Name: in vitroでのラットマクロファージによる同種および異種赤血球の食作用の定量的評価 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-22T14:05:00.000+00:00
Duration: 9 min 1 s
Description: 学ぶラットマクロファージによる同種および異種赤血球の食作用の定量的評価法。相対食作用指数を用いて個体差を排除し、異種移植における免疫拒絶反応を評価する標準化されたin vitroプロトコルを確立します。

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<ol><li>Ito, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NOD%2FSCID%2FGAMMAC%28null%29+mouse%3A+An+excellent+recipient+mouse+model+for+engraftment+of+human+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">NOD/SCID/GAMMAC(null) mouse: An excellent recipient mouse model for engraftment of human cells.</a> Blood. 100 (9), 3175-3182 (2002).</li>
<li>Szpirer, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+models+of+human+diseases+and+related+phenotypes%3A+A+novel+inventory+of+causative+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Mamm+Genome%22%5BJournal%5D)">Rat models of human diseases and related phenotypes: A novel inventory of causative genes.</a> Mamm Genome. 33 (1), 88-90 (2022).</li>
<li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival-assured+liver+injury+preconditioning+%28SALIC%29+enables+robust+expansion+of+human+hepatocytes+in+Fah+Rag2%28-%2F-%29+IL2rg%28-%2F-%29+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Sci+%28Weinh%29%22%5BJournal%5D)">Survival-assured liver injury preconditioning (SALIC) enables robust expansion of human hepatocytes in Fah Rag2(-/-) IL2rg(-/-) rats.</a> Adv Sci (Weinh). 8 (19), e2101188(2021).</li>
<li>Rongvaux, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corrigendum%3A+Development+and+function+of+human+innate+immune+cells+in+a+humanized+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Biotechnol%22%5BJournal%5D)">Corrigendum: Development and function of human innate immune cells in a humanized mouse model.</a> Nat Biotechnol. 35 (12), 1211(2017).</li>
<li>Furuya, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evidence+of+a+macrophage+barrier+in+the+xenotransplantation+of+human+hematopoietic+stem+cells+to+severely+immunodeficient+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Xenotransplantation%22%5BJournal%5D)">The evidence of a macrophage barrier in the xenotransplantation of human hematopoietic stem cells to severely immunodeficient rats.</a> Xenotransplantation. 28 (4), e12702(2021).</li>
<li>Barclay, A. N., Van den Berg, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interaction+between+signal+regulatory+protein+alpha+%28SIRP%CE%B1%29+and+CD47%3A+Structure%2C+function%2C+and+therapeutic+target%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Immunol%22%5BJournal%5D)">The interaction between signal regulatory protein alpha (SIRPα) and CD47: Structure, function, and therapeutic target.</a> Annu Rev Immunol. 32, 25-50 (2014).</li>
<li>Ide, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+for+CD47-SIRPalpha+signaling+in+xenograft+rejection+by+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Role for CD47-SIRPalpha signaling in xenograft rejection by macrophages.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (12), 5062-5066 (2007).</li>
<li>Matlung, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CD47-SIRP%CE%B1+signaling+axis+as+an+innate+immune+checkpoint+in+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Immunol+Rev%22%5BJournal%5D)">The CD47-SIRPα signaling axis as an innate immune checkpoint in cancer.</a> Immunol Rev. 276 (1), 145-164 (2017).</li>
<li>Oldenborg, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+CD47+as+a+marker+of+self+on+red+blood+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Role of CD47 as a marker of self on red blood cells.</a> Science. 288 (5473), 2051-2054 (2000).</li>
<li>Gu, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+method+for+measuring+innate+phagocytosis+by+human+monocytes+using+real-time+flow+cytometry%5BTitle%5D)+AND+%22Cytometry+A%22%5BJournal%5D)">A quantitative method for measuring innate phagocytosis by human monocytes using real-time flow cytometry.</a> Cytometry A. 85 (4), 313-321 (2014).</li>
<li>Joffe, A. M., Bakalar, M. H., Fletcher, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage+phagocytosis+assay+with+reconstituted+target+particles%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Macrophage phagocytosis assay with reconstituted target particles.</a> Nat Protoc. 15 (7), 2230-2246 (2020).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>0.05% トリプシン-EDTA</td><td>サーモフィッシャー</td><td>25300062</td><td></td></tr><tr><td>ディープレッドセルトラッカー</td><td>サーモフィッシャー</td><td>&nbsp;C34565</td><td>火薬(15 & mu;g)はDMSOに溶け込んだ(20 & mu;L)</td></tr><tr><td>ジメチルスルオキシド(DMSO)</td><td>シグマ</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>ダルベッコのリン酸塩緩衝塩水(DPBS)</td><td>サーモフィッシャー</td><td>C10010500BT</td><td></td></tr><tr><td>フィコル・パケ PLUS</td><td>シチバ</td><td>17144002</td><td></td></tr><tr><td>フィコル・パケ プレミアム</td><td>シチバ</td><td>17544602</td><td></td></tr><tr><td>マウス抗ヒトCD235a BV421抗体</td><td>BDバイオサイエンス</td><td>562938</td><td></td></tr><tr><td>マウス抗ラットCD163 FITC 抗体</td><td>バイオ・ラッド</td><td>MCA342F</td><td></td></tr><tr><td>プロテインK</td><td>シグマ</td><td>P2308</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>サーモフィッシャー</td><td>11875093</td><td></td></tr></tbody></table>

in vitroでのラットマクロファージによる同種および異種赤血球の食作用の定量的評価

A Quantitative Assessment of the Phagocytosis of Allogeneic and Xenogeneic Erythrocytes by Rat Macrophages In Vitro

Xenogeneic cell transplantation often faces significant immune rejection, even in immunodeficient animal models. Among residual immune components, ...

a-quantitative-assessment-phagocytosis-allogeneic-xenogeneic

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

免疫学と感染症

ラット肝細胞の初代培養からマクロファージを取得するための新しい方法が記載されている。このメソッドは、プラスチック製の皿に選択的付着によって培養フラスコ及び精製の揺れが続く文化におけるマクロファージの増殖を、利用しています。この手法は、効率的に複雑な装置やスキルがなくても肝臓のマクロファージを提供します。...

成人肝細胞の混合初代培養からマクロファージを分離するためにシンプルかつ効率的な方法

出典: Nagre, N. ほか。 マウスにおける肺胞マクロファージの食いと細菌の除去。 J. Vis. Exp.

オプソナイズド赤血球を用いた補体媒介食噬のモデル化

このビデオは、マクロファージを介した独立性赤血球(RBC)食作用イベントを監視するためのアッセイを示しています。マウス免疫グロブリンG(IgG)-オプソニン化ヒト赤血球をマウスマクロファージとインキュベートし、共焦点顕微鏡で観察します。赤血球は、食細胞カップ形成を介してマクロファージに飲み込まれ、リソソーム分解の標的となります。...

IgGオプソニン化赤血球のマクロファージ食作用のリアルタイムイメージング

このビデオでは、単球による標識およびオプソニン化された熱帯熱マラリア原虫感染赤血球を含むフローサイトメトリーベースの食作用アッセイを実演しています。フローサイトメトリーは、単球の蛍光を同定し、食作用によるオプソニン化赤血球の同定に成功したことを裏付けています。...

寄生虫感染赤血球の抗体媒介性食作用の定量化のためのアッセイ

このビデオでは、末梢血の初代単球を利用して、ポリD抗体オプソニン化R2R2赤血球によるFcγ受容体媒介性食作用を評価する単球単層アッセイを紹介しています。...

単球単分子膜におけるFcγ受容体駆動型食作用の研究のためのアッセイ

組織の恒常性と不十分な食細胞機能の維持が病態に関与しているためにミクログリアの貪食作用が重要です。しかしながら、 インビボでのミクログリアの機能を評価することは技術的に困難です。私たちは、正確に監視し、生理的な環境の中でミクログリアの貪食の可能性を定量化するためのシンプルでありながら堅牢な技術を開発しました。...

網膜ミクログリアの貪食機能を評価します<em&gt;インビボ</em&gt;フローサイトメトリーベースのアッセイを使用しました

単球単層アッセイ(MMA)は、哺乳類の末梢全血から得られた単離された初代単球を利用して、Fcγ受容体(FcγR)を介した食作用を評価するin...

Fcγ受容体媒介食作用を評価するために、単球単層アッセイの使用

ここでイメージの単一食イベントに回転ディスク共焦点顕微鏡を用いたマウス腹腔マクロファージの方法について述べる。他の貪食細胞に、プロトコルを拡張できます。...

マウスのマクロファージによる貪食のコマ撮りの 3 D イメージング

ここでは、強化された緑色蛍光タンパク質発現大腸菌を用いたマウス腹腔マクロファージの貪食能を評価するためのプロトコルを提案する.

緑色蛍光タンパク質-表現する拡張を使用するマウス腹腔マクロファージの貪食能を評価するために大腸菌

ここでマウス肺胞マクロファージおよび肺から細菌クリアランスの貪食能を分析するための一般的な方法を報告します。これらのメソッドは、フルオレセイン イソチオ...

肺胞マクロファージの貧食能およびマウスにおける細菌クリアランス

私たちは、輸血医学および免疫学における赤血球同種抗体の臨床的関連性をより正確に予測するためにマクロファージを使用する既存の単球単層アッセイ(MMA)の機能強化と更新された方法を開発しました。このアッセイは、単球マクロファージアッセイ(M-MA)と呼ばれています。...

単球マクロファージアッセイを用いた赤血球抗体の意義の予測

学ぶラットマクロファージによる同種および異種赤血球の食作用の定量的評価法。相対食作用指数を用いて個体差を排除し、異種移植における免疫拒絶反応を評価する標準化されたin vitroプロトコルを確立します。

in vitroでのラットマクロファージによる同種および異種赤血球の食作用の定量的評価

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