마우스의 Heterotopic 심장 이식

요약

마우스 heterotopic 심장 이식 모델은 거부하고 면역 반응의 메커니즘을 연구를위한 중요한 방법으로 많은 수사관에 의해 입증되었습니다. 그러나, 관련 기술은 여전히​​ 도전하고 있습니다. 표준 기술을 수정하여 우리는 1000 개 이상의 이식 성공을 있었다.

초록

그것이 DRS에 의해 도입된 이후 마우스 heterotopic 심장 이식이 널리 사용되었습니다. 1973 년 코리와 러셀. 이제 새로운 유전자 변형과 유전자 녹아웃 마우스가 사용 가능한지 거부하고 면역 반응을 공부에 특히 유용하며, immunologic의 시약의 다수가 개발되었습니다. 심장 이식 모델은 있지만, 기술적으로 많은 도전, 피부 이식 모델보다 엄격한 있습니다. 우리는 수정 기술을 개발하고 생쥐에서 심장 이식 heterotopic 1000 성공적으로 가지 경우를 통해 완료했습니다. 상승 대동맥과 복부 대동맥의 교합 (anastomosis)을 만들 때 두 숙박 봉합 그런 다음 계속 봉합과 대동맥의 두 측면에 문합에 대한 11-0 봉합사를 사용하여 기증자의 상승 대동맥과받는 복부 대동맥의 근위 및 말초 apexes에 게재됩니다. 숙박 봉합은 문합 쉽게 만들어 11-0는 출혈과 혈전증을 방지하기위한 이상적인 봉합의 크기입니다.

폐동맥과 하부 대정 맥의 교합 (anastomosis)을 만들 때 두 숙박 봉합은 기증자의 폐동맥과 함께 근위 아펙스과받는 사람의 하부 대정 맥의 말초 꼭대기에서 이루어집니다. , 근위 아펙스 체류 한 매듭이 하부 대정 맥의 오른쪽 벽과 기증자의 폐동맥을 봉합 후 하부 대정 맥과 기증자의 폐동맥의 왼쪽 벽면은 하부 대정 맥의 내부에서 계속 봉합과 함께 폐쇄 10-0 봉합과 하부 베나 동굴 밖으로 지속적으로 봉합과 함께 폐쇄됩니다. 문합 단지 하부 대정 맥과 10-0 봉합의 한쪽에 만들어되기 때문에이 방법을 수행하기 쉬운 것은 출혈과 혈전증을 피하기 위해 오른쪽 크기입니다. 이 문서에서는, 우리는 비디오를 보완하기 위해 기술의 세부 사항을 제공합니다.

프로토콜

기증자 준비 및 심장 하베스트 :

1. 마우스 수술 분야에 pentobarbital과 배치 부정사의 intraperitoneal 주사와 함께 anesthetized 있습니다.
2. 긴 정중선 복부 절개가 이루어집니다. 복부 내용은 복부 대동맥과 하부 대정 맥을 노출하기 위해 왼쪽에 거즈로 철회 있습니다.
3. 헤파린 (10u/ml) 1 ML은 heparinization에 대한 열등 베나의 정맥에 주입합니다.
4. thoracotomy이 이루어집니다 : 갈비뼈는 척추의 양쪽에 나누어 및 흉부 앞쪽에 벽은 심장을 노출 levered 최대집니다.
5. 하부 대정 맥, 우수한 베나 카바와 azygous 정맥은 6-0 실크 출혈도 잡았과 ligatures 우수 나누어집니다.
6. 오름차순 대동맥과 폐동맥이 멀리 distally 최대한 분리하고 나누어집니다.
7. 폐 정맥은 출혈도 잡았과 유대 관계에 말초 나누어집니다.
8. 마음 4 C ^O 생리 식염수로 perfused입니다.
9. 마음은 얼음 차가운 살린 솔루션에 저장됩니다.

수신자 준비 및 이식

1. 마우스 수술 분야에 pentobarbital과 배치 부정사의 intraperitoneal 주사와 함께 anesthetized 있습니다.
2. 긴 정중선 복부 절개가 이루어집니다. 복부 내용은 복부 대동맥과 하부 대정 맥을 노출 거즈와 복부 외부 철회 있습니다.
3. 복부 대동맥 및 하부 대정 맥의 지점은 노출과 10-0 봉합과 출혈도 잡았 있습니다.
4. 근위 및 말초 ligatures는 각각 대동맥 및 하부 베나의 정맥 주위에 배치됩니다.
5. venotomy는 30 게이지 바늘로받는 사람의 하부 대정 맥에서 이루어집니다. 오프닝은 다음 마이크로 가위로 기증자의 폐동맥 대동맥와 같은 길이로 연장됩니다.
6. aortotomy는 30 게이지 바늘로받는 사람의 복부 대동맥에서 이루어집니다.
7. 오픈 복부 대동맥 및 하부 대정 맥은 생리 식염수로 irrigated 있습니다.
8. 기증자의 심장은받는 사람의 복부의 왼쪽에 위치하고 거즈로 덮혀 있습니다.
9. 숙박 봉합은 기증자의 상승 대동맥과 복부 대동맥 수신자의 근위 및 말초 apexes에 게재됩니다.
10. 받는 사람의 복부 대동맥과 기증자의 오름차순 대동맥의 오른쪽의 문합은 계속 봉합과 함께 완료됩니다.
11. 두 사람은 남아의 봉합은 기증자의 폐동맥과받는 사람의 하부 대정 맥의 문합을위한 기증자의 폐동맥과 근위 아펙스과받는 사람의 하부 대정 맥의 말초 꼭대기에서 먼저입니다.
12. 하부 대정 맥과 기증자의 폐동맥의 왼쪽 벽면은 하부 대정 맥 내부의 지속적인 봉합과 함께 닫힙니다.
13. 근위 아펙스 숙박 봉합 하나의 매듭 후, 하부 대정 맥과 기증자의 폐동맥의 오른쪽 벽은 하부 베나 동굴 밖으로 지속적으로 봉합과 함께 폐쇄됩니다.
14. 기증자의 심장은받는 사람의 복부의 오른쪽으로 켜집니다. 받는 사람의 복부 대동맥과 기증자의 상승 대동맥의 문합의 오른쪽 벽은 계속 봉합과 함께 폐쇄됩니다.
15. 문합가 만든 후, 말초 묶인는 문합에서 출혈을 확인 제거됩니다.
16. 문합로부터 출혈이 거의가있는 경우, 근위 묶인가 제거됩니다. 기증자의 마음은 즉시 피로 채우고, 마음의 색깔은 빨간색되고 그것은 다시 때려 시작합니다.
17. 창자는 6-0로 연속 봉합 폐쇄 복부에 반환됩니다.
18. 받는 마우스가 따뜻한 지역에 위치합니다. 일시간 후받는 복구합니다.

토론

검색 결과

우리는 성공적으로 생쥐에서 심장 이식 heterotopic 이상의 1000 명의 환자를 수행하고 야생 유형, 유전자 변형과 유전자 녹아웃 마우스를 포함한 마우스의 다양한 변종, 90 %의 성공률을 통해 달성했습니다.

토론

DRS 이후. 코리와 러셀은 1973 년 생쥐에서 heterotopic 심장 이식을 도입,이 모델은 면역 거부 반응을 공부하고 새로운 immunosuppressive 전략을 개발하기 위해 특히 유용한 것으로 입증되었습니다. 수많은 유전자 변형과 유전자 녹아웃 마우스의 출현은 거부 / 허용의 메커니즘을 연구하는 새로운 방법을 제공했기 때문에이 모델은 이제 더 광범위하게 사용할 수 있습니다. vascularized의 심장 이식 모델은 임상 고체 장기 이식에 관련성이 높은 수 있습니다. 신생아 마음 피부 이식 또는 피하 이식이 기술적으로 단순하고 있지만, 이러한 이식에서 이식편 생존에 필요한 neovascularization이 alloge...