마우스 모델에서 치료 전달을 위한 정위 수조 마그나 접근법

초록

출처: Joshi, K., et al. 생쥐의 Cisterna magna를 통해 꼬리 뇌간과 상부 경추 척수에 미세 주입하기 위한 정위 수술 접근법. J. Vis. 경험. (2022년)

이 비디오는 뇌간과 상부 척수로의 표적 전달을 위한 수조 마그나 정위 접근법을 보여줍니다. 뇌척수액으로 채워진 수조 마그나에 접근함으로써 이 접근법은 표준 정위 고정 방법을 사용하여 도달하기 어려운 부위에 정밀하게 주사할 수 있습니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 수골막 개방

각

1. 진 Dumont 집게를 사용하여 후두골에서 아틀라스까지 뻗어 있는 경막을 잡습니다. 후두골 근처의 경막을 잡고 스프링 가위를 사용하여 경막에 작은 구멍(~0.5-1.5mm)을 만듭니다.
   참고: 이 위치에서는 뇌간과 그 위에 있는 경막 사이의 공간이 가장 넓어 경막을 안전하게 조작할 수 있는 충분한 공간을 제공합니다.
2. 스프링 가위를 사용하여 경막을 들어 올리고 경막을 더 엽니다. 창의 크기는 대상에 따라 다릅니다.
   참고: 여러 번의 세로 주입 또는 양측 주입을 할 때 더 큰 창이 필요합니다. 단일 편측 또는 정중선 주사를 할 때 작은 창으로 충분합니다.
3. 경막이 열리면 멸균 큐 팁으로 과도한 뇌척수액을 배출

합니다.

2. 랜드마크 및 영점 식별

1. 열린 경막을 통해 상세한 랜드마크가 있는 뇌간의 등쪽 표면을 봅니다. 중심관이 IV 심실로 열리는 지점인 obex는 표준 전후방 및 내측 영점입니다.

3. 표적 주입

1. 정위 암을 사용하여 피펫 또는 주사기를 표적으로 내리고 표준 정위 접근법과 마찬가지로 용액을 주입합니다. 3-50nL 사이의 부피를 사용할 때 바늘 자국을 피하기 위해 주사 후 1-5분 동안 그대로 두십시오. 그런 다음 정위 암을 사용하여 피펫이나 주사기를 들어 올립니다.
2. 여러 대상에 대해 3.1단계를 반복합니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
각진 집게, Dumont 5/45	FST	11251-35	경막을 잡기 위해서만
가위, Vannas 2.5mm(함께 제공되는 상자 포함	FST	15002-08	경막을 여는 데만 가위, 몸을 들어 올리는 상자
위 미세 조작기	Kopf	1760-61	표에 따라 위치를 조정하기 위해 전극 홀더에 부착
위 'U' 프레임 어셈블리 및 세포내 베이스 플레이트	Kopf	1730-B, 1711	수술용 프레임
멸균 면 팁 어플리케이터 Puritan		25-806 10WC	수술 부위에서 혈액 흡수

스프링 ) 정 좌 정