マウス動脈の止血のための簡単かつ効果的な手順

本研究は動脈穿刺を封じつつ血流を維持する方法を開発しています。脂肪包帯が動脈穿刺後の虚血を防ぐかどうかを調査しています。この手技における重要な実験的課題は、動脈穿刺後に動脈閉塞を生じさずに効果的な止血を達成することです。

まず、麻酔をかけたマウスを手術台に置きます。麻酔が確認された後、脱毛機を使って頸部と頭蓋部の毛を除去します。露出した皮膚をポビドンヨウ素で消毒し、その後75%エタノールで残留物を除去します。

マウスを37度に設定した加熱パッドの上に置き、実験の間ずっとそこに置いてください。マウスをヒーターパッドの上で仰向けに位置を変えます。頸椎の正中切開後、将来の使用のために3×3×1ミリメートルの皮下脂肪組織移植片を切除します。

下顎下、胸骨舌骨筋、胸鎖乳突筋の鈍的解離を行い、両方の共通頸動脈を露出させます。その後、慎重に総頸動脈を解放し、内頸動脈と外頸動脈を露出させます。血管クランプ1を総頸動脈の遠位端に、次に血管クランプ2を近位端に設置します。

次に、23ゲージの針で2つのクランプの間の総頸動脈を刺します。針を抜いた後、切った面または以前に採取した脂肪パッドの非漿膜側で、穿刺部位の総頸動脈を包みます。脂肪で包帯された動脈の下に4-0縫合糸を挿入します。

脂肪の表面に一回だけ優しく結びつけ、脂肪パッドと血管壁の接触を確実にするために圧力をかけます。その後、圧迫のバランスを取って止血を達成するために結紮を徐々に調整します。湿らせた綿棒を使って遠位総頸動脈を高く上げます。

血管クランプ1を外し、綿棒をゆっくりと取り出して、貫通部位への血流が徐々に戻るのを待ちます。今度は刺し傷の血流を確認して。活動的な出血が確認された場合は、遠位総頸動脈に血管クランプ1を再装着してください。

1分後にゆっくりと血管クランプ1を外します。出血が続く場合は、脂肪パッドの位置を変えるか、結紮を少し締めて圧力を上げ、完全な止血が達成されるまで行います。湿らせた綿棒を使って近位総頸動脈を上昇させます。

次に血管クランプ2を外し、綿棒をゆっくりと取り出して、穿刺部位への血流を制御できるようにします。出血が起きた場合は、遠位総頸動脈に血管クランプ2を再装着してください。次に、縫合糸の1回の締め付けを少し締めて圧力を上げ、1分間待ちます。

次に、近位総頸動脈を持ち上げ、湿った綿棒を刺し穴にゆっくりと転がして血管クランプ2を解除します。同じ縫合糸で最初の投げにダブルノットを作るためにもう一度投げ入れを加え、脂肪パッドの固定を改善し、バランスの取れた止血を促進します。脂肪パッドの両側の総頸動脈が満たされ、血管の直径が一定であることを確認し、血流回復が成功していることを示します。

最後に、頸椎の切開部を縫合し、傷口に消毒液を塗布します。術前および術後のレーザースペックル造影および灌流ユニット測定では、偽マウスおよび手術マウスの両方で有意な変化が認められず、動脈止血技術による脳血流の妨げはなかったことが確認されました。手術後7日、14日、28日目にヘマトキシリンおよびエオシン染色による脳組織学的検査で、手術マウスおよび偽マウスでは、皮質、海馬、視床に組織構造が完全なもので、病理学的変化は見られませんでした。

ニッスル染色は、組織的な神経細胞の整列、正常な細胞構造、そしてすべてのグループと時期にわたりニッスル体が保存され、動脈閉塞による構造的損傷は見られませんでした。本法は、術後に穿刺部位を封じつつ正常な血流を維持し、術後の虚血を防ぐことを目的としています。