플라스틱 부분은 조직의 여러 유형의 파라핀 - 임베디드 또는 냉동 부분보다이 방법이 더 유용하고, 형광 항체와 보조 immunostained 수있는 조직의 얇은 부분에서 진정한 조직 형태를 유지합니다. 얼룩, 플라스틱 포함하고, sectioning에 대한 방법은이 동영상에서 보여주입니다.
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이 논문에서
요약
프로토콜
정치
- (피셔 고양이 # 03-339 - 25B) 작은 유리 섬광 병에 MEMFA 또는 3.7 % FA + PBS로 전체 배아 또는 해부 explants을 전송합니다. 그것보다 더뿐만 아니라, 2 시간, RT에서 nutator에 병을 부화합니다. 2 시간 이상 FA에서 배아를 두지 마십시오. FA의 긴 배양은 배아 조직 어렵게하고 검색 과정에서 항체의 가난한 침투가 발생합니다.
- FA의 대부분을 기음과 유리병 (~ 4.5ml)의 상단에 덴트의 정착액을 추가합니다. 부드럽게 신선한 덴트의 다른 4.5ml과 덴트의에 교류를 배아를 씻어 몇 번 병을 반전하고, 적어도 48 시간 동안 -20 º C에서 알을 품다. 숙박 충분하지 않습니다. 이 단계는 항체에 대한 배아가 더 투과합니다. 배아는 몇 주 동안이 조건에 보관하실 수 있습니다.
Immunofluorescence
- 표본을 Rehydrate. 다음과 같이 메탄올의 등급 시리즈를 품어 :
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재료
귀하의 항원이나 에피토프 태그에 대한 기본 항체 : PBT에 적절한 희석하십시오. 비오틴 - 복합 보조 항체 : 여러 업체 비오틴 - 복합 항체를 판매하고 있습니다.
재인쇄 및 허가
태그
