자외선 눈에 보이는 (UV-Vis) 분광법

1. 분광계 교정

1. UV-Vis 분광기를 켜고 램프가 적절한 기간(약 20분)동안 예열하여 안정화되도록 합니다.
2. 큐벳을 샘플용 용매로 채우고 외부가 깨끗한지 확인합니다. 이것은 빈 역할을하고 용매에 의한 산란 또는 흡수로 인한 가벼운 손실을 설명하는 데 도움이됩니다.
3. 큐벳을 분광계에 놓습니다. 큐벳은 핸들링(홈일 수 있음)을 위한 양면을 가지고 있으며 빛을 비추기 위한 것이 아니기 때문에 큐벳을 올바르게 정렬해야 합니다.
4. 빈 공간을 읽으십시오. 흡수도는 최소화해야 하지만, 흡수도는 향후 샘플에서 빼야 합니다. 일부 계측기는 빈 데이터를 저장하고 빼기 작업을 자동으로 수행할 수 있습니다.

2. 흡광스펙트럼 수행

1. 큐벳을 샘플로 채웁니다. 전송이 정량적인지 확인하려면 큐벳을 샘플로 두 번 헹구고 약 3/4 전체를 채웁니다. 외부가 지문 등을 깨끗하게 하고 있는지 확인하십시오.
2. 큐벳을 분광기에 올바른 방향으로 배치합니다.
3. 큐벳을 덮어 주변 광을 방지합니다.
4. 악기가 다른 파장을 통해 스캔하고 흡수도를 수집 할 수 있도록하여 흡수 스펙트럼을 수집합니다. 파장 범위는 특정 샘플에 대한 정보로 설정할 수 있지만 200-800 nm의 범위는 표준입니다. 다이오드 어레이 계측기는 한 번의 실행으로 전체 흡광도 스펙트럼을 수집할 수 있습니다.
5. 수집된 흡수 스펙트럼으로부터, 흡수도 최대(λ_max)를결정한다. 스펙트럼의 컬렉션을 반복하여 λ 최대값에서 오차 추정치를_{얻습니다.}
6. 교정 곡선을 만들려면 다양한 농도 샘플의 UV-Vis 스펙트럼을 수집합니다. 분광계는 종종 선형 범위에서 제한되며 1.5보다 큰 흡광도 값을 측정할 수 없습니다. 샘플의 흡광도 값이 계측기의 선형 범위 외부에 있는 경우 샘플을 희석하여 선형 범위 내에서 값을 가져옵니다.

3. UV-비스 분광기와 운동 실험

1. UV-Vis는 시간이 지남에 따라 흡광도의 변화를 검사하여 운동 실험에 사용할 수 있습니다. 운동 학 실험의 경우 샘플을 초기 읽기로 하십시오.
2. 시약을 빠르게 추가하여 화학 반응을 시작합니다.
3. 잘 저어서 샘플과 섞습니다. 소량이 추가되면 큐벳에서 이 작업을 수행할 수 있습니다. 또는 시약을 시료와 혼합하여 큐벳에 빠르게 붓습니다.
4. 시간이 지남에 따라 관심 있는 단량에 대 한 λ_최대에서 흡광도측정. 측정 중인 시약을 사용하는경우(즉, 흡수시약이 적기 때문에 흡수성이 올라가고 있음), 부패는 반응의 순서를 나타냅니다.
5. 교정 곡선을 사용하여, 흡수성 값을 농도로 변환, 시간 대 Aalyte 농도의 플롯을 합니다. 거기에서,이 그래프는 반응 속도 상수를 결정하기 위해 적절한 방정식에 맞을 수 있습니다.