Soft Agar Colony Formation Assay: 암세포 증식에 대한 새로운 화합물의 효과를 테스트하는 방법

초록

출처: Horibata A. et. al., 유방암 세포에서 종양 원성 억제제를 식별하기 위한 연질 한천 식민지 형성 분석의 활용. J. Vis. 특급 (2015).

이 비디오는 유방암 종양 원성에 대한 PADI 효소 억제제와 BB-Cl-아미딘의 효과를 시험관내에서 테스트하기 위한 부드러운 한천 집락 형성 분석을 설명합니다. 이 분석은 또한 유전적 교란의 맥락에서 세포 형질전환 가능성의 정량적 평가를 가능하게 합니다.

프로토콜

1. 3 % 2- 하이드 록시 에틸 아가 로스의 제조

1. 깨끗하고 마른 100ml 유리병에 2-하이드록시에틸 아가로스(아가로스 VII) 0.9g과 증류수 30ml를 넣습니다.
2. 혼합물을 전자레인지에 15초 동안 돌리고 부드럽게 휘젓습니다. 아가로스 가루가 완전히 녹을 때까지 이 단계를 최소 3회 더 반복합니다.
3. 용액이 들어있는 병을 15분 동안 오토클레이브합니다.
4. 더 사용하기 전에 아가로스 용액을 RT로 식히십시오. RT에 솔루션을 저장합니다.

2. 바닥층의 준비 : 0.6 % 아가로 스 젤

1. 취급 시 피펫에서 아가로스가 응고되는 것을 방지하기 위해 37°C 인큐베이터에서 여러 개의 5ml 및 10ml 피펫을 예열합니다.
2. 병 뚜껑을 부분적으로 풀고 미리 만들어진 3% 2-하이드록시에틸 아가로스 용액을 전자레인지에 15초 동안 돌립니다. 그런 다음 용액을 부드럽게 휘젓고 전자레인지에 15초 더 돌립니다.
   주의: 아가로스 용액을 휘젓을 때 용액이 공기에 노출되면 위로 올라와 넘칠 수 있으므로 주의하십시오.
3. 병에 고체 젤이 남아 있으면 전자레인지에 몇 ....

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
자이스 액시오팟	Carl Zeiss 현미경 검사	1021859251
도립 현미경	올림푸스	CKX41
DMEM/F-12	론자 바이오휘태커	12-719층
HyClone 기증자 말 세럼	피셔 사이언티픽	SH30074.03
페니실린 스트렙토마이신	생명 기술	15140-122
2-하이드록시에틸라가로오스: VII형, 낮은 겔화 온도	시그마-알드리치	39346-81-1

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