Name: CAR T細胞におけるCRISPR-Cas9スクリーニングの改良:ライブラリー調製のための洗練された方法 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-01-02T13:20:00.000+00:00
Duration: 8 min 3 s
Description: 学ぼう、CAR T細胞におけるCRISPR-Cas9スクリーニングの洗練されたプロトコル。制限酵素消化と選択的プルダウンによりsgRNAカセットの回収効率を向上させ、遺伝的調節因子の同定を支援する再現性の高い方法です。

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<li>Sui, H., Chen, Q., Imamichi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pulldown+assay+using+DNA%2FRNA-conjugated+beads+with+a+customized+competition+strategy%3A+An+effective+approach+to+identify+DNA%2FRNA+binding+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22MethodsX%22%5BJournal%5D)">A pulldown assay using DNA/RNA-conjugated beads with a customized competition strategy: An effective approach to identify DNA/RNA binding proteins.</a> MethodsX. 7, 100890(2020).</li>
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</ol>

<table><tbody><tr><td>4200 テープステーション</td><td>アジレント</td><td>G2991A</td><td></td></tr><tr><td>アクリジンオレンジ</td><td>インビトロジェン</td><td>A1301</td><td></td></tr><tr><td>さらに、XP&nbsp;</td><td>ベックマン・カウルター</td><td>A63881</td><td></td></tr><tr><td>autoMACS NEOセパレーター</td><td>ミルテンイ</td><td>130-120-327</td><td>高速磁気セル選別機</td></tr><tr><td>ビオチニル化オリゴ</td><td>IDT</td><td></td><td></td></tr><tr><td>BSA</td><td>シグマ</td><td>A9647</td><td></td></tr><tr><td>セルロメーターK2蛍光細胞カウンター</td><td>リヴヴィティ</td><td>CMT-K2-MX-150</td><td>蛍光細胞カウンター</td></tr><tr><td>CHT4 計数室</td><td>リヴヴィティ</td><td>CHT4-SD100-002</td><td></td></tr><tr><td>CytoSinct CD4ナノビーズ</td><td>ジェンスクリプト</td><td>L00863-1</td><td></td></tr><tr><td>CytoSinct CD8ナノビーズ</td><td>ジェンスクリプト</td><td>L00864-1</td><td></td></tr><tr><td>dNTP</td><td>アジレント</td><td>200418-51</td><td></td></tr><tr><td>ダイナビーズ M-280 ストレプタヴィジン</td><td>インビトロジェン</td><td>11206D</td><td></td></tr><tr><td>DynaMag-2マグネット</td><td>インビトロジェン</td><td>12321D</td><td></td></tr><tr><td>EDTA 0.5 M pH 8.0</td><td>インビトロジェン</td><td>15575-038</td><td></td></tr><tr><td>エタノール</td><td>メルク</td><td>1,00,98,31,000</td><td></td></tr><tr><td>ExPERT ATX電気孔孔器</td><td>MaxCyte</td><td>ExPERT ATx</td><td></td></tr><tr><td>フィコル・パーク</td><td>シチバ</td><td>17544203</td><td></td></tr><tr><td>フィルトロプル S 0.2 & マイクロ;m</td><td>サーステット</td><td>83,18,26,001</td><td></td></tr><tr><td>GenCRISPR ウルトラNLS-Cas9-リサーチ</td><td>ジェンスクリプト</td><td>Z03621-1</td><td></td></tr><tr><td>ハーキュラーズバッファー5X</td><td>アジレント</td><td>600675-52</td><td>5倍バッファ</td></tr><tr><td>ハーキュラーズII融合酵素</td><td>アジレント</td><td>600679-51</td><td>DNAポリメラーゼ</td></tr><tr><td>IL-15</td><td>ミルテンイ</td><td>130-095-765</td><td></td></tr><tr><td>IL-7</td><td>ミルテンイ</td><td>130-095-362</td><td></td></tr><tr><td>マスターサイクラー X50a</td><td>エッペンドルフ</td><td>6313HG006059</td><td></td></tr><tr><td>MaxCyte電気穿孔バッファー</td><td>シチバ</td><td>EPB1</td><td></td></tr><tr><td>NdeI</td><td>ニューイングランド・バイオラボ</td><td>R0111L</td><td></td></tr><tr><td>ヌクレオスピン組織</td><td>マッシェレイ・ナーゲル</td><td>74,09,52,250</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>ギブコ</td><td>14190-094</td><td></td></tr><tr><td>ポリブレン</td><td>メルク</td><td>TR-1003-6</td><td></td></tr><tr><td>プライマー</td><td>サーモフィッシャー</td><td></td><td></td></tr><tr><td>プロピジウムヨウ素</td><td>シグマ</td><td>P4864</td><td></td></tr><tr><td>PspXI</td><td>ニューイングランド・バイオラボ</td><td>R0656S</td><td></td></tr><tr><td>プロマイシン</td><td>ギブコ</td><td>A11138-03</td><td></td></tr><tr><td>Qubit 3.0 フルオロメーター</td><td>インビトロジェン</td><td>Q33216</td><td></td></tr><tr><td>キュービットHS DNAアッセイ</td><td>インビトロジェン</td><td>Q32851</td><td></td></tr><tr><td>R-50x3無菌井戸処理アセンブリ</td><td>MaxCyte</td><td>LM243882</td><td></td></tr><tr><td>T細胞トランスアクトヒト</td><td>ミルテンイ</td><td>130-111-160</td><td>T細胞刺激試薬</td></tr><tr><td>テープステーションHSD1000</td><td>アジレント</td><td>5067-5585</td><td></td></tr><tr><td>テックスマックス</td><td>ミルテンイ</td><td>130-097-196</td><td>T細胞増殖培地</td></tr><tr><td>トリスバッファー、1.0 M、pH 8.0、分子生物学グレード</td><td>EMDミリポール</td><td>648314</td><td></td></tr><tr><td>分子生物学用に水、DNAase、RNAse、プロテアーゼフリー</td><td>サーモサイエンティフィック</td><td>327390010</td><td></td></tr></tbody></table>

car t細胞におけるcrispr-cas9スクリーニングの改良:ライブラリー調製のための洗練された方法

Improving CRISPR-Cas9 Screens in CAR T Cells: A Refined Method for Library Preparation

CAR T細胞におけるCRISPR-Cas9スクリーニングの改良:ライブラリー調製のための洗練された方法

Chimeric antigen receptor (CAR) T cell therapies have demonstrated remarkable efficacy in several hematological malignancies, yet their success has not ...

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免疫学と感染症

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CRISPR-Cas9システムを用いたCAR-T細胞の遺伝子改変

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哺乳類細胞におけるCRISPRベースの遺伝子スクリーンのプール

本稿では、細胞外受容体とリガンドの相互作用を同定するためのゲノムスケール細胞ベースのスクリーニングアプローチについて述べる。...

ゲノムスケールCRISPR/Cas9遺伝子スクリーンを用いた細胞表面受容体同定

ここでは、子宮胚性レンチウイルス注射で超音波誘導を使用した迅速かつ直接的なin vivo...

In Vivo CRISPR/Cas9スクリーニングによるマウス皮膚と口腔の遺伝子機能の同時評価

ヒトCRISPR設計CAR-T細胞の製造

この記事では、健康なドナーキメラ抗原受容体T細胞におけるゲノムワイドCRISPRノックアウトスクリーニングを完了するための消耗に対する in vitro モデルの適用に関するプロトコルについて説明しています。...

キメラ抗原受容体T細胞におけるIn vitroゲノムワイドCRISPRノックアウトスクリーニングの実施

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