heart syndrome.</a> Biomech Model Mechanobiol. 20 (2), 733-750 (2021).</li>
<li>Henning, A. L., Jiang, M. X., Yalcin, H. C., Butcher, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+three-dimensional+imaging+of+live+avian+embryonic+morphogenesis+via+micro-computed+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Dyn%22%5BJournal%5D)">Quantitative three-dimensional imaging of live avian embryonic morphogenesis via micro-computed tomography.</a> Dev Dyn. 240 (8), 1949-1957 (2011).</li>
<li>Anbazhakan, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+flow+modeling+reveals+improved+collateral+artery+performance+during+the+regenerative+period+in+mammalian+hearts%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Blood flow modeling reveals improved collateral artery performance during the regenerative period in mammalian hearts.</a> Nat Cardiovasc Res. 1 (8), 775-790 (2022).</li>
<li>Pan, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shrinkage-mediated+imaging+of+entire+organs+and+organisms+using+uDISCO%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Shrinkage-mediated imaging of entire organs and organisms using uDISCO.</a> Nat Methods. 13 (10), 859-867 (2016).</li>
<li>Renier, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((iDISCO%3A+a+simple%2C+rapid+method+to+immunolabel+large+tissue+samples+for+volume+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">iDISCO: a simple, rapid method to immunolabel large tissue samples for volume imaging.</a> Cell. 159 (4), 896-910 (2016).</li>
<li>Vieites-Prado, A., Renier, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+clearing+and+3D+imaging+in+developmental+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Tissue clearing and 3D imaging in developmental biology.</a> Development. 148 (18), dev199369(2021).</li>
<li>Rios Coronado, P. E., Red-Horse, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+cardiovascular+research+with+whole-organ+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Hematol%22%5BJournal%5D)">Enhancing cardiovascular research with whole-organ imaging.</a> Curr Opin Hematol. 28 (3), 214-220 (2021).</li>
<li>Miller, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confocal+imaging+of+the+embryonic+heart%3A+How+deep%5BTitle%5D)+AND+%22Microsc+Microanal%22%5BJournal%5D)">Confocal imaging of the embryonic heart: How deep.</a> Microsc Microanal. 11 (3), 216-223 (2005).</li>
<li>Renier, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+of+brain+activity+by+automated+volume+analysis+of+immediate+early+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Mapping of brain activity by automated volume analysis of immediate early genes.</a> Cell. 165 (7), 1789-1802 (2016).</li>
<li>Lindsey, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Growth+and+hemodynamics+after+early+embryonic+aortic+arch+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Biomech+Model+Mechanobiol%22%5BJournal%5D)">Growth and hemodynamics after early embryonic aortic arch occlusion.</a> Biomech Model Mechanobiol. 14 (4), 735-751 (2015).</li>
<li>Humphrey, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Constrained+mixture+models+of+soft+tissue+growth+and+remodeling-twenty+years+after%5BTitle%5D)+AND+%22J+Elast%22%5BJournal%5D)">Constrained mixture models of soft tissue growth and remodeling-twenty years after.</a> J Elast. 145 (1), 49-75 (2021).</li>
<li>Updegrove, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SimVascular%3A+An+open-source+pipeline+for+cardiovascular+simulation%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Biomed+Eng%22%5BJournal%5D)">SimVascular: An open-source pipeline for cardiovascular simulation.</a> Ann Biomed Eng. 45 (3), 525-541 (2017).</li>
<li>Kim, J. S., Min, J., Recknagel, A. K., Riccio, M., Butcher, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+three-dimensional+analysis+of+embryonic+chick+morphogenesis+via+microcomputed+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Anat+Rec%22%5BJournal%5D)">Quantitative three-dimensional analysis of embryonic chick morphogenesis via microcomputed tomography.</a> Anat Rec. 294 (1), 1-10 (2011).</li>
<li>Zhang, D., Lindsey, S. Evaluation of high-resolution image accuracy for small animal vascular flow quantitation. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aZhang%2C+D+%22Bull+Am+Phys+Soc%22">Bull Am Phys Soc</a>. , https://meetings.aps.org/Meeting/DFD24/Session/X03.8 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>#5鉗子</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>11252-30</td><td></td></tr><tr><td>#55鉗子</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>11295-510.03</td><td></td></tr><tr><td>インチ内径シリコンチューブ</td><td>VWR</td><td>32829-182</td><td></td></tr><tr><td>20&mu;Lピペットチップ&nbsp;</td><td>VWR</td><td>76322-134</td><td></td></tr><tr><td>35 mm ペトリ皿&nbsp;</td><td>VWR</td><td>10799-192</td><td></td></tr><tr><td>5 mLプラスチックシリンジ&nbsp;</td><td>VWR</td><td>BD 309646</td><td></td></tr><tr><td>ジクロロメタン (DCM)</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>270997</td><td>MSDS を参照してください。ヒュームフードの下のサイドキャビネットに保管</td></tr> エ<tr><td>チル桂皮酸 (ECi)</td><td>シグマ・アルドリッチ</td><td>112372</td><td>4 度で保管。C</td></tr><tr><td>細かい湾曲したはさみ&nbsp;</td><td>ファインサイエンスツール</td><td>14061-09</td><td></td></tr><tr><td>FITC-ポリ-L-リジン</td><td>シグマ-アルドリッチ</td><td>P3069-20</td>&<td>°Cで保存;C(粉末、原液)、4&ordm;C(ワーキング溶液)</td></tr><tr><td>蛍光顕微鏡</td><td>EVIDENT SCIENTIFIC</td><td>MVX10</td><td></td></tr><tr><td>ガラス毛細管(0.75 mm ID)&nbsp;</td><td>サッター機器</td><td>FG-GB100-75-10</td><td></td></tr><tr><td>ライトシート顕微鏡</td><td>ツァイス</td><td>Z.1 システム</td><td></td></tr><tr><td>メタノール</td><td>シグマ アルドリッチ</td><td>M1775</td><td>MSDS を参照してください。ヒュームフードの下の可燃性キャビネットに保管</td></tr><tr><td>Microforge</td><td>Narishige International USA, Inc.</td><td>MF2</td><td></td></tr>マイクロ<tr><td>マニピュレーターWorld</td><td>Percision Instrrument</td><td>M3301R</td><td></td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド(PFA)4%</td><td>Thermo Scientific</td><td>J19943。K2</td><td>MSDSを参照してください。-20°Cで保管。C(粉末)、4&deg;C(4%ワーキング溶液)</td></tr>リン<tr><td>酸緩衝生理食塩水(PBS)</td><td>Cytiva</td><td>SH30256.01</td><td>Tyrode</td></tr>'の卓上型<tr><td>SimVascular</td><td></td><td></td><td>オープンソースソフトウェア www.simvascular.org</td></tr> 保存<tr><td>s ソリューション</td><td></td><td></td> 自<td>社製</td></tr></tbody></table>

定量的研究のための小動物血管系の迅速なホールマウント高分解能イメージング

Rapid Whole-Mount High-Resolution Imaging of Small Animal Vasculature for Quantitative Studies

ここに示す迅速なホールマウント高解像度イメージングプロトコル(図1、表1)は、 図2、 図3、 および図4に示すように、明確に輪郭が描かれた血管内腔を生成します。ニワトリの胚血管系内皮はGFP蛍光であるため、初期から成熟した心臓の発達までの胚段階にわたって緑色で輪郭が描かれています(図4).サンプルの血管系が明確にラベル付けされていないように見える場合は、ポリ-L-リジン濃度、色素固定時間、および心室収縮の使用(該当する場合)の適切な組み合わせを見つけることが重要です(LSFMイメージングの前に蛍光ステレオスコープまたはマクロスコープで胚がどのように見えるかについては、 図2 を参照してください)。温かいタイロード溶液で心臓の鼓動を維持し、卵黄袋から胚を迅速に解剖することで、サンプル...

In small animal models of cardiovascular development and diseases, subject-specific computational simulations of blood flow&#160;enable quantitative ...

rapid-whole-mount-high-resolution-imaging-small-animal-vasculature

Research

JoVE Journal

Bioengineering

バイオエンジニアリング（生体工学）

microCTによる造影小動物の血管イメージングは​​、シリアルのための迅速かつコスト効率と高スループットのテクニックです...

MicroCTを使用して造影血管イメージング

冠状血管の可視化は、心血管疾患の我々の理解を進めることが重要です。ここでは、マイクロコンピューター断層撮影​​（μCT）イメージングの準備のために、放射線不透過性シリコーンゴム（Microfil）とマウス冠状動脈血管を灌流する方法を説明します。...

マイクロCTイメージングのための準備として、逆行性灌流およびマウスの冠動脈血管系の充填

このプロトコルは、真空安定化イメージングウィンドウを使用して、無傷の肺の長期高解像度シングルセルイメージングをリアルタイムで行うための多光子顕微鏡の使用を説明しています。...

真空安定化撮像窓と肺における長期高分解能生体顕微鏡

この原稿が縦2光子顕微鏡を用いたin vivoでのアミロイド斑の蓄積の間に脳血管系のリモデリングを追跡するための手順を説明します。間引き頭蓋骨製剤は、アルツハイマー病のマウスモデルにおける脳損傷の進行を評価するために、蛍光色素の可視化を可能にします。...

縦<em&gt;インビボ</em&gt;脳血管系のイメージング：中枢神経系疾患との関連

このプロトコルは細胞特異的蛍光マーカーを発現するトランスジェニック マウスの生体イメージングを説明します。生体イメージングは、プロセスの顕微可視化が可能な埋込型の windows...

腫瘍関連血管系を使用しての生体顕微鏡が背高度な蛍光トランスジェニック マウスの皮下脂肪のウィンドウの部屋

放射線不透過性鉛ベースのシリコーンゴムを使用して大動脈径の大動脈瘤マウスモデルで定量化のためマウスの血管を灌流する詳細な方法について説明します。...

Aortopathy β-アミノプロピオニ トリルによる大動脈瘤と解離のマウスモデルでのマイクロ CT 定量分析

広視野イメージングとリアルタイムイメージングを統合したデュアルラスタースキャン光音響イメージャーが設計されました。...

血管可視化のための二重ラスター走査光音響小動物イメージャー

我々は、組織形質転換と染色の新たな進歩と軸走査型ライトシート顕微鏡の開発を組み合わせることにより、マウス心臓全体のメゾスコピック再構成法を報告する。...

マウス心臓全体のメゾスコピック光学イメージング

ここでは、小動物を対象とした高解像度陽電子放射断層撮影/コンピュータ断層撮影法を用いて心機能と形態を定量化するための実験的イメージングプロトコルを紹介します。マウスとラットの両方を検討し、2つの種に対するコンピューター断層撮影造影剤の異なる要件について議論します。...

小動物用高分解能心臓陽電子放出断層撮影/コンピュータ断層撮影

高い空間分解能(100μm)と感度を備えた超高速ドップラー超音波(UFUS)は、肝臓血管系の包括的な定性的概要を得るための適切な非侵襲的イメージングモダリティを表しています。UFUSはまた、微小血管系の定量的測定を容易にし、血管疾患のメカニズムの理解を深めることを目的としています。...

超高速ドップラー超音波を用いたマウスの肝血管系のイメージングと定量化

ここでは、ラットの脳微小血管系を画像化するために12.5μmの空間分解能を達成する超音波局在顕微鏡(ULM)のプロトコルについて説明します。血流の方向や速度を詳細に可視化し、脳循環や血管疾患の研究を進めるための強力なツールを提供します。...

超音波ローカリゼーション顕微鏡を用いたラット脳微小血管系の2次元超解像可視化

学ぼう、ライトシート蛍光顕微鏡と計算流体力学を用いた小動物血管系の迅速なホールマウント三次元イメージング法。鶏胚咽頭弓動脈モデルで血流力を定量化し、先天性心疾患の病態形成メカニズム解明に貢献します。

定量的研究のための小動物血管系の迅速なホールマウント高分解能イメージング

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