플래시 마우스 배아 뇌 조직을 동결 sectioning위한 방법은 다음과 같습니다이 비디오에서 보여주었다. 그라 이오 스탯를 사용하기위한 유용한 팁을은 결과 조직의 섹션 균열 및 기타 왜곡 무료로되는 것을 보장하기 위해 절단하는 동안 사용할 수있는 문제 해결 방법을 포함하여 제공됩니다.
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이 논문에서
요약
프로토콜
- 원하는 시간을 PBS에 4 % paraformaldehyde에 조직을 수정.
- 자당 달이다 조직 (cryoprotection)
- 2,059 튜브 PBS W / V에서 30 % 자당 솔루션을 확인하십시오.
- PBS에서 조직 배 린스 (락을 함께 ~ 5 분).
- 30 % 자당 용액에 넣어 조직. 조직은 침몰하지 않습니다.
- 그것이 침몰했다 ° C 야간, 또는 때까지 4 조직을 놓으십시오.
- 라벨 적절한 크기는 정보와 오리 엔테이션과 함께 cryomold.
- (거품을 방지) OCT와 cryomold를 입력합니다.
- OCT 목욕 및 OCT로 코팅을하는 조직을 전송
- cryomold에서 OCT하기 위해 조직을 전송합니다.
- 현미경 동양의 조직.
- 플라스틱 페트리 접시에 액체 질소를 부어.
- 신속하고 조심스럽게 질소로 cryomold의 조직을 낮추십시오. (잠수함 cryomold의 상단을하지 않습니다.)
- OCT는 흰색 고체 경우 -80 ° C 저장 냉동실에 냉동 조직을 놓으십시오.
- ~ 20 ° C 이상에서 30 분 조직을 평형. 이전 sectioning 수 있습니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Tissue-Tek Cryomold | Ted Pella, Inc. | 27181 | |
| O.C.T. | Ted Pella, Inc. | 27050 | |
| 자당 용액 | PBS 내 30% w/v 자당 용액 | ||
| 파라포름알데히드 | PBS 내 4% 파라포름알데히드 |
재인쇄 및 허가
