신경치료학

두개골이 노출된 마취된 인간 환자부터 시작하십시오. 환자는 두개내 종양 진단을 받았습니다.노출된 두개골에 구멍을 뚫어 접근 지점을 생성합니다.정위 유도를 사용하여 미리 결정된 경로를 따라 레이저 확산 섬유 또는 LDF를 삽입하고 제자리에 고정합니다.환자를 MRI 스캐너로 옮기고 LDF를 레이저 소스에 연결합니다.여러 각도에서 MRI 이미지를 캡처하여 섬유 경로와 종양을 시각화합니다.이를 통해 LDF가 종양 근처에 배치되었는지 확인하여 레이저 시술을 실시간으로 모니터링할 수 있습니다.종양 경계 내에서 가열을 제한하고 주변 조직을 보존하기 위해 목표 열 보호 지점을 설정합니다.집중된 열 에너지가 종양 세포 사멸을 일으키는 동안 레이저 절제를 시작합니다.최대 절제를 달성한 후 레이저를 중단하십시오.후속 MRI를 수행합니다. 감소된 종양 크기는 열 손상 정도를 확인하여 열 치료의 치료 가능성을 검증합니다.

주변 종양 주위 영역으로의 종양 세포 침윤을 특징으로 하는 침윤성 종양인 재발성 교모세포종 진단을 받은 마취된 인간 환자부터 시작합니다.종양 주위 영역은 내피 세포 사이의 긴밀한 접합부가 약물 침투를 제한하는 온전한 혈액-뇌 장벽(BBB)을 유지합니다.두피를 절개하고 두개골에 구멍을 만든 다음 MRI 유도를 사용하여 종양 코어에 레이저 프로브를 삽입합니다.프로브를 통해 레이저 광을 전달합니다.조직 발색단은 빛을 흡수하여 열로 변환하여 국부적인 온열요법 또는 조직 온도 상승을 생성합니다.레이저는 열 구배를 유도하여 온도가 종양 코어에서 최고조에 달하고 주변으로 갈수록 감소합니다.높은 심부 온도는 세포 단백질을 변성시키고 세포 사멸의 한 형태인 응고 괴사를 유발합니다.말초의 적당한 온열요법은 BBB의 밀착 접합부를 방해합니다.일시적인 BBB 파괴는 종양 주위 영역에서 침윤하는 종양 세포로의 약물 전달을 촉진합니다.

출처: Tadokoro, T., et al. 성인 마우스에서 연하 아데노 관련 바이러스 9(AAV9) 벡터 전달. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 마우스의 척수에 유전자 전달을 위한 연막하 주입 기술을 보여줍니다. 이 절차에는 경막을 노출시키고, 연막을 천공하고, 형광 단백질 발현 유전자를 운반하는 재조합 아데노 관련 바이러스(rAAV)를 연막하 공간에 주입하는 과정이 포함됩니다. 주사 및 회복 후 바이러스는 척수 세포의 유전자 발현을 촉진하여 표적 유전자 발현을 연구할 수 있습니다.

출처: Pietruczyk, E. A., et al. 마우스의 추궁 절제술 및 척수 창 이식. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 생체 내 이미징을 위해 마취된 마우스에 척수 창을 이식하는 방법을 보여줍니다. 이 프로토콜은 붕규산 커버 유리와 3D 프린팅 백플레이트를 사용하여 노출된 척수를 안정화합니다. 이 방법을 사용하면 고해상도 2광자 현미경을 사용하여 혈액-뇌 장벽 역학 및 신경혈관 상호 작용을 연구할 수 있습니다.

출처: Dalkin, W., et al. 비골 신경 손상 방법: 신경근 접합부를 복구하는 요인을 식별하고 테스트하기 위한 신뢰할 수 있는 분석법입니다. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 신경근 접합부(NMJ) 재생을 연구하기 위해 마우스에서 비골 신경 손상을 유도하는 수술 절차를 보여줍니다. 이 절차에는 비골 신경을 노출시키고, 통제된 압력을 가하여 손상을 유도하고, 축삭 재생을 지원하기 위해 신경외막이 손상되지 않도록 하는 것이 포함됩니다. 시간이 지남에 따라 대식세포는 축삭 파편을 제거하여 신경 복구와 NMJ의 재건을 촉진합니다.

출처: Brandli, A. 원격 사지 허혈 전처리: 설치류의 신경 보호 기술. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오는 전신 신경 보호를 유도하기 위한 쥐의 비침습적 사지 허혈 전처리 프로토콜을 보여줍니다. 이 절차에는 제어된 동맥 폐색 및 재관류가 포함되며, 보호 인자를 방출하는 세포 스트레스 경로를 유발합니다. 이러한 요인은 뇌 및 망막과 같은 원격 기관의 허혈성 및 대사 손상에 대한 저항력을 향상시킵니다.

출처: Schregel, K., et al. 급성 허혈성 뇌졸중에 대한 혈관내 치료의 최적화된 관리. J. Vis. 경험. (2018).이 비디오는 스텐트 리트리버 보조 진공 잠금 추출 기술을 사용하여 급성 허혈성 뇌졸중의 혈관내 치료를 보여줍니다. 유도 칼집은 혈전에 도달하기 위해 대퇴 동맥을 통해 도입됩니다. 스텐트 리트리버가 있는 카테터가 혈전을 고정하고 추출합니다. 성공적인 재관류를 확인하기 위해 혈관 영상을 수행합니다.

출처: Alomari, S., et al. 생존율이 높은 조직 수집을 위한 설치류에서 최소 침습 뇌종양 절제술의 구현. J. Vis. 경험. (2022년)이 비디오는 최소 침습 절제 시스템(MIRS)을 사용하여 종양을 이식한 마취된 마우스에서 종양 조직을 절제하는 방법을 보여줍니다. 이 절차에는 마우스를 정위 프레임에 고정하고, 뇌에 접근하기 위해 이전 수술 부위를 다시 열고, 흡입과 회전 블레이드를 활용하여 종양 절편을 제거하는 특수 캐뉼라를 삽입하는 작업이 포함됩니다. 절제 후 절제된 조직을 멸균 튜브를 통해 채취하고 상처를 봉합하여 회복할 수 있도록 합니다.

출처: Lefevre, MC, et al., 교모세포종의 펄스 전기장 치료를 위한 유연한 유기 전자 장치. J. Vis. 경험. (2022년)이 비디오는 신경 치료 응용 분야를 위한 표적 펄스 전기장 요법을 제공하기 위해 교모세포종 마우스 모델에 유연하고 생체 적합성 프로브를 이식하는 방법을 보여줍니다.

출처: Paro, MR, et.al. 마우스에서 중대뇌동맥 폐색 유발 뇌졸중 후 뇌근동조증 치료 모델. J. Vis. 경험. (2022).이 비디오는 일시적인 중대뇌동맥 폐색 후 혈관화된 근육을 뇌 표면에 이식하는 수술 절차를 보여줍니다. 이식편은 허혈 부위의 새로운 혈관 형성을 촉진하여 산소와 영양분 공급을 향상시킵니다. 시간이 지남에 따라 통합된 근육은 신경 생존을 지원하고 뇌졸중 후 회복을 돕습니다.

출처: Pan, J. et. al., 최소 침습 내시경 뇌내 출혈 대피. J. Vis. 경험. (2021년)이 비디오는 뇌 구조를 보존하기 위해 내비게이션 유도 칼집과 식염수 세척을 통한 내시경 흡인을 사용하여 최소 침습 내시경 혈종 제거를 보여줍니다.

출처: Li, Q., et al. 포유류 축삭 재생 조사: 성체 마우스 후근 신경절의 생체 내 전기천공. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 압착 부상 후 마우스 좌골 신경의 축삭 재생 과정을 보여줍니다. 분리된 신경은 축삭 성장을 시각화하기 위해 뉴런에서 발현되는 형광 단백질과 함께 이미징을 위해 고정되고 준비됩니다. 낙산화형광 현미경을 사용하여 손상 부위에서 축삭 재생을 추적하여 재성장 정도를 평가합니다.

출처: Rennert, RC, et al. 뇌동정맥 기형의 포괄적인 혈관내 및 개복 수술 관리. J. Vis. 경험. (2017).이 비디오는 인간 뇌에서 대뇌 동정맥 기형(AVM)의 개복 수술 절제술을 보여줍니다. 이 절차에는 뼈 피판 만들기, 지주막하 공간 접근, 공급 동맥 식별 및 폐색 및 배액 정맥, AVM을 조심스럽게 제거하는 작업이 포함됩니다. 수술 중 혈관 조영술은 완전한 절제를 확인한 후 수술 부위를 폐쇄하고 회복 기간 동안 환자를 모니터링합니다.

출처: Wang, L., et.al. 요추 추간판 탈출증 치료를 위한 전체 내시경 격리 구역 기술. J. Vis. 경험.(2023년)이 비디오는 돌출된 수핵과 파열된 섬유륜을 제거하여 요추 추간판 탈출증을 치료하는 최소 침습 내시경 절차를 보여줍니다. 이 기술은 표적 조직 절제술과 고주파 변조를 통해 영향을 받은 신경근의 감압을 완화하고 통증을 완화하며 신경 기능을 회복시킵니다.

출처: Gao, Z., et al. 교차 신경 전달 수술을 위한 척추 전 경로를 통한 직접 문합의 마우스 모델. J. Vis. 경험. (2021).이 비디오는 직접 경추 신경 재연결을 통해 마우스의 앞다리 움직임을 복원하는 방법을 보여줍니다. 그것은 신경근에서 절개된 오른쪽 C7 신경으로 인해 오른쪽 앞다리가 마비된 마우스로 시작됩니다. 왼쪽 C7 신경을 절단하고 척수전 경로를 통해 오른쪽으로 유도하고 오른쪽 C7 신경으로 봉합합니다. 그런 다음 수술 부위를 청소하고 닫습니다.

출처: Svientek, SR, et al. 성체 쥐에서 복합 재생 말초 신경 인터페이스(C-RPNI)의 제작. J. Vis. 경험. (2020).이 비디오는 말초 신경 손상의 쥐 모델에서 복합 재생 말초 신경 인터페이스(C-RPNI)의 외과적 구성을 보여줍니다. 이 절차에는 절개된 비골 신경을 근육 이식편에 부착하고 이를 진피 피부 이식편으로 오버레이하여 신경 재생을 촉진하는 과정이 포함됩니다. 시간이 지남에 따라 운동 및 감각 뉴런은 이식편 내에서 연결을 재확립하여 기능적 신경근 및 감각 구조의 형성을 가능하게 합니다.

마취된 신생아 강아지를 가열 패드 위에 놓습니다.에탄올로 두피를 소독하십시오.약물 활성화 억제 수용체에 대한 유전자를 운반하는 아데노 관련 바이러스와 추적 염료를 포함하는 바이러스 용액으로 주사기를 채웁니다.주사기 끝을 강아지의 머리에 맞추고 바이러스를 뇌에 천천히 주입하여 균일하게 분포시킵니다.강아지가 회복되도록 하십시오.배양하는 동안 바이러스 입자는 뉴런에 들어가 유전 물질을 핵으로 방출합니다.이는 신경막에서 억제성 수용체 발현을 유도합니다.이러한 수용체는 이온 채널과 결합하지만 활성화될 때까지 신경 신호 전달에 영향을 미치지 않습니다.다음으로, 표적 약물을 며칠에 걸쳐 강아지의 목에 피하 투여합니다.약물은 혈액-뇌 장벽을 통과하여 억제 수용체에 결합합니다.이것은 화학유전학적 반응을 유발하여 신경막을 가로지르는 이온 흐름을 변경하고 신경 신호 전달을 침묵시킵니다.이 화학유전학적 침묵은 뇌 장애를 모델링하고 비정상적인 뇌 활동을 연구하는 데 도움이 됩니다.

출처: Jain, RW, et al. 실험적 자가면역 뇌척수염 연구를 위한 마우스 미엘린 희소돌기아교세포 당단백질의 간단하고 효율적인 생산 및 정제. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 실험적 자가면역 뇌척수염(EAE) 연구에 사용되는 재조합 수초 희소돌기아교세포 당단백질(MOG)인 MOGtag의 분리 및 정제를 보여줍니다. 이 프로토콜에는 정제된 MOGtag를 얻기 위한 박테리아 용해, 초음파 처리, 원심분리 및 니켈 친화성 크로마토그래피가 포함됩니다. 이 단백질은 다발성 경화증 모델에서 B 세포 매개 자가면역 연구를 가능하게 합니다.

출처: Chen, S., et al., 신생아 마우스 뇌의 선조체 세포에서 유전자 조작을 위한 정위 수술. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 Cre 재조합효소와 녹색 형광 단백질 또는 GFP를 암호화하는 바이러스 벡터를 유전자 변형 마우스 새끼의 선조체에 정위 주입하여 loxP 측면 STOP 카세트를 절제하여 적색 형광 단백질 또는 RFP를 리포터로 활성화하여 유전자 조작을 달성하는 방법을 보여줍니다.

출처: Pereira, M. et. al., 바이러스 벡터의 뇌내 주사에 의한 상주 신경교세포를 인터뉴런으로 생체 내 직접 재프로그래밍. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 형질전환 마우스의 대뇌 피질에 아데노 관련 바이러스를 정위 주사하여 Cre 의존성 뉴런 재프로그래밍 및 형광 리포터 유전자를 신경교세포에 전달하는 방법을 보여줍니다.

출처: Fricano-Kugler, CJ, et al. 정위 주사를 통한 고역가 CRISPR 레트로 및 렌티바이러스의 설계, 포장 및 전달. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 마우스 뇌에서 정밀한 신경 유전자 편집을 위한 정위 바이러스 주입을 보여줍니다. 이 프로토콜은 치상회로의 정확한 바이러스 전달을 보장하여 형광 표지 및 CRISPR 매개 유전자 녹아웃을 가능하게 하여 생체 내에서 신경 회로, 유전자 기능 및 질병 메커니즘을 연구할 수 있습니다.

출처: Ullah, I., et.al. 중추신경계에 비강내 siRNA를 전달하는 동안 마우스를 배치하기 위한 포지셔닝 장치. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 특수 포지셔닝 장치를 사용하여 뉴런 표적 펩타이드-siRNA 복합체를 마우스 뇌에 전달하기 위한 정밀한 비강내 투여 기술을 보여줍니다. 마취된 마우스는 폐 배액을 방지하면서 siRNA 흡입을 최적화하기 위해 머리를 아래로 향하게 하고 앞으로 고정합니다. 표적 펩타이드는 뉴런에서 수용체 매개 흡수를 촉진하여 뇌에서 표적 siRNA 전달 및 유전자 침묵을 가능하게 합니다.

출처: Keefe, KM, et al. 렌티바이러스 벡터의 직접 주사는 쥐 척수의 여러 운동 경로를 강조합니다. J. Vis. 경험. (2019).이 비디오는 신경 경로를 추적하기 위해 쥐 척수에 고효율 역행 수송(HiRet) 바이러스 벡터를 주입하는 방법을 보여줍니다. 이 바이러스는 시냅스 진입을 위한 당단백질과 형광 단백질 코딩 유전자를 가지고 있습니다. 바늘을 척수에 삽입하고 바이러스 현탁액을 제어된 속도로 투여합니다. 바늘은 바이러스 확산을 위한 충분한 시간을 허용한 후 최종적으로 빼냅니다.

출처: Li, Q. et al. 포유류 축삭 재생 조사: 성체 마우스 후근 신경절의 생체 내 전기천공. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 축삭 재생을 연구하기 위해 마우스 DRG 뉴런의 전기천공 매개 형질감염을 보여줍니다. DRG 뉴런에 핵산 구조물을 전달하고, 좌골 신경 손상을 유도하고, 축삭 재생을 평가하는 단계를 간략하게 설명합니다.

출처: Li, D., et al. 성인 마우스에서 재조합 아데노 관련 바이러스의 직접 척수강내 주사. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 깨어 있는 마우스의 뇌척수액(CSF)에 아데노 관련 바이러스(AAV)를 척수강내 주사하는 절차를 보여주며 주사기 준비, 척추 정렬 및 정확한 바늘 삽입을 다룹니다. 이 방법은 표적 유전자 전달을 검증하여 CNS 치료의 잠재력을 뒷받침합니다.

출처: Park, SW, et al. 생쥐 망막 색소 상피에서 유전자 치료를 위한 바이러스 벡터의 윤부 접근법-망막하 주사. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오는 마우스 모델에서 망막 색소 상피(RPE)에 바이러스 벡터를 망막하 주입하는 방법을 설명합니다. 마취 및 눈 준비부터 정확한 렌티바이러스 벡터 전달에 이르기까지 RPE에서 유전자 통합 및 발현을 보장하는 절차를 자세히 설명합니다.

출처: Bender, HR, et.al. 양이온성 및 음이온성 리포솜을 사용하여 CNS에 치료용 siRNA를 전달합니다. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 리포솜 siRNA-펩티드 복합체(LSPC)를 사용하여 프리온 단백질(PrP) siRNA를 뉴런에 표적으로 전달하는 방법을 보여줍니다. 양이온성 리포좀은 PrP 표적 siRNA에 정전기적으로 결합하며, 이는 혈액-뇌 장벽을 가로지르는 수용체 매개 수송을 위해 RVG-9r 펩타이드에 의해 더욱 안정화됩니다. 일단 뇌 내부로 들어가면 LSPC는 뉴런에서 엔도사이토시스를 거쳐 siRNA를 방출하여 RNA 간섭을 시작하고 PrP 발현을 감소시키며 프리온 질병 진행을 방해합니다.

출처: Grames, MS, et al. 쥐에게 아데노 관련 바이러스의 정맥 투여 방법 및 팁 및 중추신경계 형질도입 평가. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 쥐에서 재조합 아데노 관련 바이러스(AAV)의 꼬리 정맥 주사를 보여줍니다. 외측 꼬리 정맥에 주입된 후 바이러스는 혈류로 들어가 심장을 순환한 후 뇌에 도달하여 뉴런으로 들어가 신경 치료 응용을 위한 표적 단백질 생산을 촉진합니다.

출처: Denaxa, M., el al., 초기 출생 후 마우스 뇌에 화학유전적으로 조작된 피질 중간 뉴런 전구 세포의 이식. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 관심 유전자를 운반하는 플라스미드 벡터를 배아 뇌 절편의 중간 뉴런 전구 세포에 주입한 후 플라스미드 진입 및 유전자 발현을 위한 전기천공법을 시사하는 절차를 보여줍니다. 이러한 변형된 전구 세포는 나중에 뇌 장애 치료에 사용될 수 있습니다.

출처:Pourshafie, N., et al. 설치류의 신경근 질환을 치료하기 위해 재조합 아데노 관련 바이러스 혈청형 9를 사용한 MicroRNA의 전신 전달. J. Vis. Exp. (2018).이 비디오에서 척수 및 구근 근위축증 또는 SBMA 영향을 받은 마우스는 치료용 microRNA를 암호화하는 플라스미드를 운반하는 재조합 AAV(아데노 관련 벡터) 벡터의 꼬리 정맥 주사를 받습니다. 벡터는 돌연변이 AR(안드로겐 수용체)-mRNA(메신저 리보핵산)에 결합하여 분해를 유발하는 마이크로RNA를 생성합니다. 이는 독성 단백질 축적을 줄이고 신경근 기능을 개선하는 데 도움이 됩니다.

출처: Smit, RD, et al. 뇌 및 척추 복합 수술을 사용하여 이중 바이러스 벡터로 신생아 쥐의 피질척수관을 표적으로 삼습니다. J. Vis. 경험. (2021년)이 비디오는 신생아 쥐의 피질 척수 뉴런에 대한 바이러스 벡터의 표적 전달을 보여줍니다. 이 프로토콜은 전행성 및 역행성 바이러스 주사를 사용하여 정확한 유전자 발현을 가능하게 하여 척수 손상 후 신경 재생 및 가소성에 대한 연구를 촉진합니다.

출처: Porlan, E., et al. 신경줄기세포 자율 및 비자율 효과 분석을 위한 성체 마우스 V-SVZ 세포의 안정적이고 효율적인 유전자 변형. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 마우스 모델에서 바이러스 운반 치료 유전자의 정위 주입을 통해 심실-뇌실하 영역(V-SVZ)에서 신경 줄기 세포(NSC)의 안정적인 유전자 변형을 보여줍니다. 바이러스는 NSC에 들어가 역전사를 거쳐 게놈에 통합되어 신경치료 응용을 위한 안정적이고 효율적인 유전자 변형을 가능하게 합니다.

출처: Mangold, K., H el. al., 배아기 7.5일에 자궁 내 나노 주사(NEPTUNE)에 의한 쥐 신경판 표적화. J. Vis. 경험. (2022년)이 비디오는 배아 마우스 모델에서 신경판 표적화를 위한 자궁 내 나노 주입 방법을 보여줍니다. 고역가 렌티바이러스 용액을 양강에 주입하여 신경판 세포에 통합하여 신경발달 연구 및 치료 응용을 위한 안정적인 유전자 조작을 가능하게 합니다.

출처: Ino, D. et. al., 전기천공에 의한 설치류 좌골 신경의 슈완 세포로의 생체 내 유전자 전달. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 전기천공법을 사용하여 설치류 좌골 신경의 슈완 세포로의 생체 내 유전자 전달을 보여줍니다. 플라스미드 DNA-염료 용액이 신경에 주입되고 전기 펄스가 DNA 진입을 용이하게 합니다. DNA는 나중에 세포의 게놈에 통합되어 슈완 세포에서 성공적인 유전자 전달을 가능하게 합니다.

출처: Keener, D. G., et al. 마우스 해마 흥분성 및 클래스 특이적 억제 뉴런의 다양한 기관형 절편 배양에 걸친 단일 세포 전기천공. J. Vis. 경험. (2020).이 비디오는 마우스 해마 절편 배양 내의 뉴런에 플라스미드 DNA를 도입하는 단일 세포 전기천공 과정을 보여줍니다. 이 절차에는 정확한 피펫 위치 지정, 압력 조정 및 전기천공 펄스가 포함되어 신경막을 일시적으로 투과시켜 유전자 전달을 촉진합니다. 전기천공 후, 슬라이스를 배양하여 도입된 관심 유전자의 발현을 가능하게 합니다.

출처: Kozin, E. D., et.al. 청각 경로의 광유전학적 자극을 위한 쥐 등쪽 달팽이관 핵의 직접 시각화. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오는 빛 유도 청각 자극을 가능하게 하기 위해 마우스 등쪽 달팽이관 핵(DCN)으로의 바이러스 매개 유전자 전달을 보여줍니다. 빛에 민감한 이온 채널인 옵신을 암호화하는 바이러스 벡터는 직접 접근을 위해 개두술 및 소뇌 흡인 후 DCN에 주입됩니다. 발현된 옵신은 뉴런이 빛에 의해 활성화될 수 있도록 하여 광유전학을 사용하여 청각 경로 반응을 연구하기 위한 모델을 제공합니다.

출처: Tagliafierro, L., et al. 후성유전체 편집 도구를 인간 유도 만능 줄기 세포 유래 질병 모델에 효율적으로 전달하기 위한 렌티바이러스 벡터 플랫폼. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 파킨슨병의 핵심 단백질인 알파-시누클레인의 표적 후생유전학적 변형을 위한 신경 전구 세포(NPC)의 렌티바이러스 형질도입을 보여줍니다. 이 프로토콜은 메틸트랜스퍼라제 매개 DNA 메틸화를 가능하게 하여 유전자 조절 및 잠재적인 치료 개입을 연구하기 위해 SNCA 발현을 감소시킵니다.

출처: Lutz, D., et al. 발달 중인 마우스 뇌 및 척수의 자궁 내 형질도입 후 초미세구조 신경가소성 매개변수의 평가. J. Vis. 경험. (2019).이 비디오는 마우스 배아에서 자궁 내 주사를 통한 바이러스 형질도입을 보여줍니다. 임신한 쥐를 수술을 위해 준비하고 정중선 절개를 하여 자궁 뿔을 노출시킵니다. 원하는 유전자를 포함하는 바이러스와 추적 염료의 혼합물을 표적 위치의 자궁 주머니 내의 배아에 주입합니다. 그런 다음 봉합하기 전에 자궁 뿔을 다시 배치합니다.

다리의 움직임과 감각을 조절하는 노출된 온전한 오른쪽 좌골 신경이 있는 마취된 쥐를 예로 들어 보겠습니다.신경 분절을 절제하여 틈을 만들고 신경 축삭을 절단하고 신호 전달을 방해합니다.절단된 원위 축삭이 악화되어 특수한 신경 복구 또는 슈완 세포가 분리됩니다.마이크로채널이 있는 부드러운 튜브인 생체 공학 전도성 신경 스캐폴드를 절단된 양쪽 끝에서 신경의 외층인 신경외막에 봉합합니다.신경 말단 근처에 쌍을 이루는 전극을 이식하여 피부 아래의 와이어를 목 뒤쪽으로 통과시킵니다.지속적인 전기 자극을 가하여 스캐폴드에 부드러운 펄스를 전달합니다.퇴행성 원위 말단의 슈완 세포는 스캐폴드로 이동하여 마이크로채널을 따라 정렬됩니다.이 세포는 근위부에서 축삭 확장을 자극하는 성장 인자를 방출합니다.축삭이 확장됨에 따라 슈완 세포는 지질이 풍부한 미엘린 막으로 축삭을 감싸 신호 전달을 복원합니다.이것은 신경 복구를 위한 스캐폴드와 전기 자극의 잠재력을 보여줍니다.

레이저로 인한 눈의 시신경 유두에 손상을 입은 마우스를 예로 들어 보겠습니다.손상은 신경에 공급하는 혈관에서 내피 세포 손상과 혈전 형성을 일으켜 혈류를 감소시키고 허혈을 유발합니다.허혈은 시신경 유두의 망막 신경절 세포 축삭에서 산소를 빼앗습니다.RGC 세포체에서 이러한 파괴는 미토콘드리아 기능을 손상시키고 활성 산소종 생성을 증가시킵니다.그 결과 산화 스트레스는 세포사멸 신호 전달 경로를 활성화하여 RGC 손상을 초래합니다.마우스를 가압 챔버에 놓고 산소가 풍부한 환경에 노출시킵니다.고농도에서 산소는 혈장에 용해되어 허혈성 신경으로 확산됩니다.이에 대한 반응으로 RGC의 항산화 효소가 활성화되어 ROS를 중화합니다.항세포사멸 유전자 발현이 증가하여 RGC 생존율이 향상됩니다.또한 강화된 산소는 혈전을 용해시키는 혈관의 효소를 활성화합니다.산소는 또한 혈관 확장을 유발하여 신경으로의 혈류를 회복시킵니다.

부착된 쥐 미세아교세포를 멀티웰 플레이트에 담습니다.폴리아크릴산 코팅 자성 나노입자(MNP)를 테스트 웰에 추가하고 다른 웰은 대조군으로 처리되지 않은 상태로 둡니다.세포를 배양하여 엔도사이토시스를 통해 MNP 흡수를 허용하여 내재화를 가능하게 합니다.결합되지 않은 MNP를 제거하기 위해 완충액으로 세척합니다.세포를 분리하기 위해 효소 용액을 첨가하십시오.분리된 세포를 튜브로 옮기고 원심분리하여 펠릿화합니다.상청액을 버리고 펠릿을 기저 배지에 재현탁한 다음 현탁액을 미세 원심분리기 튜브로 옮깁니다.마그네틱 어플리케이터 장치 내의 구리 코일 중앙에 튜브를 놓습니다.코일은 교류 자기장 (AMF) 을 생성하는 반면 어플리케이터는 일정한 목표 온도를 유지합니다.AMF는 MNP와 상호 작용하여 열을 발생시켜 세포 구조를 파괴하고 세포 사멸 경로를 유발합니다. 대조적으로, MNP가 없는 대조군 셀은 열 손상을 나타내지 않습니다.MNP 처리된 세포의 생존력 감소는 자기 온열요법으로 인한 열...

트랜스웰 시스템을 다양한 치료를 받는 5개 그룹으로 나눕니다.첫 번째 그룹은 대조군 역할을 하며 신경모세포종과 미세아교세포의 공동 배양으로 구성됩니다.두 번째 그룹에서는 섬유성 β-아밀로이드(fAβ) 단독으로 공동 배양기를 처리합니다. fAβ는 신경모세포종 세포에 손상을 유도합니다.세 번째 그룹에서는 신경모세포종 세포를 808나노미터 레이저로 치료한 다음 처리되지 않은 미세아교세포와 공동 배양합니다.레이저는 산화 스트레스를 줄여 신경 세포 생존을 향상시킵니다.네 번째 그룹에서는 1,064나노미터 레이저로 미세아교세포를 치료한 다음 치료되지 않은 신경모세포종 세포와 공동 배양합니다.활성화된 미세아교세포는 fAβ 제거율을 높이고 사이토카인을 방출하여 신경모세포종 세포를 보호합니다.다섯 번째 그룹에서는 미세아교세포를 1,064나노미터 레이저에, 신경모세포종 세포를 808나노미터 레이저에 노출시킨 다음 공동 배양합니다.이중 파장 노출의 결합 효과는 단일 파장 치료에 비해 더 큰 신경...

출처: Han, J., et.al. 시험관 내 말초 신경 재생을 위한 나노초 펄스 전기장에 의한 슈완 세포 성장 조절. J. Vis. 경험. (2024년)이 비디오는 슈완 세포(SC) 성장을 조절하기 위한 나노초 펄스 전기장(nsPEF) 기술의 적용을 보여줍니다. 빠른 전기 펄스는 SC 막에 일시적인 나노 기공을 유도하여 SC 증식, 역분화 및 신경 영양 인자 분비를 유도하는 신호 전달 경로를 활성화하는 칼슘 유입을 촉진합니다. 이러한 세포 반응은 축삭 지원, 신경 생존 및 잠재적인 수초화를 향상시켜 nsPEF가 신경 복구를 위한 유망한 도구임을 강조합니다.

출처: Shionoya, Y., et al. 인공 신경을 사용하여 송곳니 하치조 신경 재생을 촉진하기 위한 에탄올 유도 경추 교감 신경절 차단 적용. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 생분해성 스캐폴드와 에탄올 유도 교감신경 차단을 사용하여 하치조신경(IAN) 재생을 위한 송곳니 모델을 보여줍니다. 이 절차에는 경추 교감 신경절에 외과적으로 접근하고 에탄올을 주입하여 혈관 확장을 유도하는 것이 포함됩니다. 결과적으로 손상 부위로의 혈류가 증가하고 Schwann 세포 유도 축삭 재생과 결합되어 신경 재생이 촉진됩니다.

출처: Lai, J., et al. 설치류 뇌에서 억제제의 동시 전기생리학적 기록 및 미세 주사. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오는 쥐 상골에서 동시 신경 기록 및 억제를 위한 미세 주입 기반 기술을 보여줍니다. 이 절차에는 정위 표적화, 두개골 드릴링, 신경 활동을 기록하면서 억제성 신경 전달 물질을 전달하는 주사대 삽입이 포함됩니다. 빛 자극은 활동 전위를 유발하는 반면 약물 미세 주사는 신경 흥분성을 억제합니다. 신경 전달 물질 수치가 감소함에 따라 신경 활동이 기준선으로 돌아가 억제와 회복에 대한 연구가 가능해집니다.

출처: Poinsatte, K., et al., 마우스의 반복적인 저산소 전처리 및 일시적인 중대뇌 동맥 폐색에 따른 신경혈관 보호의 정량화. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오는 허혈성 뇌졸중을 유발하기 전에 제어된 저산소증 주기에 마우스를 노출시켜 반복적인 저산소 전처리(RHP) 방법을 보여줍니다. 이 실험은 혈액-뇌 장벽 안정성, 신경 적응 및 염증에 미치는 영향을 평가합니다.

출처: Lee, YF, et al. 당뇨병 쥐 모델에서 신경 전도 차단을 위한 초음파 도구. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 당뇨병 쥐 모델에서 좌골 신경에서 비복근까지의 활동 전위를 차단하기 위해 고강도 집속 초음파(HIFU)를 사용하는 방법을 보여줍니다. HIFU 빔을 신경에 전달하면 근육 신호가 감소하면 당뇨병성 신경병성 통증 완화를 위한 비침습적 치료법으로서의 HIFU의 잠재력이 확인됩니다.

출처: Yan, X., et. al., SH-SY5Y 세포의 포도당 결핍으로 인한 손상에 대한 신경 보호제로서 대기압 플라즈마 제트의 새로운 적용. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 산화 스트레스를 조절하고 세포 생존력을 향상시켜 포도당이 결핍된 신경모세포종 세포에서 저선량 대기압 혈장 치료의 신경 보호 활성을 보여줍니다.

출처: Casquero-Veiga, M. et al. 쥐의 심부 뇌 자극에 의해 유도된 활동 패턴을 밝히기 위한 생체 내 양전자 방출 단층 촬영. J. Vis. 경험. (2022).이 비디오는 쥐 모델에서 FDG-PET 이미징을 사용하여 심부 뇌 자극(DBS)의 대사 효과를 보여줍니다. 대사 활동이 증가하거나 억제된 뇌 영역을 매핑하기 위해 FDG 투여, DBS 적용 및 PET/CT 이미징과 관련된 단계를 간략하게 설명합니다.

출처: Batra, V., et al. 정맥 메스암페타민 자가 투여에 대한 심부 뇌 자극 효과를 평가하는 일반적인 방법. J. Vis. 경험. (2016).이 비디오는 동물이 레버를 눌러 정맥 메스암페타민을 자가 투여하여 측좌핵에서 도파민 방출에 의해 유발되는 강박적인 약물 추구 행동으로 이어지는 약물 중독의 쥐 모델을 보여줍니다. 이에 대응하기 위해 쥐는 이식된 양극성 전극을 통해 심부 뇌 자극(DBS)을 받아 측좌핵의 과잉 활동 뉴런을 억제하기 위해 고주파 펄스를 전달합니다. 그런 다음 약물 추구 행동의 변화를 관찰하여 DBS의 효과를 평가하여 중독 관련 반응을 줄일 수 있는 잠재력을 밝힙니다.

출처: Selvakumar, T., et al., 전시상핵의 심부 뇌 자극 후 쥐 해마의 유전자 발현 변화 분석. J. vis. 경험. (2015년)이 비디오는 쥐의 뇌에 전극을 이식하여 신경 활동을 조절하고 해마와의 의사소통을 강화하여 신경 생존 및 신경 발생을 지원하는 심부 뇌 자극(DBS)을 적용하는 절차를 보여줍니다.

출처: Zhang, L., et al. 근적외선(NIr) 광은 마우스 전정 감각 상피에서 미토콘드리아 기능 마커의 발현을 증가시킵니다. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오는 면도한 쥐 두피에 NIr 빛을 적용하여 전정 뉴런을 활성화하고 슈퍼옥사이드 디스뮤타제-1(SOD-1) 생성을 자극하여 신경 기능을 지원하는 과정을 보여줍니다. 이 절차는 신경 보호 전략으로서의 NIr 요법을 강조합니다.

출처: Kuhn, Y. et al. 일차 운동 피질 내의 피질내 억제는 주의의 초점을 변경하여 조절할 수 있습니다. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 경두개 자기 자극(TMS)을 사용하여 운동 뉴런 활동을 조절하고 근전도 검사(EMG)를 통해 근육 반응을 측정하는 방법을 보여줍니다. 운동 핫스팟을 찾고, 자극 역치를 결정하고, 피질 억제에 대한 역치 이하 TMS(subTMS)의 효과를 평가하는 단계를 간략하게 설명합니다.

출처: Zhao, Z. et al. 고주파 자극에 의한 마우스 치상 회류의 활성화를 위한 침습적 방법. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 마우스 해마 치상회에 고주파 심부 뇌 자극을 전달하는 프로토콜을 보여주며 신경 활성화, 시냅스 가소성 및 신경 발생에 미치는 영향을 자세히 설명합니다.

출처: Taube, W., et.al., 인간의 피질운동신경 전달 변화에 대한 비침습적 평가. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 반복적인 경두개 자기 자극(rTMS) 후 인간의 피질운동 신경 전달 변화를 평가하는 비침습적 방법을 보여줍니다. 이 연구는 빠르고 직접적인 피질 척수 경로를 다시냅스 연결과 구별하는 전기생리학적 기술을 소개합니다.

출처: Kodani, S., et.al. 마우스의 수면/각성 상태를 모니터링하는 동안 신경 회로의 광유전학적 조작. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 생쥐의 수면에서 각성으로의 전환에 관여하는 신경 회로의 광유전학적 조작을 보여줍니다. 이 절차에는 광섬유와 전극을 뇌와 근육에 외과적으로 이식하여 빛 자극과 전기생리학적 기록을 가능하게 하는 것이 포함됩니다. 말단 줄조선(BNST)의 침대 핵에서 빛에 민감한 양이온 채널을 활성화하기 위해 빛을 전달함으로써 신경 활동이 조절되어 연구자들은 각성 유도와 관련된 뇌 및 근육 신호를 분석할 수 있습니다.

출처: Sanchez, CA, et al. 쥐의 만성 이식을 위한 말초 신경 자극 전극의 준비. J. Vis. 경험. (2020).이 비디오는 깨어 있는 쥐의 미주 신경 자극을 보여줍니다. 만성 말초 신경 커프 전극을 이식하고 레버 누르기 작업을 훈련받은 쥐는 이식된 헤드 캡을 통해 자극 발생기에 연결됩니다. 미주 신경은 레버를 성공적으로 누를 때마다 즉시 자극되어 운동 지도가 확장됩니다.

출처: Childs, J. E., et al. 소멸 학습과 관련된 경로에서 가소성을 유도하는 도구로서의 미주 신경 자극. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오는 동결 행동을 줄이기 위해 쥐 모델에서 미주 신경 자극(VNS) 방법을 보여줍니다. 공포에 걸린 쥐는 소리 재노출 중에 VNS를 받아 동결이 감소하고 치료 잠재력이 드러납니다.

출처: Remacle, T., et al. 다열 유도 척수 자극으로 허리 수술 실패 환자의 요통 치료. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 허리 수술 실패 증후군(FBSS) 환자의 만성 요통을 관리하기 위해 다중 열 패들 리드 척수 자극을 사용하는 방법을 보여줍니다. 사전 이식된 리드는 통증이 없는 감각 경로를 활성화하여 통증 신호를 차단하고 통증 인식을 줄이는 표적 전기 펄스를 전달합니다.

출처: Moeller, S., et al., 치료 저항성 우울증에서 보조 신경자극 도구로서의 미주 신경 자극. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 치료 저항성 우울증(TRD)에 대한 보조 신경자극 요법으로서 미주 신경 자극(VNS)에 대한 임상 프로토콜을 보여줍니다.

출처: Charalambos, CC, et al. 탐색된 경두개 자기 자극을 사용한 발목 근육의 피질 척수 경로의 양측 평가. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 경두개 자기 자극(TMS)을 사용하여 다리 근육의 피질 척수 경로를 평가하는 방법을 보여줍니다. 다리 근육의 반대쪽 피질 운동 기능을 평가하기 위해 한쪽 뇌 반구에서 휴식 및 활성 근육 반응을 기록합니다.

바이오프린팅된 골격근 구조물을 섭취하십시오.이러한 구조에는 근육 섬유와 마이크로스피어가 내장된 피브린 하이드로겔 기둥이 포함되어 있습니다.마이크로스피어는 신경영양 인자를 둘러싸고 있는 다공성 고분자 구조입니다.병아리 배아에서 분리된 후근 신경절을 취하십시오.각 구조물에 하나의 신경절을 놓고 부화합니다.신경영양 인자는 제어된 생리학적 농도로 마이크로스피어에서 방출되어 신경돌기라고 하는 뉴런에서 돌출의 발아를 촉진합니다.구성을 고정하기 위해 고정제를 추가합니다.완충액으로 세척하고 비특이적 항체 결합을 방지하기 위해 차단 용액을 첨가합니다.신경돌기에 특이적으로 결합하는 1차 항체와 함께 배양합니다.결합되지 않은 항체를 제거하기 위해 완충액으로 헹구십시오.1차 항체에 결합하는 형광 태그가 지정된 2차 항체를 추가합니다.과도한 항체를 제거하기 위해 완충액으로 세척합니다.핵 염료와 커버슬립이 포함된 마운팅 매체를 사용하여 구조물을 마운트합니다.공초점 현미경으로 신경돌기 성장을 시각화합니다.

마취된 종양 보유 마우스로 시작하여 머리를 깎습니다.집속 초음파 시스템과 통합된 MRI 스캐너에 넣습니다.초기 MRI 스캔은 뇌종양과 인근 혈관의 위치를 찾습니다.조영제를 정맥 주사한 다음 가스로 채워진 미세 기포에 코팅된 형광 표지 나노입자를 투여합니다.조영제와 미세 기포가 순환하여 뇌에 도달합니다.종양 부위에 집속 초음파를 적용합니다.초음파는 미세 기포를 팽창 및 수축시켜 종양 근처의 혈액-뇌 장벽(BBB)의 긴밀한 접합부를 파괴합니다.이렇게 하면 혈관에 일시적이고 국부적인 구멍이 생겨 조영제가 들어가 BBB 파괴를 확인합니다.미세 기포가 깨져 표면에서 나노 입자가 방출됩니다.이 나노입자는 BBB 개구부를 통해 뇌 조직으로 들어가 종양과 그 주변 환경에 축적됩니다.형광 이미징은 종양 부위의 나노입자 국소화를 추적하여 신경치료용 약물 전달을 위한 나노입자 분포에 대한 통찰력을 제공합니다.

침윤성 뇌종양인 교모세포종의 마우스 모델부터 시작하십시오.종양 주변부에서 혈액뇌장벽(BBB)은 손상되지 않은 상태로 유지되며 내피 세포는 분자 진입을 조절하는 긴밀한 접합을 형성합니다.마우스에는 레이저 광을 전달하기 위해 헤드 마운트 광섬유가 장착되어 있습니다.피부와 두개골을 관통하여 뇌에 도달하는 저강도 적외선 레이저를 투여합니다.레이저는 뇌 세포의 분자 산소를 여기시켜 활성 산소종(ROS)을 생성합니다.결과적인 산화 스트레스는 밀착 접합을 방해하고 BBB 투과성을 증가시킵니다.BBB를 통한 체액 누출은 뇌 세포와 혈관을 둘러싸고 있는 간질액(ISF)의 흐름을 향상시킵니다.약물 전달을 위해 설계된 나노 크기의 소포인 리포좀 현탁액을 정맥 주사합니다.리포좀은 파괴된 BBB를 통과하고 향상된 ISF 흐름은 종양 내에서 리포좀의 분포 및 축적을 촉진합니다.시간이 지남에 따라 밀착 접합 단백질의 발현은 BBB 무결성을 회복하고 추가 누출을 방지합니다.

페트리 접시의 인공 뇌척수액에 담근 채취한 쥐 뇌로 시작합니다.자기 밀리로봇을 뇌 피질에 증착합니다.MANiAC라고 불리는 밀리로봇은 생체 적합성 하이드로겔 알긴산염으로 구성된 마이크로캡슐 내에 내장되고 모델 약물로 염료가 로드된 자기 정렬 니켈 나노로드로 구성됩니다.페트리 접시 아래에 외부 자기장 발생기를 배치하여 균일한 회전 자기장을 생성합니다.니켈 나노로드는 자기장과 정렬되고 회전하여 MANiAC를 피질 표면 위로 추진합니다.MANiAC가 피질 표면을 가로지르도록 하고 제어된 약물 방출을 위해 표적 부위에서 일시 중지하도록 합니다.약물은 알지네이트 캡슐을 통해 뇌의 세포외 기질로 확산되어 뉴런과 신경교세포에 도달합니다.세포는 수용체 매개 엔도사이토시스를 통해 약물 분자를 흡수합니다.실행 및 일시 중지 동작은 국소적인 약물 침착을 보장하면서 표적 이탈 전달을 최소화하고 이전에 처리된 부위에서 재배치를 허용합니다.

인간 단핵구 유래 미세아교세포 유사 세포를 배양합니다.항염증제를 함유한 나노입자를 실험 배양액에 도입하고 유리 약물을 대조군에 도입합니다.나노입자는 친수성 껍질과 친유성 약물을 캡슐화하는 소수성 코어를 특징으로 합니다.세포는 나노입자를 엔도사이토시하여 약물을 세포 내에서 방출하여 전달을 향상시킵니다.유리 약물은 농도 구배에 의해 제한되는 과정인 수동 확산에 의해 들어가 세포 내 농도가 낮아집니다.톨 유사 수용체에 결합하여 전염증성 사이토카인 방출을 유발하는 박테리아 항원을 추가합니다.실험군의 나노입자와 대조군의 유리 약물을 포함하는 신선한 배지와 함께 배양물을 배양합니다.이 두 번째 노출은 나노입자 전달을 통해 일관된 치료 약물 수준을 보장하여 사이토카인 생성을 억제하는 다운스트림 신호 전달을 유도합니다.유리 약물의 제한된 흡수는 치료 이하의 세포내 농도를 초래합니다.상청액을 수집하여 사이토카인 수준을 평가하고 나노입자 매개 약물 전달의 향상된 치료 효과를 평가합니다.

돌연변이된 알파-시누클레인을 과발현하는 도파민성 뉴런을 포함하는 쥐 배아의 일차 중뇌 배양으로 시작합니다.처리 웰의 배지를 테스트 화합물이 포함된 신선한 배지로 교체하고 대조군 웰의 배지를 일반 배지로 교체합니다. 그런 다음 배양하십시오.대조군에서 알파-시누클레인은 도파민성 뉴런에 독성 응집체를 형성하여 신경돌기 수축을 유발하고 신경 세포 사멸을 초래합니다.치료에서 시험 화합물은 알파-시누클레인과 상호 작용하여 응집을 방지하며 신경돌기 구조를 보존하고 신경 보호 기능을 제공합니다.세포를 고정하고 투과시킨 다음 비특이적 결합 부위를 차단합니다.도파민성 뉴런에 대한 추가 라벨링과 함께 모든 뉴런을 표지하기 위해 1차 항체와 함께 배양합니다.세포를 세척하고 1차 항체에 특이적인 형광단 태그가 있는 2차 항체를 추가합니다.도립 형광 현미경을 사용하여 차등적으로 표지된 도파민성 뉴런을 계산한 다음 공초점 현미경으로 전환하여 신경돌기 길이를 측정합니다.대조군에 비해 치료에서 온전한 신경돌기를...

증식하는 종양 세포로 구성된 뇌종양을 앓고 있는 마취된 쥐부터 시작하십시오.쥐의 두개골을 노출시키고 구멍을 만들어 종양이 있는 뇌 부위를 드러냅니다.세포 침투 펩타이드 및 발암성 단백질인 c-myc 억제제와 융합된 열 반응성 생체 고분자를 섭취하십시오.뇌로 전달하기 위해 뒷다리의 대퇴 정맥에 생체 고분자를 주입합니다.두개골 구멍을 통해 적외선을 가하여 종양 부위를 가열하면 종양 맥관 구조를 따라 생체고분자 응집을 유도하고 혈관 투과성을 증가시킵니다.부위를 냉각하면 응집체가 용해되어 생체 고분자가 투과성 혈관 벽을 통해 누출될 수 있습니다.후속 재가열은 종양 내에 생체 중합체를 가두기 위해 재응집을 유발합니다.마취액과 봉합사를 추가하여 절개 부위를 봉합합니다.종양 세포는 응집체를 엔도사이토시하여 세포질로 탈출하여 c-myc를 억제하여 세포 주기 진행을 억제하고 종양 증식을 억제합니다.

형질전환 초파리를 예로 들어 보겠습니다.초파리의 뇌는 인간 아밀로이드 펩타이드 단백질 또는 APP와 절단 효소를 발현합니다.효소는 APP를 절단하여 베타-아밀로이드 플라크의 형성을 가능하게 하며, 이는 초파리의 알츠하이머병 또는 AD 병리를 유발합니다.초파리 AD 모델에 신바이오틱스 제형이 포함된 식단을 먹입니다.이 제형에는 세 가지 생리 활성 프로바이오틱 박테리아와 프리바이오틱스의 조합이 포함되어 있습니다.파리의 장 내부에서 프리바이오틱스는 프로바이오틱스의 성장과 생존을 지원합니다.프로바이오틱스는 장-뇌 축으로 알려진 경로를 통해 숙주 뇌와 통신하는 대사산물과 매개체를 생성합니다.숙주 세포 내에서 이러한 부산물은 여러 생물학적 과정을 조절하는 전사 인자를 활성화하여 GBA를 통해 AD 증상에 영향을 미칠 수 있습니다.생존율, 운동성 및 베타-아밀로이드 축적과 같은 다양한 분석을 사용하여 신바이오틱 제형이 AD 병리학에 미치는 영향을 평가합니다.

뇌 조직으로의 혈류를 일시적으로 차단하는 수술인 중대뇌동맥 폐색을 받은 쥐부터 시작하십시오.이것은 허혈성 뇌졸중을 유발하여 뇌 조직 손상을 초래합니다.다음으로 막힌 부분을 제거하여 혈류를 회복합니다.연구 관련성을 보장하기 위해 신경학적 결손을 보이는 쥐를 선택합니다.그런 다음 실험군에는 시험약을 투여하고 다른 그룹에는 식염수를 주입합니다.약물과 식염수 투여를 반복합니다.시험 약물은 혈관신생을 촉진하여 새로운 혈관을 형성합니다.이는 손상된 뇌 조직으로의 혈액 공급을 향상시키고 뇌졸중 영향을 줄입니다.다음으로 쥐를 마취하고 온열 담요를 사용하여 체온을 유지합니다.며칠 후 두 그룹 모두에 대해 MRI 스캔을 수행합니다.MRI 이미지에서 식염수 주입 그룹의 더 밝은 영역은 뇌졸중 영향 부위를 나타냅니다.한편, 실험군의 밝기 감소는 약물 유발 혈관신생을 시사한다.

출처: Slezia, A. et al. 간질 초점에 γ-아미노부티르산(GABA)을 전기영동으로 전달하면 생쥐의 발작을 예방할 수 있습니다. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 마취된 마우스에서 발작 활성을 억제하기 위한 감마-아미노부티르산(GABA)의 전기영동 전달을 보여줍니다. 치료 효능을 평가하기 위해 프로브 이식, 신경 활동 기록, 발작 유도 및 미세유체 이온 펌프를 통한 제어된 GABA 전달과 관련된 단계를 간략하게 설명합니다.

출처: Chen, Y., et al. 쥐 중추신경계에서 안티센스 올리고뉴클레오티드의 척수강내 전달. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 쥐 모델의 요추 척추에 이식된 카테터를 통해 테스트 화합물을 뇌척수액(CSF)으로 전달하는 방법을 보여줍니다. 이 화합물은 CSF를 따라 뇌와 척수로 순환하고 뉴런으로 들어가 치료 가능성을 제공합니다.

출처: Leda, AR, et al. 내경동맥을 통해 CNS로 표적 물질을 전달하기 위한 마우스 미세수술 주입 기술. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 내경동맥(ICA)을 통해 테스트 물질을 뇌에 표적으로 주입하는 것을 용이하게 하도록 설계된 미세 수술 절차를 보여줍니다. 이 절차에는 혈류를 일시적으로 제한하여 제어된 전달을 보장하기 위한 정밀한 봉합과 혈관 조작이 포함됩니다. 모세혈관이 외경동맥(ECA)에 삽입되어 분기점을 향해 전진합니다. 주입 시 이 물질은 전신 순환을 우회하고 혈액-뇌 장벽을 통과하여 뇌 실질로의 표적 전달을 달성합니다.

출처: Kanazawa, T., et al. 코에서 뇌로 약물 전달을 평가하기 위한 흡입 마취 하에 비강내 투여를 위한 새로운 방법. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 코에서 뇌로 약물 전달을 달성하기 위해 마취된 마우스에 방사성 표지 약물을 비강내 투여하는 방법을 보여줍니다. 약물이 비강 상피를 통과하고 신경 경로를 통해 뇌에 도달하는 방법과 모양체 운동이 약물 보유 및 제거에 어떤 영향을 미치는지 설명합니다. 또한 비디오에서는 식도를 통해 캐뉼라를 삽입하여 모양체 운동에 반대하여 약물을 전달하고 유지력을 높이고 수송 효율성을 향상시키는 대체 역 캐뉼라 삽입 방법에 대해 설명합니다.

출처: Wang, X. et. al., 중추신경계에 대한 생체 내 재수초화 연구를 위한 삼투압 펌프 기반 약물 전달. J. Vis. 경험. (2021년)이 비디오는 탈수초화된 마우스 모델에서 삼투압 펌프를 사용하여 신경 치료 약물을 전달하는 방법을 보여줍니다. 제어된 약물 방출은 뇌량에서 미엘린 생성 세포를 활성화하여 재수초화를 촉진합니다.

출처: Paolone, G., et al. 설치류 뇌의 미세 주사를 위한 맞춤형 바늘. J. Vis. 경험. (2018).이 비디오는 구멍이 있는 석영 마이크로니들을 사용하여 설치류 뇌 마이크로니들 주사를 보여줍니다. 마이크로니들은 분사 속도를 제어하기 위해 주사기와 마이크로펌프에 부착됩니다. 주사액이 담긴 바늘을 전달 속도를 낮게 설정한 상태에서 뇌에 삽입합니다. 일단 배치되면 배송 속도가 빨라집니다. 잠시 멈춘 후 바늘을 빼냅니다.

출처: Akil, O., et al., 둥근 창막을 통해 마우스 내이에 바이러스 매개 유전자 전달을 위한 수술 방법. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오는 유전적 난청이 있는 쥐 강아지의 내이에 치료 유전자를 전달하는 절차를 보여줍니다. 아데노 관련 바이러스(AAV) 벡터를 사용하여 유전자를 둥근 창막을 통해 주입하여 바이러스 입자가 유모 세포에 들어가 글루타메이트 수송체 생성을 회복하고 뇌에 대한 소리 신호를 재설정할 수 있도록 합니다.

출처: Yavuz, B., et al. 엑소좀 기반 도파민 운반체 시스템 공식화 및 특성화. J. Vis. 경험. (2022년)이 비디오는 엑소좀 내에서 도파민 캡슐화를 향상시키기 위해 사포닌 유도 막 투과화에 초점을 맞춘 도파민 로드 엑소좀의 제형을 보여줍니다.

출처: Zeynalov, E. et. al., 지속적인 IV 주입은 뇌졸중 유발 뇌 부종을 연구하기 위한 마우스의 아르기닌-바소프레신 수용체 차단제 Conivaptan에 대한 선택 치료 경로입니다. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 마우스 모델에서 아르기닌-바소프레신(AVP) 수용체 길항제의 정맥 전달을 보여줍니다. 일시적인 중대뇌동맥 폐색은 뇌부종을 유발합니다. AVP 수용체 길항제는 좌경정맥의 카테터를 통해 투여되어 부종을 완화합니다.

출처: Martinez, E., et al. 설치류의 두개내 약물 요법 및 통증 분석. J. Vis. 경험. (2019).이 비디오는 전두엽 피질에 사전 이식된 가이드 캐뉼라를 사용하여 마취된 쥐에서 진통제를 두개내 투여하는 방법을 보여줍니다. 추가 진통제를 복강 내 병용 투여합니다. 회복 후, 쥐의 열 통증 반응은 투여된 약물의 진통 효과를 평가하기 위해 발 철수 잠복기를 측정하는 Hargreave 장치를 사용하여 평가됩니다.

출처: Vanegas, M. I., et al. 약물 주입 및 전기생리학을 결합하기 위한 Microinjectrode 시스템. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 정확한 부피 추적을 위해 유성 마커 용액을 사용하고 신경 기록 및 약물 주입을 동시에 가능하게 하는 모세관을 통해 약물 용액을 전달하는 미세 전극 기반 미세유체 장치를 보여줍니다.

출처: Mohan, R., et al. 운동 종판을 따라 근육 주사: 추적자를 운동 뉴런으로 직접 셔틀하는 최소 침습적 접근 방식. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오는 모터 종판(MEP)에서 근육 주사를 통해 형광 뉴런 추적자를 운동 뉴런으로 표적으로 전달하는 방법을 보여줍니다. 쥐를 준비하고, 추적자를 주입하고, 신경 치료 잠재력에 대해 표지된 운동 뉴런을 평가하는 것과 관련된 단계를 간략하게 설명합니다.

출처: Parikh, S., et al. 경공막 후방 접근법을 통해 망막하 공간에 접근하기 위한 대안적이고 검증된 주사 방법. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 형광 염료를 마우스의 망막하 공간으로 전달하는 절차를 보여줍니다. 이 과정에는 마우스를 마취하고, 눈을 준비하고, 망막하 공간에 접근하기 위해 정밀한 절개를 하고, 염료를 주입하여 제어된 망막 박리를 만드는 과정이 포함됩니다. 이 기술을 사용하면 염료를 표적으로 전달할 수 있어 망막 구조의 상세한 이미징 및 분석이 가능합니다.

출처: Zhu, J., et. al., 신경 성장 인자 캡슐화를 위한 새로운 HDL 모방 나노입자의 준비 및 특성화. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 잠재적인 신경 영양 전달 응용 분야를 위해 프로타민 보조 캡슐화 및 지질 기반 자가 조립을 사용하여 NGF 로딩 HDL 모방 나노입자의 단계적 조립을 보여줍니다.

출처: Fukushima, A., et al. 생쥐의 Resiniferatoxin을 사용한 뇌실내 치료 및 통증 검사. J. Vis. 경험. (2020년)이 비디오는 뇌의 TRPV1 수용체를 탈감작화하기 위해 마우스에 레시니페라톡신을 뇌실내 주사하는 절차를 보여줍니다.

출처: Zheng, Y., et al. 뇌허혈에 대한 산성 사후 조절의 신경 보호를 연구하기 위한 실험 모델. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 중대뇌동맥폐색(MCAO)의 마우스 모델에서 허혈성 손상에 대한 신경 보호 효과를 평가하기 위해 산성 사후 컨디셔닝(APC)의 적용을 보여줍니다. MCAO 모델에서 재관류와 관련된 단계와 흥분 독성, 산화 스트레스 및 신경 사멸을 완화하기 위한 재관류 중 APC의 적용을 간략하게 설명합니다.

출처: Lee, SE, et al. 일시적인 중대뇌동맥 폐색 마우스 모델을 사용하여 Glycyrrhizae Radix et Rhizoma 추출물의 신경 보호 효과 평가. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 중대뇌동맥 폐색 마우스 모델에서 테스트 화합물의 신경 보호 효과를 평가하는 절차를 보여줍니다. 이 화합물은 뇌에 들어가 신경 사멸을 예방하고 경색 부피를 줄여 치료되지 않은 마우스에 비해 신경 보호 효과를 확인합니다.

출처: Andreatta, RD et. al., 삼투압 펌프 또는 직접 근육 주사를 사용한 피하 뉴로트로핀 4 주입은 노화된 쥐 후두 근육을 향상시킵니다. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 노화 관련 신경차단 및 신경근 접합부 감소에 의해 영향을 받는 후두 근육 기능을 회복하기 위해 노령 쥐 모델에 뉴로트로핀 4(NTF4) 주입을 보여줍니다. NTF4는 신경 재생을 유발하고 신경근 접합부 형성을 촉진하여 후두 기능 장애에 대한 치료 가능성을 강조합니다.

출처: Liou, C. et al. 자유롭게 움직이는 마우스에서 장 유래 미생물 대사 산물의 뇌실내 전달. J. Vis. 경험. (2022).이 비디오는 뇌 매개 행동에 미치는 영향을 연구하기 위해 자유롭게 움직이는 마우스에 단쇄 지방산(SCFA)을 두개내 주사하는 방법을 보여줍니다. 인젝터 캐뉼라를 마우스 뇌에 이식된 가이드 캐뉼라에 삽입합니다. 회복 후 마우스는 새로운 새장에 적응합니다. 그런 다음 SCFA를 투여하고 운동 행동을 기록합니다.

출처: Joshi, K., et al. 생쥐의 Cisterna magna를 통해 꼬리 뇌간과 상부 경추 척수에 미세 주입하기 위한 정위 수술 접근법. J. Vis. 경험. (2022년)이 비디오는 뇌간과 상부 척수로의 표적 전달을 위한 수조 마그나 정위 접근법을 보여줍니다. 뇌척수액으로 채워진 수조 마그나에 접근함으로써 이 접근법은 표준 정위 고정 방법을 사용하여 도달하기 어려운 부위에 정밀하게 주사할 수 있습니다.

출처: Poland, R. et al. 동기 부여된 행동의 분자 기질을 연구하기 위한 설치류 뇌 미세 주사. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오에서는 주사기와 마이크로인젝터 튜브로 구성된 물로 채워진 미세 주입 설정이 정확한 약물 전달을 위해 사용됩니다. 사전 이식된 가이드 캐뉼라가 있는 쥐는 표적 뇌 미세 주사를 받아 조직 손상을 최소화하면서 깨어 있는 동물에게 치료제를 정확하게 투여할 수 있습니다.

출처: Silva, C. et al. 테트로도톡신 미세주사에 의한 가역적 불활성화를 통한 배란 조절에서 쥐 뇌의 개별 영역의 역할을 밝히는 것. J. Vis. 경험. (2020년)이 비디오는 신경 활동을 일시적으로 억제하고 성선 자극 호르몬 방출 호르몬 분비를 억제하며 배란을 예방하기 위해 자유롭게 움직이는 쥐의 시상하부에 테트로도톡신(TTX)을 미세 주입하는 프로토콜을 보여줍니다.

출처: Rosenberg, M., et al. 신경 성장 인자의 운반체로서 다공성 실리콘 필름 설계. J. Vis. 경험. (2019).이 비디오는 PC12 세포 분화를 지원하기 위해 신경 성장 인자(NGF)의 지속 방출을 위해 분해성 나노 구조 다공성 실리콘(PSi) 필름을 사용하는 방법을 보여줍니다. NGF는 정전기 상호 작용을 통해 필름의 기공에 흡착되고 확산 및 스캐폴드 분해에 의해 점차적으로 매체로 방출됩니다. 이러한 제어된 전달은 PC12 세포 생존을 촉진하고 장기간에 걸쳐 신경돌기 성장과 분지를 촉진합니다.

출처: Zhan, J., et al. DREADD로 제어되는 신경 활동의 만성 조작을 위한 비침습적 전략. J. Vis. Exp. (2019) 이 비디오는 표적 신경 조절을 위한 비침습적 안과 약물 전달 방법을 보여줍니다. 약물은 점안액을 통해 전달되어 순환계로 흡수되어 혈액뇌 장벽을 통과하고 특정 신경 수용체를 활성화합니다.

출처: Zamboni, M., et al., induction of leptomeningeal cells modification by cisternal injection. J. Vis. 경험. (2020년)이 비디오는 마취된 마우스의 수조에 유도 약물을 전달하는 절차를 보여줍니다. 주사는 형광 영상으로 확인된 뇌척수액을 통해 접근할 수 있는 뇌 표면 세포에서 형광 마커 발현을 선택적으로 유도합니다.

출처: Wilson, KL, et al. 뇌졸중 후 뇌에 하이드로겔 생체 재료 스캐폴드 주입. J. Vis. 경험. (2020년)이 비디오는 뇌졸중 후 마우스의 뇌졸중 코어에 하이드로겔을 정위 주입하는 방법을 보여주며, 세포외 기질을 모방하고 세포 침윤을 촉진하며 혈관신생을 지원하는 스캐폴드 형성에서의 역할을 강조하여 뇌졸중 회복에 있어 신경치료 잠재력을 강조합니다.

출처: Xavier, ALR, et al. 설치류의 수조 마그나에 캐뉼라 이식. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 마취된 마우스의 수조에 캐뉼라를 이식하는 절차를 보여줍니다. 이 기술은 바늘에 장착된 캐뉼라를 경막을 통해 거꾸로 된 삼각형 수조 대나로 안내하고 뇌척수액으로 표적으로 전달하기 위해 고정하는 것입니다.

출처: Unger, M. D., et al., 돼지의 요추 등근 신경절 접근 및 주사를 위한 추궁 절개술. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 대류 강화 전달을 사용하여 표적 신경 치료 전달을 위해 요추 후근 신경절에 접근하기 위해 마취된 돼지의 추궁 절개술 절차를 보여줍니다.

출처: Mess, G., et al. 휴대용 벤치탑 집속 초음파 시스템을 사용한 마우스 모델에서 다형성 교모세포종 치료를 위한 초음파역동학 요법. J. Vis. 경험. (2023년)이 비디오는 자기 공명 유도 집속 초음파(MRgFUS)를 사용하여 마우스 모델에서 뇌종양에 초음파역학 치료를 수행하기 위한 프로토콜을 보여줍니다. 치료 전에 초음파 감작제 전구체를 투여하여 종양 세포에 축적되고 집속 초음파에 의해 활성화되어 활성 산소종(ROS)을 생성합니다. 이러한 ROS는 산화 스트레스를 유도하여 종양 세포 사멸과 증식 감소를 초래합니다.

출처: Kim, BD, et al. 다형 교모세포종 동물 모델에서 올리고뉴클레오티드 페이로드의 나노입자 전달. J. Vis. 경험. (2024년)이 비디오는 교모세포종 보유 마우스에 치료용 나노입자를 정맥 주사하는 방법을 보여줍니다. 이 방법은 혈액-뇌 장벽을 가로질러 표적 전달을 가능하게 하고 뇌종양에서 나노입자 생체분포 및 치료 효능을 평가하기 위한 비침습적 이미징을 지원합니다.

감마 요법 자극 장치를 착용한 알츠하이머병 진단을 받은 환자부터 시작하십시오.이 장치는 아이셋과 헤드폰으로 구성됩니다.컨트롤러를 사용하여 장치를 활성화하여 청각 및 시각적 자극을 전달합니다.시각 구성 요소는 감마 주파수에서 깜박이는 빛을 방출하는 반면, 청각 구성 요소는 동기화된 사운드 펄스를 생성합니다.감마 진동은 동기화된 신경 발화에 의해 생성되는 뇌파로, 인지와 기억에 중요합니다.알츠하이머병에서는 이러한 진동이 중단되어 인지 저하로 이어집니다.감각 유발 감마 진동은 자극성 피라미드 뉴런을 간헐적으로 억제하여 동기화된 발화를 촉진하는 중간 뉴런을 활성화합니다.이러한 동기화는 기억 유지에 필수적인 시냅스 후 말단에서 흥분성 AMPA 수용체 밀도를 증가시켜 시냅스 연결을 강화합니다.자극은 또한 대뇌 혈류를 향상시켜 산소와 영양분 공급을 개선하여 더 나은 인지 기능을 지원합니다.또한 자극은 미세아교세포와 성상세포를 활성화하여 아밀로이드-베타 제거를 돕고 이를 통해 AD 진행을...

뇌 피질에 국소 허혈성 뇌졸중이 있어 BBB 손상, 혈류 감소 및 과도한 신경 활동이 발생하는 쥐를 예로 들어 보겠습니다.뇌졸중은 또한 성상세포 활성화를 유도하여 전염증성 사이토카인을 방출하는 신경독성 성상세포의 형성을 유도합니다.이것은 신경염증을 유발하여 신경 및 내피 세포 변성을 유발합니다.쥐를 구속하고 rTMS 코일을 허혈 부위 위에 배치합니다.며칠 동안 세타 버스트 rTMS를 투여합니다.전자기 펄스는 두개골을 관통하여 허혈 부위에 도달하고 중간 뉴런을 자극하여 억제성 신경 전달 물질을 방출합니다.이러한 신경전달물질은 과민성 뉴런의 수용체를 활성화하여 염화물 유입을 유도하여 과도한 신경 활동을 억제하고 신경 사멸을 감소시킵니다.또한 펄스는 신경독성 성상세포를 항염증 인자를 방출하여 BBB 무결성을 회복하는 신경 보호 표현형으로 전환합니다.rTMS는 또한 BBB의 내피 세포를 자극하여 성장 인자를 분비하여 혈관 형성을 촉진하고 뇌 혈류를 회복시킵니다.

신경 전달 물질 수용체인 mGluR5의 다운스트림 신호 전달이 중단된 유전자 변형(GM) 마우스로 시작합니다.일반 마우스의 해마에서 mGluR5는 기존 시냅스에서 빠르게 작용하는 흥분성 수용체의 엔도사이토시스를 조절하여 약화시킵니다.내재화된 수용체는 새로 형성된 시냅스로 재활용되어 기억 형성을 위해 강화됩니다.GM 마우스에서 손상된 mGluR5 신호 전달은 수용체 재분포를 감소시켜 새로운 기억 형성을 방해합니다.새로운 환경 단서가 있는 챔버에 마우스를 노출시키고 동결 행동을 기록하여 공포 반응을 측정합니다.재노출 시 동결 행동이 감소하면 이전 노출에 대한 기억력이 좋지 않음을 나타냅니다.낯선 쥐를 피험자에게 소개합니다. GM 마우스의 낮은 사회적 상호 작용은 낯선 것을 인식하는 능력이 감소했음을 나타냅니다.mGluR5에 결합하고 수용체 재분포를 강화하여 새로운 시냅스 연결을 강화하는 알로스테릭 조절제를 복강 내 주입합니다.행동 테스트를 반복합니다. 동결 행동과 사회적 상호 작용의...

출처: Jang, S., et al, 쥐의 전기 경련 발작 및 시냅스 후 밀도 단백질의 발작 유발 변화를 조사하기 위한 해마의 분할. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 발작 유발 신경가소성을 연구하기 위해 쥐 모델에서 급성 전기 경련 발작(ECS)의 유도를 보여줍니다. 연구원들은 이어 클립 전극을 통해 전기 자극을 가하여 신경 과흥분성과 간대를 유발합니다. 이 모델은 시냅스 가소성, 발작 메커니즘 및 전기 경련 요법(ECT) 관련 치료 효과를 조사하는 데 도움이 됩니다.

출처: Sellers, K. K. et al. 주요 우울 장애의 바이오마커 중심의 맞춤형 치료를 위한 폐쇄 루프 신경자극. J. Vis. 경험. (2023년)이 비디오는 주요 우울 장애 치료를 위한 환자별 바이오마커 검출 및 신경자극 전달을 지원하기 위한 시스템 설정 및 데이터 기록 절차를 보여줍니다.

출처: Fritsch, B. et al. 경계심 설치류의 경두개 전기 뇌 자극. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 전극 이식과 경두개 전기 자극(tES)을 경계하는 쥐의 운동 피질에 적용하는 방법을 보여줍니다. 이는 전극 배치, 자극 전달, 그에 따른 신경 및 미세아교세포 활성화와 관련된 단계를 간략하게 설명하고 신경 치료 잠재력을 강조합니다.

출처: Beom, J., et al. 쥐 뇌의 편측 반구에 대한 반복적인 경두개 자기 자극. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 피질 흥분성을 조절하기 위해 마취된 쥐에서 반복적 경두개 자기 자극(rTMS)을 적용하는 방법을 보여줍니다. 이 절차에는 기본 자극을 설정하기 위해 운동 역치(MT)를 결정한 다음 MT 이상의 강도로 rTMS를 적용하여 신경 탈분극을 유도하는 것이 포함됩니다. 이 자극은 칼슘 유입을 유발하고 신경영양 인자 생성을 촉진하며 시냅스 가소성을 향상시켜 궁극적으로 피질 흥분성에 영향을 미칩니다.

출처: Shafi, M. M., et al. 간질 환자의 연결성 관련 뇌 흥분성을 평가하는 다중 모드 이미징 및 자극 기반 방법. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 간질 환자의 신경 흥분성을 평가하기 위해 경두개 자기 자극(TMS) 및 뇌파 검사(EEG)를 사용하는 절차를 보여줍니다. 사전 기록된 뇌 스캔으로 환자의 머리를 정렬하고, 기능적으로 연결된 피질 표적 위에 TMS 코일을 배치하고, 자극을 가하여 신경 회로를 활성화하는 단계를 자세히 설명합니다. 이 과정에는 운동 반응 추적, EEG 신호 기록, 뇌 활동을 건강한 대조군의 뇌 활동과 비교하여 과흥분성을 식별하고 발작 발병 영역을 국소화하는 것이 포함됩니다.

출처: Badran, BW, et al. 경피적 귀 미주 신경 자극(taVNS)의 실험실 관리: 기술, 표적 지정 및 고려 사항. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 뇌 활동을 조절하는 비침습적 방법인 경피적 귀 미주 신경 자극(taVNS)을 보여줍니다. 전극은 미주 신경(ABVN)의 귓바퀴 가지를 표적으로 하는 외이도와 이주의 전벽에 배치됩니다. 자극을 받으면 생성된 신경 자극이 뇌간으로 이동하여 여러 뇌 영역과 그 기능에 영향을...

출처: Dunlop, K., et al. 치료 저항성 주요 우울 장애 치료제로서의 MRI 유도 dmPFC-rTMS. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오는 우울증을 치료하기 위해 배내측 전두엽 피질(dmPFC)을 표적으로 하는 MRI 유도 반복 경두개 자기 자극(rTMS) 절차를 보여줍니다.

출처: Rich, MT, et al. 광유전학을 사용하여 신경가소성을 역전시키고 쥐의 코카인 탐색을 억제합니다. J. Vis. 경험. (2021년)이 비디오는 광유전학을 사용하여 내측 슬상 핵에서 외측 편도체(MGN-LA) 시냅스에 장기 우울증(LTD)을 유도하여 쥐 모델에서 단서 유발 마약 추구 행동을 약화시키는 방법을 보여줍니다. 외과적으로 광섬유를 이식하고 빛에 민감한 이온 채널을 발현하기 위해 바이러스 형질도입된 쥐는 저주파 광펄스로 광유전학적 자극을 받아 신경 전달 물질 방출과 시냅스 약화를 유발합니다. 이 과정은 신경 전달 물질 수용체 내재화를 통해 MGN-LA 시냅스 전달을 감소시켜 궁극적으로 단서와 약물 추구 행동 사이의 연관성을 방해합니다.

출처: Jakobs, M., et al. 난치성 안면 통증에 대한 피하 삼차신경장 자극. J. Vis. 경험. (2017년)이 절차는 신경병성 안면 통증을 치료하기 위한 삼차 신경 자극을 위한 피하 전극 이식을 보여줍니다. 전극은 영향을 받은 안면 부위에서 쇄골하 주머니로 피하로 터널링되어 내부 펄스 발생기(IPG)에 연결됩니다. IPG는 전기 자극을 전달하여 기계 수용체 섬유를 활성화하고, 이는 차례로 척수의 억제성 중간 뉴런을 자극하여 뇌로의 통증 전달을 감소시킵니다.

출처: Stefanou, M., et.al. 실시간 뇌파 검사 트리거 경두개 자기 자극을 통한 뇌 상태 의존적 뇌 자극. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 피질 흥분성을 연구하기 위한 실시간 EEG 트리거 경두개 자기 자극(TMS) 과정을 보여줍니다. 이 절차에는 운동 피질 위에 TMS 코일을 배치하고, 자극을 EEG 신호의 특정 단계와 동기화하고, 다양한 뇌 상태가 피질 반응에 미치는 영향을 탐색하기 위해 운동 유발 전위(MEP)를 기록하는 작업이 포함됩니다. 이 기술을 사용하면 실시간 EEG 분석을 기반으로 뇌 활동을 정밀하게 조절할 수 있습니다.

출처: Holbrook, C., et al. 이데올로기적 위협 반응을 실험적으로 줄이기 위해 후내측 전두엽 피질의 지속적인 세타 버스트 자극. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 이데올로기적 위협에 대한 반응을 조절하기 위해 연속 세타 버스트 자극(cTBS)을 적용하는 방법을 보여줍니다. 근전도(EMG) 전극은 운동 신호를 기록하고 자기 코일은 일차 운동 피질을 자극하여 능동 운동 역치(aMT)를 결정합니다. 그런 다음 코일은 표적 자극을 위해 후방 내측 전두엽 피질(pMFC) 위에 재배치됩니다. 연장된 cTBS는 흥분 신호를 감소시키고 pMFC 억제를 강화하여 이데올로기적 위협에 대한 반응성을 일시적으로 감소시킵니다.

출처: Pope, PA 소뇌의 경두개 직류 자극을 사용하여 인지 조절. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오는 소뇌의 신경 활동을 조절하여 인지 기능에 대한 음극 tDCS의 효과를 보여줍니다. tDCS 관리, 인지 작업 수행, 작업 기억에 미치는 영향 분석 단계를 간략하게 설명합니다.

출처: Shirozu, K., et al. 전기경련 요법에 의한 효과적인 발작 유도 평가로서의 동공 반응. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 인간 환자에게 전기 경련 요법을 수행하는 절차를 보여주고, 자극 과정을 강조하고, 동공 반응을 통해 발작 활동을 평가합니다.

출처: Curado, M. et. al., 인간 운동 기능 조절을 위한 비침습적 전기 뇌 자극 몽타주. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 인간의 운동 기능을 조절하기 위한 경두개 직류 자극(tDCS)의 설정 및 메커니즘을 보여줍니다. 양극을 일차 운동 피질 위에 배치하고 음극을 반대쪽 안와상 영역 위에 배치함으로써 표적 전기 자극은 피질 흥분성을 증가시켜 운동 뉴런 활동을 향상시키며 운동 성능을 향상시킵니다.

출처: Shaw, MT et al. 원격 감독 경두개 직류 자극: 안전성 및 내약성에 대한 업데이트. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 인지 향상을 위해 경두개 직류 자극(tDCS)을 자가 투여하는 과정을 보여줍니다. 전극 배치, 자극 설정, 내약성 평가 및 tDCS에 의해 유도된 신경가소성 효과에 대한 단계를 간략하게 설명합니다.

출처: Fehér, K. D. et. al., 경두개 교류 자극(tACS) 중 동시 뇌파 기록. J. Vis. 경험. (2016년)이 비디오는 뇌 활동을 기록하면서 리드미컬한 전기 신호를 뇌에 전달하기 위한 동시 경두개 교류 자극(tACS) 및 뇌파 검사(EEG) 실험의 설정을 보여줍니다. 이 절차는 전극 분리를 보장하고 정확한 자극과 깨끗한 EEG 신호를 위해 겔 브리징을 방지합니다.

출처: Tendler, A., et al. 우울증 이외의 상태에 H1 심부 경두개 자기 자극 코일을 사용하는 방법. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 외상 후 스트레스 장애(PTSD)의 증상을 완화하기 위해 심부 경두개 자기 자극(dTMS)을 사용하는 방법을 보여줍니다. 이는 편도체의 과잉 활성화와 공포 반응 증가에 기여하는 핵심 요인으로 내측 전두엽 피질(mPFC)의 활동 감소를 식별하는 것으로 시작됩니다. mPFC에 표적 자기 펄스를 적용함으로써 이 절차는 편도체에 대한 억제 제어를 회복하여 공포 반응을 줄이고 PTSD 증상을 완화하는 데 도움이 됩니다.

출처: Chen, W., et al. 고화질 경두개 직류 자극이 있는 3D 디지타이저를 사용한 자극 위치 결정. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 10-10 시스템을 사용하여 전극을 정확하게 배치하고, 3D 디지타이저로 전극의 위치를 매핑하고, 자극을 적용하여 표적 뇌 영역의 신경 활동을 조절함으로써 고화질 경두개 직류 자극(HD-tDCS)을 전달하는 절차를 보여줍니다.

출처: Lioumis, P. et al. 배외측 전두엽 피질의 경두개 자기 자극과 뇌파 검사의 결합. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 경두개 자기 자극과 뇌파 검사를 결합하여 배외측 전두엽 피질의 피질 흥분성과 흥분과 억제 사이의 균형을 평가하는 프로토콜을 보여줍니다.

뉴런과 희소돌기아교세포의 비접촉식 공동 배양으로 시작하십시오.투과성 막은 트랜스웰 삽입물의 뉴런을 하단 웰의 핍돌기아교세포와 분리합니다.삽입물에 칼륨을 첨가하여 세포외 칼륨 수치를 높여 세포내 칼륨의 유출을 억제합니다.칼륨 축적은 뉴런을 탈분극시켜 전압 개폐 칼슘 채널의 개방을 촉발하고 칼슘 유입을 허용합니다.유입은 흥분성 신경 전달 물질의 방출을 자극하며, 이 신경 전달 물질은 투과성 막을 가로질러 확산되어 바닥에 잘 도달하고 희소돌기아교세포의 수용체를 활성화하여 칼슘 유입을 유도합니다.칼슘의 증가는 초기 엔도좀에서 막의 안쪽 발아를 유도하는 신호 전달 경로를 활성화합니다.발아는 다소포체 또는 MVB 내부의 엑소좀이라고 하는 소포 내의 세포질 단백질과 RNA를 둘러싸고 있습니다.MVB는 희소돌기아교세포 원형질막과 융합하여 엑소좀을 세포외 환경으로 방출합니다.분비된 엑소좀은 이제 세포간 통신을 평가할 준비가 되었습니다.

출처: Shahror, RA et. al., 외상성 뇌손상 쥐 모델에서 비강내 전달 후 MRI를 사용하여 초상자성 산화철 표지 중간엽 줄기 세포 추적. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오는 마우스 모델에서 비강내 중간엽 줄기 세포(MSC) 전달을 보여줍니다. 중간엽 줄기세포는 비강 조직에 흡수되어 사이토카인 신호를 통해 뇌로 이동하며 손상 부위에서 신경영양 인자를 분비하여 신경 복구를 위한 신경 치료 가능성을 제공합니다.

출처: Quattrocolo, G., et al. 출생 후 초기 마우스 뇌에 Interneuron 전구체의 동시성 이식. J. Vis. 경험. (2018년)이 비디오는 동소성 또는 이소성 접근법을 사용하여 중간 뉴런 전구체 세포를 신생아 마우스 뇌에 이식하는 방법을 보여줍니다. 이 절차에는 마취된 수혜자 강아지를 고정하고, 표적 뇌 영역을 식별하고, 동일한 발달 단계에서 기증자 강아지에서 유래한 전구체 세포 현탁액을 주입하는 과정이 포함됩니다. 주사 후 새끼는 회복을 위해 온열 패드로 옮겨져 기증자 세포 생존 및 성숙에 대한 후속 평가가 가능합니다.

출처: Parajuli, B., et.al. 비침습적 경비강 경로를 통한 면역 적격 마우스 뇌에 인간 유도 만능 줄기 세포 유래 미세아교세포의 이식. J. Vis. 경험. (2022).이 비디오는 유도 만능 줄기 세포 유래 인간 미세아교세포(iPSMG) 세포를 마우스 뇌로 경비강 이식하는 방법을 보여줍니다. 히알루로니다아제는 미세아교세포가 고갈된 마우스의 콧구멍에 적용되어 투과성을 향상시킵니다. iPSMG 현탁액을 비강 내로 투여하고 마우스를 회복시킵니다. 성장 인자가 풍부한 배지는 뇌 조직에서 iPSMG 생존을 지원하기 위해 정기적으로 투여됩니다.

출처: Gonzalez-Ramos, A., et. al., 신경 발달 장애를 완화하기 위해 인간 줄기 세포 유래 GABA성 뉴런을 출생 후 초기 마우스 해마로 이식. J. Vis. 경험. (2022년)이 비디오는 흥분-억제 균형을 회복하는 것을 목표로 억제성 중간 뉴런이 감소된 유전자 변형 쥐 새끼의 해마에 인간 유래 중간 뉴런 전구체 세포를 정위 주입하는 방법을 보여줍니다.

출처: Struzyna, LA 외, 신경계 재건, 변조 및 모델링을 위한 해부학적으로 영감을 받은 3차원 미세 조직 공학 신경망. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 세포외 기질 코어가 있는 하이드로겔 마이크로 컬럼을 사용하여 미세 조직 공학 신경망의 개발을 보여줍니다. 시드된 신경 응집체는 부착하고, 투영을 확장하며, 구조화된 신경망을 형성하여 신경 발달 및 신경치료 연구의 발전에 기여합니다.

출처: Sharma, AD, et.al. 신경 보호 전략을 위한 치료 인자 전달을 위해 조작된 성체 줄기 세포의 고처리량 특성화. J. Vis. 경험. (2015년)이 비디오는 치료용 신경영양 인자를 발현하도록 조작된 형질전환 중간엽 줄기세포를 특성화하는 과정을 보여줍니다. 세포 증식 마커를 표적으로 하는 1차 및 2차 항체로 세포를 고정, 투과화 및 염색한 다음 핵에서 형광 신호를 포착하기 위해 고함량 스크리닝 시스템을 사용하여 분석하는 단계를 간략하게 설명합니다. 증식 마커 발현 증가는 신경 치료 응용에 대한 형질전환 세포의 적합성을 확인합니다.

출처: Zimmermann, S., et.al. 증상이 있는 말단 신경종의 치료를 위한 간질 혈관 분획이 풍부한 지방 이식. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 증상이 있는 신경종의 관리에서 신경용해 및 간질 혈관 분획(SVF) 농축 지방 이식을 위한 수술 절차를 보여줍니다. 신경용해술은 유착 조직을 제거하여 신경 활공을 회복하고, SVF가 풍부한 지방 이식술은 신경 주위에 적용되어 보호 장벽을 만들고 신경 치유를 지원하며 이식편 수명을 향상시킵니다.

출처: Lee, Y., et.al. 절개된 쥐 척수 그루터기를 연결하기 위해 절개된 쥐 척수 그루터기를 연결하기 위해 PVDF-TrFE 도관 내부에 슈완 세포를 이식하여 간격을 가로질러 축삭 재생을 촉진합니다. J. Vis. 경험. (2017년)이 비디오는 절개된 쥐 척수에서 축삭 재생을 촉진하기 위해 Schwann 세포로 파종된 압전 고분자 도관의 사용을 보여줍니다. 도관은 구조적 안내를 제공하는 반면, 생체전기적 특성은 신경돌기 성장을 자극합니다. 도관 내의 슈완 세포는 신경영양 인자를 분비하여 주둥이와 꼬리 그루터기 사이의 축삭 가교를 지원합니다.

출처: Palma-Tortosa, S., et.al. 인간 줄기 세포 이식 및 검증을 위한 생체 외 모델로서 성인 인간 피질의 기관형 배양. J. Vis. 경험. (2022년)이 비디오는 줄기 세포 유래 신경 전구 세포를 인간 피질 조직 절편으로 이식하는 방법을 보여줍니다. 이 절차에는 기저막 기질에서 전구 세포를 분리하고 재현탁한 다음 트랜스웰 어셈블리에 배치된 피질 절편에 주입하는 작업이 포함됩니다. 기질 응고 및 신경 분화를 허용하기 위해 배양한 후 이식된 조직은 추가 분석을 위해 준비됩니다.

출처: Weber, R. Z., et al. 마우스 뇌에서 인간 신경 전구 세포의 뇌내 이식 및 생체 내 생물 발광 추적. J. Vis. 경험. (2022년)이 비디오는 유전자 변형 인간 신경 전구 세포(NPC)를 마우스 뇌로 정위 이식하는 방법을 보여줍니다. 연구자들은 루시페라아제와 형광 단백질을 발현하는 NPC를 주입하여 생체 내 생물발광 이미징과 사후 형광 현미경을 통해 신경학 연구에서 세포 생존, 이동 및 통합을 연구할 수 있습니다.

출처: Zweckberger, K., et al. 실험적 경추 척수 손상에서 신경 전구 세포와 자가 조립 펩타이드의 시너지 사용. J. Vis. 경험. (2015).이 프로토콜은 쥐 모델에서 척수 손상 복구를 위한 표적 주사 접근법을 보여줍니다. 여기에는 자가 조립 펩타이드(SAP)를 병변 코어에 전달하여 지지 스캐폴드를 만든 다음 병변 주위에 신경 전구 세포(NPC)를 주입하여 조직을 리모델링하는 작업이 포함됩니다.

출처: Furmanski, O., et al. 인간 유도 만능 줄기 세포 유래 신경 세포의 치료적 이식을 통한 마우스 뇌 손상의 제어된 피질 충격 모델. J. Vis. 경험. (2019년)이 비디오에서는 외상성 뇌 손상의 마우스 모델에서 인간 유도 만능 줄기 세포 유래 신경 세포를 심부 피질의 회백질-백질 경계에 입위적으로 주입합니다. 이식된 세포는 조직에 통합되어 손상된 뇌의 기능 회복과 회로 복구를 촉진합니다.

출처: Ibanez-Rios, M.I., et al., 신경 세포 이식의 인간 대뇌 오가노이드 모델. J. Vis. 경험. (2023년)이 비디오는 세포-기질 혼합물을 사용하여 형광 표지된 신경 전구 세포(NPC)를 인간 대뇌 오가노이드에 주입하는 방법을 보여줍니다. 이 방법은 재현 가능하고 동물이 없어 오가노이드 중단을 최소화하면서 이식이 가능합니다. 이는 신경 이식 및 중추신경계(CNS) 질환을 모델링하기 위한 귀중한 플랫폼을 제공합니다.