Name: 新しい検出および定量法としてのロック核酸 in situ ハイブリダイゼーションによるマイクロRNA増幅と認識 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-07T12:30:00.000+00:00
Duration: 9 min 6 s
Description: 学ぶロック核酸in situハイブリダイゼーションによるマイクロRNAとタンパク質の同時検出・定量法。FFPE組織を用いて腫瘍微小環境における分子間の空間的関係を観察し、がん生物学研究やバイオマーカー探索に応用できます。

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<ol><li>Smolarz, B., Nowak, A. Z., Romanowicz, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breast+cancer-epidemiology%2C+classification%2C+pathogenesis+and+treatment+%28review+of+literature%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cancers%22%5BJournal%5D)">Breast cancer-epidemiology, classification, pathogenesis and treatment (review of literature).</a> Cancers. 14 (10), 2569(2022).</li>
<li>Davis-Dusenbery, B. N., Hata, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microrna+in+cancer%3A+The+involvement+of+aberrant+microrna+biogenesis+regulatory+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Cancer%22%5BJournal%5D)">Microrna in cancer: The involvement of aberrant microrna biogenesis regulatory pathways.</a> Genes Cancer. 1 (11), 1100-1114 (2010).</li>
<li>Peng, Y., Croce, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+microRNAs+in+human+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Signal+Transduct+Targeted+Ther%22%5BJournal%5D)">The role of microRNAs in human cancer.</a> Signal Transduct Targeted Ther. 1 (1), 15004(2016).</li>
<li>Shi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mirnas+and+cancer%3A+Key+link+in+diagnosis+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Genes%22%5BJournal%5D)">Mirnas and cancer: Key link in diagnosis and therapy.</a> Genes. 12 (8), 1289(2021).</li>
<li>Juźwik, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+dysregulation+in+neurodegenerative+diseases%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">MicroRNA dysregulation in neurodegenerative diseases: A systematic review.</a> Prog Neurobiol. 182, 101664(2019).</li>
<li>Pauley, K. M., Cha, S., Chan, E. K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microrna+in+autoimmunity+and+autoimmune+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Autoimmun%22%5BJournal%5D)">Microrna in autoimmunity and autoimmune diseases.</a> J Autoimmun. 32 (3-4), 189-194 (2009).</li>
<li>Lee, Y. S., Dutta, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micrornas+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Rev+Pathol+Mech+Dis%22%5BJournal%5D)">Micrornas in cancer.</a> Ann Rev Pathol Mech Dis. 4 (1), 199-227 (2009).</li>
<li>Thomson, D. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+gene+regulatory+properties+of+argonaute-bound+small+rnas+of+diverse+genomic+origin%5BTitle%5D)+AND+%22Nuc+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">Assessing the gene regulatory properties of argonaute-bound small rnas of diverse genomic origin.</a> Nuc Acids Res. 43 (1), 470-481 (2015).</li>
<li>Kim, Y. K., Han, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nobel-winning+microRNA%2C+the+microRNAestro+of+gene+silencing%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cells%22%5BJournal%5D)">Nobel-winning microRNA, the microRNAestro of gene silencing.</a> Mol Cells. 47 (11), 100123(2024).</li>
<li>Lai, X., Eberhardt, M., Schmitz, U., Vera, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systems+biology-based+investigation+of+cooperating+microRNAs+as+monotherapy+or+adjuvant+therapy+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nuc+Acid+Res%22%5BJournal%5D)">Systems biology-based investigation of cooperating microRNAs as monotherapy or adjuvant therapy in cancer.</a> Nuc Acid Res. 47 (15), 7753-7766 (2019).</li>
<li>Garzon, R., Marcucci, G., Croce, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+micrornas+in+cancer%3A+Rationale%2C+strategies+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Drug+Disc%22%5BJournal%5D)">Targeting micrornas in cancer: Rationale, strategies and challenges.</a> Nat Rev Drug Disc. 9 (10), 775-789 (2010).</li>
<li>Jiao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA%3A+The+impact+on+cancer+stemness+and+therapeutic+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">MicroRNA: The impact on cancer stemness and therapeutic resistance.</a> Cells. 9 (1), 8(2019).</li>
<li>Lin, B., Jiang, J., Jia, J., Zhou, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+exosomal+miRNA+biosensing+for+liquid+biopsy%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Recent advances in exosomal miRNA biosensing for liquid biopsy.</a> Molecules. 27 (21), 7145(2022).</li>
<li>Farrell, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+identification+of+circulating+miRNAs+in+bovine+serum+and+their+potential+as+novel+biomarkers+of+early+Mycobacterium+avium+subsp.+paratuberculosis+infection%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">The identification of circulating miRNAs in bovine serum and their potential as novel biomarkers of early Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis infection.</a> PLoS One. 10 (7), e0134310(2015).</li>
<li>Aparicio-Puerta, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Srnabench+and+srnatoolbox+2022+update%3A+Accurate+mirna+and+sncrna+profiling+for+model+and+non-model+organisms%5BTitle%5D)+AND+%22Nuc+Acid+Res%22%5BJournal%5D)">Srnabench and srnatoolbox 2022 update: Accurate mirna and sncrna profiling for model and non-model organisms.</a> Nuc Acid Res. 50 (W1), W710-W717 (2022).</li>
<li>Friedländer, M. R., Mackowiak, S. D., Li, N., Chen, W., Rajewsky, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mirdeep2+accurately+identifies+known+and+hundreds+of+novel+microRNA+genes+in+seven+animal+clades%5BTitle%5D)+AND+%22Nuc+Acid+Res%22%5BJournal%5D)">Mirdeep2 accurately identifies known and hundreds of novel microRNA genes in seven animal clades.</a> Nuc Acid Res. 40 (1), 37-52 (2012).</li>
<li>Chou, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mirtarbase+2016%3A+Updates+to+the+experimentally+validated+miRNA-target+interactions+database%5BTitle%5D)+AND+%22Nuc+Acid+Res%22%5BJournal%5D)">Mirtarbase 2016: Updates to the experimentally validated miRNA-target interactions database.</a> Nuc Acid Res. 44 (D1), D239-D247 (2016).</li>
<li>Porichis, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+detection+of+miRNAs+and+gene-specific+mRNA+at+the+single-cell+level+by+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">High-throughput detection of miRNAs and gene-specific mRNA at the single-cell level by flow cytometry.</a> Nat Commun. 5 (1), 5641(2014).</li>
<li>Eichert, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+crystal+structure+of+an+%27all+locked%27+nucleic+acid+duplex%5BTitle%5D)+AND+%22Nuc+Acid+Res%22%5BJournal%5D)">The crystal structure of an 'all locked' nucleic acid duplex.</a> Nuc Acid Res. 38 (19), 6729-6736 (2010).</li>
<li>Viratham Pulsawatdi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+robust+multiplex+immunofluorescence+and+digital+pathology+workflow+for+the+characterisation+of+the+tumour+immune+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Oncol%22%5BJournal%5D)">A robust multiplex immunofluorescence and digital pathology workflow for the characterisation of the tumour immune microenvironment.</a> Mol Oncol. 14 (10), 2384-2402 (2020).</li>
<li>Janati-Idrissi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Looking+for+a+needle+in+a+haystack%3A+De+novo+phenotypic+target+identification+reveals+hippo+pathway-mediated+mir-202+regulation+of+egg+production%5BTitle%5D)+AND+%22Nuc+Acid+Res%22%5BJournal%5D)">Looking for a needle in a haystack: De novo phenotypic target identification reveals hippo pathway-mediated mir-202 regulation of egg production.</a> Nuc Acid Res. 52 (2), 738-754 (2024).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>10xTRISバッファー生理食塩水(TBS)pH 7.6&nbsp;</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>&nbsp;J62662&nbsp;K7</td><td>ステップ間の断続的な洗いのために</td></tr><tr><td>1xオパール抗体希釈剤/ブロック&nbsp;</td><td>アコヤ・バイオサイエンス</td><td>ARD1001EA</td><td>タンパク質ブロッキング溶液</td></tr><tr><td>1x Plusオートメーション増幅希釈剤</td><td>アコヤ・バイオサイエンス&nbsp;</td><td>FP1609</td><td>オパール蛍光素を希釈するために使用</td></tr><tr><td>20倍の濃縮&nbsp;生理食塩水クエン酸ナトリウム(SSC)バッファー</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>S6639-1L</td><td>プローブハイブリダイゼーション後のmiRNAウォッシュについて</td></tr><tr><td>4',6-ジアミジノ-2-フェニリンドール(DAPI)&nbsp;</td><td>サーモ・フィッシャー・サイエンティフィック/インビトロジェン</td><td>EN62248 / 62248</td><td>核染色用</td></tr><tr><td>ACD HybEZ II ハイブリダイゼーションシステム</td><td>ACDバイオテクネ</td><td>321711</td><td>miRNAscopeプロトコル中に温度を調節するためのオーブン</td></tr><tr><td>アンチCD8(D8A8Y)、ラビット抗体</td><td>細胞シグナル伝達技術</td><td>85336S</td><td>このプロトコルを最適化するために使用された一次抗体の例</td></tr><tr><td>抗ジゴキシジェニン(マウス)HRP共役</td><td>リヴビティ・ヘルスサイエンス株式会社</td><td>NEF832001EA</td><td>miRNA検出に用いられる二次試薬</td></tr><tr><td>抗EpCAM(E6V8Y)、ウサギmab</td><td>細胞シグナル伝達技術</td><td>93790</td><td>このプロトコルを最適化するために使用された一次抗体の例</td></tr><tr><td>ブロッキング試薬粉末</td><td>アコヤ・バイオサイエンス&nbsp;</td><td>FP1012</td><td>miRNA遮断溶液</td></tr><tr><td>エチルアルコール 100%(200プルーフ)</td><td>ファームコ</td><td>111000200</td><td>脱硫黄化のために</td></tr><tr><td>EZ-AR1バッファ</td><td>バイオジェネックス</td><td>HK521-XAK</td><td>FFPE組織切片のタンパク質段階での抗原回収に使用されます</td></tr><tr><td>EZ-AR1エレガンスバッファ</td><td>バイオジェネックス</td><td>HK546-XAK</td><td>miRNAプローブステップでのFFPE組織切片の抗原回収に使用されます</td></tr><tr><td>EZリトリーバーIRシステム</td><td>バイオジェネックス</td><td>MW015-IR</td><td>FFPE組織切片の抗原回収に用いられるマイクロ波</td></tr><tr><td>過酸化水素溶液30%&nbsp;</td><td>シグマ・オルドリッチ&nbsp;</td><td>HX0640-5&nbsp;</td><td>組織の準備のために。内因性ペルオキシダーゼ活性を阻害し、色の濃い生成物を生成するのに役立ちます</td></tr><tr><td>miR-181c-3p miRNAプローブ</td><td>キアゲン</td><td>339112</td><td>このプロトコルを最適化するために使用されたmiRNAプローブの例</td></tr><tr><td>miRCURY LNA miRNA ISH バッファセット(FFPE)</td><td>キアゲン</td><td>339450&nbsp;</td><td>miRNAプローブを希釈するために使用</td></tr><tr><td>オパール620</td><td>アコヤ・バイオサイエンス&nbsp;</td><td>FP1495001KT</td><td>一次抗体の特定のための蛍光色体</td></tr><tr><td>オパール 690&nbsp;</td><td>アコヤ・バイオサイエンス&nbsp;</td><td>FP1497001KT</td><td>一次抗体の特定のための蛍光色体</td></tr><tr><td>オパール抗Ms + Rb HRP</td><td>アコヤ・バイオサイエンス</td><td>ARH1001EA</td><td>検出剤として使用される二次抗体</td></tr><tr><td>ピアス 16% ホルムアルデヒド(含水)、メタノールフリー</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>28908</td><td>組織製製のための3.7%PFAを作ること</td></tr><tr><td>プロロング ダイヤモンドアンチフェイド</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>P36970</td><td>マウンティングメディア</td></tr><tr><td>RNAscopeプロテアーゼプラス</td><td>ACDバイオテクネ</td><td>322331</td><td>組織切片の透過性を付与するために、タンパク質や標的miRNA分子を露呈します</td></tr><tr><td>RNAseフリーの水とnbsp;</td><td>コーニング&nbsp;</td><td>46-000-CM&nbsp;</td><td>すべての機器を清掃・準備し、必要に応じて希釈剤として使うこと―nbsp;&nbsp;</td></tr><tr><td>トゥイーン20</td><td>シグマ・オルドリッチ</td><td>P1379-25ML</td><td>TBS-Tを作るために</td></tr><tr><td>チラミド信号増幅とシアニン3</td><td>アコヤ・バイオサイエンス&nbsp;</td><td>NEL744001KT</td><td>miRNA同定のための蛍光色体</td></tr><tr><td>U6およびスクランブルmiRNAプローブ</td><td>キアゲン</td><td>339459</td><td>オプションの制御プローブ</td></tr><tr><td>キシレン組織学的グレード</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>UN1307</td><td>脱硫黄化のために</td></tr></tbody></table>

新しい検出および定量法としてのロック核酸 in situ ハイブリダイゼーションによるマイクロrna増幅と認識

MicroRNA Amplification and Recognition through Locked-nucleic-acid In situ Hybridization as a Novel Detection and Quantification Method

新しい検出および定量法としてのロック核酸 in situ ハイブリダイゼーションによるマイクロRNA増幅と認識

When using traditional probe-based in situ hybridization (ISH) imaging detection methods, microRNAs (miRNAs) are difficult to capture due to their size, ...

microrna-amplification-recognition-through-locked-nucleic-acid-situ

Research

JoVE Journal

Cancer Research

がん研究

ここでは、サンプルの限られた量を扱う場合は特に、マイクロRNA（miRNA）の発現レベルのコストと時間効果のハイスループットスクリーニングのツールと​​してのマイクロ流体プラットフォームとの組み合わせで最適化された多重逆転写定量PCR（定量RT -...

ハイスループットマイクロRNAプロファイリング：最適化されたマルチプレックスフリューダイナミックArrayTMのIFCSでナノリッタースケールでの定量RT - PCR

小説ハイスループット法は、ロックされた核酸プローブとフローサイトメトリー、蛍光を用いて、単一の細菌細胞からの検出と小さなRNAとmRNA発現の相対定量を可能にすることが記載されている...

ロックされた核酸のフローサイトメトリー、蛍光その場でハイブリダイゼーション（LNAフロー- FISH）：細菌のsmall RNAの検出のための方法

このビデオでは、mRNAプローブを特定の標的mRNAにハイブリダイズするシーケンシャルハイブリダイゼーション戦略について説明しています。プローブハイブリダイゼーションに続いて、組織学的サンプルのRNA-CISH中にシグナル対ノイズ比を減少させることにより分解能を向上させるために、シグナル増幅が行われます。...

RNA In Situハイブリダイゼーションにおけるプローブハイブリダイゼーションとシグナル増幅:組織切片中の特定のRNA配列を検出するための技術

本書の目的は、 キイロショウジョウバエの胚、細胞、および組織から抽出されたRNA上の強化されたノーザンブロットプロトコルの手術の手順を視覚化し、議論することである。このプロトコルは、小さなRNA種の効率的な検出のために特に有用である。...

低分子RNA種のノーザンブロット検出における強化キイロショウジョウバエ

MicroRNA(miRNA)は、広く保存された調節分子のクラスです。ここでは、2つの強力なライゲーションステップとそれに続くハイスループットシーケンシングに依存するmiRNAクローニング法について説明します。私たちの方法は、miRNAの正確なゲノムワイド定量を可能にします。...

ハイスループットシークエンシングによりマイクロRNA定量のための低分子RNA分子の高効率ライゲーション

循環マイクロRNAは、最近様々な癌および他の疾患のための有望で新規なバイオマーカーとして浮上している。この記事の目的は、マイクロRNAの循環の豊富さを定量化し、決定するために利用可能である三つの異なるプローブベースのリアルタイムPCRプラットフォームと方法を議論することです。...

プローブベースのリアルタイムPCRは、マイクロRNAの定量的測定のためのアプローチ

miRNAを用いた乳がん組織におけるmiRNA発現の臨床病理学的解析<em&gt;その場で</em&gt;ハイブリダイゼーション

このレポートでは、高速かつ信頼性の高い携帯電話の miRNAs の mRNA ターゲットの検証方法について説明します。合成ビオチン化核酸 LNA のロックを用いた miRNA を模倣をキャプチャする使用していた方法は、mRNA をターゲットします。プルダウンにストレプトアビジン コートした磁気ビーズを採用するその後、ターゲット mRNA qPCR...

ビオチン ベース プルダウン法検証 mRNA をターゲットの携帯電話の miRNAs

再現性をもって RNA の単一分子蛍光 in-situ 個々 卵母細胞における Mrna の数字をカウントするには、交配 (RNA 魚) 非付着性のセルの最適化を行った。卵子採取、トラン...

マウス卵母細胞における定量化するため、Localize Mrna に単一分子蛍光そのままの交配 (SM 魚) の使用

この方法は、全RNA抽出物からmiRNAを検出するためのノーザンハイブリダイゼーション技術の使用を実証する。...

植物マイクロRNAの検出と定量のためのRNAブロット分析

DNAzymeベースのナノマシンは、核酸の高選択性と高感度な検出に使用できます。この記事では、フリーソフトウェアを使用した10-23コアのDNAzymeベースのナノマシンの設計に関する詳細なプロトコルと、例としてEpstein-Barrウイルスフラグメントの検出におけるそれらのアプリケーションについて説明します。...

DNAzyme 10-23 - 核酸認識用ナノマシン

学ぶロック核酸in situハイブリダイゼーションによるマイクロRNAとタンパク質の同時検出・定量法。FFPE組織を用いて腫瘍微小環境における分子間の空間的関係を観察し、がん生物学研究やバイオマーカー探索に応用できます。

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