Name: ヒト人工多能性幹細胞における線維芽細胞成長因子シグナル破壊のリアルタイムモニタリングに基づく発生毒性アッセイ (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-10-10T13:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 45 s
Description: 学ぶヒトiPS細胞を用いたFGFシグナル破壊のリアルタイムモニタリングによる発生毒性アッセイ。動物実験を代替し、化学物質の催奇形性を高精度で評価する革新的なin vitro手法です。

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</ol>

<table><tbody><tr><td>1.5 mL マイクロ遠心分離機チューブ</td><td>ファストジーン</td><td>FG-MCT015C</td><td>試験化学的製剤</td></tr><tr><td>15mL遠心分離機チューブ</td><td>ヴィオラモ</td><td>1-3500-21</td><td>細胞培養</td></tr><tr><td>8ストリップPCRチューブ</td><td>ワトソン</td><td>137-333C</td><td>試験化学的製剤</td></tr><tr><td>96年ウェルホワイト/クリアボトムプレート、TCサーフェス</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>165306</td><td>細胞培養および発光測定</td></tr><tr><td>ブラックマイクロプレートフラットボトム 96ウェル</td><td>アソネ</td><td>3-3321-04</td><td>細胞毒性アッセイにおける発光測定のために</td></tr><tr><td>息を楽にして</td><td>東邦</td><td>BERM-2000</td><td>ガス透過性シーリングフィルム</td></tr><tr><td>セルタイター-グロ発光細胞生存能力アッセイ</td><td>プロメガ</td><td>G7572</td><td>細胞毒性アッセイ</td></tr><tr><td>遠心分離機 5702 R</td><td>エッペンドルフ</td><td></td><td>遠心分離</td></tr><tr><td>ClipTip 300、フィルター付き、滅菌済み、ラック</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>94420513</td><td></td></tr><tr><td>クリップチップ50、ろ過済み、滅菌、ラック式</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>94420253</td><td></td></tr><tr><td>Countess 3 FL 自動セルカウンター</td><td>インビトロジェン</td><td></td><td>細胞計数</td></tr><tr><td>カウンテスセル計数室スライド</td><td>インビトロジェン</td><td>C10312</td><td>細胞計数</td></tr><tr><td>カルチャー・シュア DMSO&nbsp;</td><td>富士フイルム 和光</td><td>031-24051</td><td>化学薬品用の溶剤</td></tr><tr><td>カルチャーシュア Y-27632</td><td>富士フイルム 和光</td><td>036-24023</td><td>iPSCシーディング用のROCK阻害剤</td></tr><tr><td>DMEM/F12 HEPES、フェノールレッドなし</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>11039-021</td><td>iPS細胞培養用コーティング</td></tr><tr><td>F1-クリップチップマルチチャンネルピペット、30〜300およびマイクロ;L</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>4661180N</td><td></td></tr><tr><td>F1-クリップチップマルチチャンネルピペット、5から50およびマイクロ;L</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>4661160N</td><td></td></tr><tr><td>フィルターチップ</td><td>ワトソン</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Geltrex LDEVフリー低減成長因子ベースメント膜マトリックス</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>A1413202</td><td>iPS細胞培養用コーティング</td></tr><tr><td>ヒエナイマット01R</td><td>コスモバイオ</td><td>HMAT01R</td><td>細胞培養中のプレート温度安定維持のために</td></tr><tr><td>ヒエナイチューブウォーマー GX01</td><td>コスモバイオ</td><td>TWGX013</td><td>実験的な取り扱い中に中を温かく保つために</td></tr><tr><td>ヒト熱安定bFGF組換えタンパク質</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>PHG0367</td><td>レポーターアッセイのためのFGF刺激</td></tr><tr><td>ヒト誘導多能性幹細胞(iPS)</td><td>201B7(RCB Cat# HPS0063、RRID: CVCL_A324)</td><td>理研BRCセルバンク</td><td></td></tr><tr><td>マイクロプレートシェーカー</td><td>タイテック</td><td>0089532-000</td><td>細胞抑制率検査のためのプレートシェイキング</td></tr><tr><td>マルチプレートリーダー</td><td>パーキンエルマー</td><td>ARVO X4</td><td>発光測定</td></tr><tr><td>ナノグロー・エンデュラジン生細胞基質</td><td>プロメガ</td><td>N2571</td><td>ルミネセンス基質</td></tr><tr><td>PBS(-)&nbsp;</td><td>富士フイルム 和光</td><td>166-23555</td><td>細胞文化</td></tr><tr><td>パラフィリム</td><td>AS One</td><td>65-1681-93</td><td>コーティングプレート用に保管</td></tr><tr><td>ピペット</td><td></td><td>エッペンドルフ</td><td></td></tr><tr><td>WSL-1563 クロノスHT</td><td>ATTO</td><td>3510140</td><td>リアルタイム発光測定システムおよびnbsp;</td></tr><tr><td>貯水池</td><td>BMBio</td><td>BM-0850-1</td><td></td></tr><tr><td>STEMdif APEL2 Medium &nbsp;</td><td>STEMCELL テクノロジーズ</td><td>ST-05275</td><td>アッセイ培地</td></tr><tr><td>StemFlex メディウム</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>A3349401</td><td>メンテナンス媒体</td></tr><tr><td>無菌水、エンドトキシンフリー</td><td>富士フイルム 和光</td><td>196-15645</td><td>iPS細胞培養のための湿度制御</td></tr><tr><td>組織培養プレートVTC-P6</td><td>ヴィオラモ</td><td>2-8588-01</td><td>細胞構造</td></tr><tr><td>TrypLセレクト酵素(1X)、フェノールレッドなし</td><td>サーモフィッシャー・サイエンティフィック</td><td>12563011</td><td>細胞培養</td></tr><tr><td>バルプロ酸</td><td>富士フイルム 和光</td><td>227-01071</td><td>試験化学物質</td></tr></tbody></table>

ヒト人工多能性幹細胞における線維芽細胞成長因子シグナル破壊のリアルタイムモニタリングに基づく発生毒性アッセイ

Developmental Toxicity Assay Based on Real-Time Monitoring of Fibroblast Growth Factor Signal Disruption in Human Induced Pluripotent Stem Cells

私たちの経験では、細胞形態は、アッセイが正しく実行されたかどうかを判断するのに役立ちます。 図2A は、化学物質曝露の直前と直後の細胞の典型的な共焦点顕微鏡画像を示しています。アッセイの最後に、ウェルのほぼ表面全体が細胞で覆われます。 図2B は、生細胞/死細胞染色の画像を示しています。ヨウ化プロピジウム(PI)で染色された死細胞の数は、化学物質への曝露後に増加します。ただし、細胞生存率は少なくとも50%であり、ほとんどすべての細胞がカルセイン-AMで染色されています。
表1は、以前の研究7,8で使用された試験化学物質を示しています。これらの研究は、ヒトiPS細胞におけるFGFシグナルの破壊に基づいて、Devtox化学物質をより正確に区別できることを示しています。重要な発見は、シグナリング活動は時間の経過とともに動的に変化するため、シグナリング活動の継続的な監視が重要であるということです。リアルタイム発光測定システムを使用することで、測定の手間を抑えながら、かなり高い時間分解能が得られます。ここでは、リアルタイム監視システムを使用するプロトコルについて説明します。
図3A は、試験化学物質を使用せずに同じ条件下で6つの繰り返しウェルで48時間にわたる発光強度の変化を示しています。6つの曲線はほぼ整列しており、ウェル間の再現性が良好であることを示しています。以前の研究では、24時間の手動測定では明確に特定されていませんが、48時間のリアルタイム測定では、FGFリガンド添加直後の最初のピークと約24時間の2番目のピークの2つの異なるピークが現れます。 図3B は、よく知られた発生毒性物質であるバルプロ酸(VPA)への曝露時の発光強度の変化を示しています。VPAは、神経管、心臓、四肢に欠陥を引き起こすヒストン脱アセチル化酵素阻害剤です¹¹。VPAは、濃度依存的にFGFシグナル伝達を破壊します。自動リアルタイム測定システムは、手動測定よりも正確に信号ダイナミクスをキャプチャしました。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68910/68910fig1v2.jpg"> 
図1:FGF/SRFシグナルディスラプションアッセイ。(A) ヒトiPS細胞の遺伝子操作によるFGF/SRFシグナルレポーター細胞の生成血清応答要素の下流にNluc、標的ノックイン用の相同アーム、およびヒトホスホグリセリン酸キナーゼプロモーターの制御下にあるピューロマイシン耐性遺伝子を含むプラスミドを構築しました。ピューロマイシンの選択に続いて、SRE-Nlucレポーター細胞が確立されました。 (B) アッセイのタイムスケジュール。レポーター細胞を96ウェルプレートに播種し、表面全体を覆うように4日間増殖させました。発光基質と試験薬品を、それぞれ測定開始の3時間前と1時間前に添加した。FGFリガンド付加時間を0時間とし、その後48時間にわたって連続して発光強度を測定した。 (C) データ分析。信号ダイナミクスは、試験化学物質に曝露されたセルと曝露されていないセルで記録され、ビークルコントロールに正規化されて、化学物質によって引き起こされる信号の破壊の尺度として曲線間の面積を推定しました。異なる濃度で各化学物質のABC値を取得し、それらの合計を計算しました。しきい値を決定するためにテストされたすべての既知の発生毒性物質を使用して、受信者の動作特性曲線分析を実行しました。略語:iPS=人工多能性幹細胞;RLU = 相対光単位;AUC = 曲線下の面積。FGF = 線維芽細胞増殖因子;SRF = 血清応答因子;SRE = 血清応答要素;HA = 相同アーム;L =左;R =右;PuroR = ピューロマイシン耐性遺伝子;hPGK = ヒトホスホグリセリン酸キナーゼ;Nluc = NanoLucルシフェラーゼ;ROC = 受信機の動作特性。ABC = 曲線間の面積。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68910/68910fig1v2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68910/68910fig2.jpg"> 
図2:細胞形態と生細胞/死細胞染色。(A) 試験化学物質への曝露前(4日目)および曝露後(6日目)の細胞の共焦点顕微鏡画像。テスト後にウェルのほぼ表面全体を覆う残りのセルは、テスト実行が成功したことを示す指標です。アッセイの終了時にほぼ完全なウェルカバレッジは、実行が成功したことを示します。 (B) 試験化学物質への曝露前後の生細胞/死細胞染色。生細胞はカルセイン-AMで緑色に染色し、死細胞はヨウ化プロピジウム(PI)で赤色に染色しました。カルセイン-AM(緑)で染色し、死細胞をヨウ化プロピジウム(PI、赤)で染色しました。死んだ細胞の割合は、全細胞の50%&lt;よりも少ないようにする必要があります。スケールバー = 100 μm。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68910/68910fig2large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68910/68910fig3.jpg"> 
図3:発光強度ダイナミクスの典型的な例。(A)時間経過ルミネッセンスは、リアルタイム発光測定システムを用いて測定したFGFリガンド刺激後の発光の時間経過を変化させます。発光強度は、22分ごとに48時間監視されました。6 本の色付きの線は、異なる井戸からの信号を表します。 (B)バルプロ酸による手動およびリアルタイムの発光測定の比較。どちらの測定方法でも信号の中断が観察されましたが、リアルタイムモニタリングでは、2番目のピークで強化された信号をより明確にキャプチャしました。略語:RLU =相対光単位;VPA =バルプロ酸;FGF = 線維芽細胞増殖因子。<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68910/68910fig3large.jpg" target="_blank">この図の拡大版を表示するには、ここをクリックしてください。</a><a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68910/68910_Table%201.xlsx" target="_blank">この表をダウンロードするには、ここをクリックしてください。</a>
<table border="1" fo:font-size="8px" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>試験薬品</td>
			<td>略称</td>
			<td>キャス番号。</td>
			<td>動物実験 (先行研究)</td>
			<td>インビトロ研究 (本研究)</td>
			<td>ABC 値の合計</td>
			<td>最大濃度 (μg/mL)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>オールトランスレチノイン酸</td>
			<td>アトラ</td>
			<td>302-79-4</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>65.9</td>
			<td>0.0100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ヒドロキシウレア</td>
			<td>胡</td>
			<td>127-07-1</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>63.3</td>
			<td>149</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>メトキシ酢酸</td>
			<td>MAAさん</td>
			<td>625-45-6</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>225</td>
			<td>683</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>塩化メチル水銀</td>
			<td>メHg</td>
			<td>115-09-3</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>77.7</td>
			<td>1.20</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>メトトレキサート水和物</td>
			<td>MTXの</td>
			<td>133073-73-1</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>80.5</td>
			<td>5.00</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>サリチル酸ナトリウム</td>
			<td>SAの</td>
			<td>54-21-7</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>38.7</td>
			<td>666</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>バルプロ酸</td>
			<td>VPAの</td>
			<td>99-66-1</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>63.3</td>
			<td>100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>6-アミノニコチンアミド</td>
			<td>6-AN</td>
			<td>329-89-5</td>
			<td>P</td>
			<td>N</td>
			<td>24.9</td>
			<td>1.00</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ホウ酸</td>
			<td>文学士</td>
			<td>10043-35-3</td>
			<td>P</td>
			<td>N</td>
			<td>24.2</td>
			<td>250</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-ブロモ-2'-デオキシウリジン</td>
			<td>BrdU</td>
			<td>59-14-3</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>83.9</td>
			<td>50.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5,5-ジメチル-2,4-オキサゾリジンジオン</td>
			<td>DMO</td>
			<td>695-53-4</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>50.3</td>
			<td>840</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>クロライドリチウム</td>
			<td>LiCl</td>
			<td>7447-41-8</td>
			<td>P</td>
			<td>N</td>
			<td>29.8</td>
			<td>250</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5-フルオロウラシル</td>
			<td>5-FU</td>
			<td>51-21-8</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>92.4</td>
			<td>2.65</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>シクロホスファミド一水和物</td>
			<td>公認会計士</td>
			<td>6055-19-2</td>
			<td>P</td>
			<td>N</td>
			<td>19.1</td>
			<td>400</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>メシル酸イマチニブ</td>
			<td>アイマ</td>
			<td>220127-57-1</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>42.4</td>
			<td>12.5</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>レナリドマイド</td>
			<td>レン</td>
			<td>191732-72-6</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>94.7</td>
			<td>35.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ポマリドマイド</td>
			<td>POMの</td>
			<td>19171-19-8</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>50.9</td>
			<td>2.50</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>サリドマイド</td>
			<td>股関節</td>
			<td>50-35-1</td>
			<td>P</td>
			<td>P</td>
			<td>53.3</td>
			<td>12.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>アクリルアミド</td>
			<td>AcA</td>
			<td>79-06-01</td>
			<td>N</td>
			<td>N</td>
			<td>37.1</td>
			<td>454</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>D-樟脳</td>
			<td>カム</td>
			<td>464-49-3</td>
			<td>N</td>
			<td>N</td>
			<td>27.5</td>
			<td>50.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ジフェンヒドラミン塩酸塩</td>
			<td>DHMの</td>
			<td>147-24-0</td>
			<td>N</td>
			<td>P</td>
			<td>68.2</td>
			<td>262</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>フタル酸ジメチル</td>
			<td>DMPの</td>
			<td>131-11-3</td>
			<td>N</td>
			<td>N</td>
			<td>24.4</td>
			<td>100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ペニシリンGナトリウム塩</td>
			<td>鵬</td>
			<td>69-57-8</td>
			<td>N</td>
			<td>N</td>
			<td>22.1</td>
			<td>1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>サッカリンナトリウム</td>
			<td>嚢</td>
			<td>82385-42-0</td>
			<td>N</td>
			<td>N</td>
			<td>34.0</td>
			<td>1000</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>アセトアミノフェン</td>
			<td>APAPの</td>
			<td>103-90-2</td>
			<td>N</td>
			<td>N</td>
			<td>22.3</td>
			<td>20.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>アモキシシリン三水和物</td>
			<td>AMXの</td>
			<td>61336-70-7</td>
			<td>N</td>
			<td>N</td>
			<td>28.4</td>
			<td>25.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>シメチジン</td>
			<td>センチメートル</td>
			<td>51481-61-9</td>
			<td>N</td>
			<td>N</td>
			<td>25.3</td>
			<td>30.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>エリスロマイシン</td>
			<td>エリー</td>
			<td>114-07-8</td>
			<td>N</td>
			<td>N</td>
			<td>20.0</td>
			<td>15.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ヒドロクロロチアジド</td>
			<td>HCTZの</td>
			<td>58-93-5</td>
			<td>N</td>
			<td>N</td>
			<td>21.9</td>
			<td>20.0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>スルファサラジン</td>
			<td>SSZの</td>
			<td>599-79-1</td>
			<td>N</td>
			<td>N</td>
			<td>30.8</td>
			<td>100</td>
		</tr>
		<tr>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ケミカル</td>
			<td>AUCの</td>
			<td>閾</td>
			<td>感度</td>
			<td>特異 性</td>
			<td>精度</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30物質</td>
			<td>0.819</td>
			<td>37.9</td>
			<td>0.778</td>
			<td>0.917</td>
			<td>0.833</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
表1:動物実験内で分類されたDevtoxおよび非Devtox化学物質、およびFGFシグナル破壊の有無にかかわらず推定された結果。 略語:P =ポジティブ(Devtox);N = 陰性 (非 Devtox)。

Developmental toxicity (Devtox) is typically evaluated in animal models. However, there are challenges in ensuring accuracy, such as false negatives due ...

developmental-toxicity-assay-based-on-real-time-monitoring-fibroblast

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

発生生物学

我々は、人的要因Oct4は、レトロウイルスベクター、Nanogの、そしてLin28のレンチウイルスを介した配信を用いてヒトの体細胞から誘導多能性幹細胞の生成のためのプロトコルを示す。多分化能は、形態と胚性幹（ES）細胞特異的マーカーの存在によって確認された。...

StemgentヒトTFのレンチセットでヒト線維芽細胞を再プログラムすることによって誘導多能性幹細胞の生成

大人の線維芽細胞から再プログラムヒト人工多能性幹細胞のコロニーを選択し、分離

マウス胚性線維芽細胞（MEF）の品質は、例えば、CF-1のようなマウスの右歪みによって決定されます。これらから得られた多能性·支持のMEFと馴化培地（CM）が共同で動作可能な自己再生および多能性を維持するために、アクチビン/ノードおよびFGF経路に必要なアクチビンA、グレムリンとTGFβ1の最適な濃度を含める必要があります。...

培養ヒト胚および誘導多能性幹細胞に適したマウス胚性線維芽細胞の調製

プロトコルは、ヒト胚性幹細胞およびトランスクリプトーム研究に基づいて、2つのin vitro発生毒性試験システム（UKKとUKN1）を記述します。試験系は、ヒトの発生毒性の危険性を予測し、動物実験、コストおよび化学安全性試験のために必要な時間を短縮するために寄与することができます。...

化学物質安全性のスクリーニングおよびシステム生物学データの生成のために発生毒性アッセイベースのヒト多能性幹細胞

このプロトコルは、ゼラチンでコーティングされた皿にヒト胎盤由来の馴化培地のみを使用して、ヒト多能性幹細胞(hPSC)を増殖させる簡単で効率的な方法を提供します。追加の外因性サプリメントやhPSC特異的な合成基質はありません。...

ヒト多能性のための新しい文化モデルは、プラセンタ馴化培地中のゼラチンの細胞増殖幹

ヒトが誘導する多能性幹細胞（hiPSC）は、薬物および化学物質のスクリーニングならびに神経毒性を含む毒性試験のための新しいインビトロモデルの開発のための強力なツールと考えられている。ここでは、hiPSCをニューロンおよびグリアに分化させるための詳細なプロトコールが記載されている。...

神経毒性試験のための、ヒト誘導多能性幹細胞のニューロンとグリアの混合培養物への分化のためのプロトコール

ここで提示されたプロトコルでは、肝疾患の治療のための小さい分子を識別するためのプラットフォームについて説明します。ステップバイ ステップの説明は、96 ウェル プレートで肝細胞特性を持つ細胞に Ips...

創薬における多能性幹細胞由来肝細胞様細胞を誘導人間を使用して

ここで初期化因子をエンコード変更された Mrna を用いた誘導多能性幹細胞に主線維芽細胞をプログラムし直すための臨床的に関連性の高い、高効率、フィーダー フリー法について述べるし、成熟したマイクロ Rna 367/302 を模倣しています。リプログラミング効率を評価する手法クローン iPSC のコロニーを拡大し、トラ 1 60...

RNA に基づく誘導多能性幹細胞に主線維芽細胞のプログラムし直す

細胞リプログラミングでは、多能性細胞状態を調節し維持する主要遺伝子の導入が必要です。記載されたプロトコルは、ウイルス/統合方法なしでヒト皮膚線維芽細胞からの誘導多能性幹細胞(iPSC)コロニーの形成を可能にするが、非修飾RNA(NM-RNA)を免疫回避因子と組み合わせて細胞防御機構を低下させる。...

腹部皮膚からの成人ヒト皮膚線維芽細胞の分離と非積分法を用いた人工多能性幹細胞の生成

ヒト人工多能性幹細胞由来心筋細胞(hiPSC-CM)は、薬物誘発性心毒性スクリーニングおよび疾患モデリングのための有望な in vitro...

ヒト人工多能性幹細胞由来心筋細胞における微小電極アレイおよびパッチクランプ記録の技術的応用

ヒト人工多能性幹細胞由来心筋細胞(hiPSC-CM)は、前臨床心毒性スクリーニングに動物を使用する代替手段を提供します。前臨床毒性スクリーニングにおけるhiPSC-CMの広範な採用に対する制限は、細胞の未熟な胎児様表現型です。ここでは、hiPSC-CMを堅牢かつ迅速に成熟させるためのプロトコルを紹介します。...

成熟ヒト人工多能性幹細胞由来心筋細胞単分子膜を用いたハイスループット心毒性スクリーニング

学ぶヒトiPS細胞を用いたFGFシグナル破壊のリアルタイムモニタリングによる発生毒性アッセイ。動物実験を代替し、化学物質の催奇形性を高精度で評価する革新的なin vitro手法です。

ヒト人工多能性幹細胞における線維芽細胞成長因子シグナル破壊のリアルタイムモニタリングに基づく発生毒性アッセイ

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