동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.
단일 수준 추궁 절개술
- 추궁 절개술의 대상을 두 개의 접합골단 관절 사이와 내측에 위치한 가장 중앙 층으로 식별합니다.
- 박판을 아래쪽 가장자리, 꼬리 접합 접합 관절의 인접한 하부 관절 돌기의 바로 내측 지점까지 추적합니다.
- 5mm Freer 엘리베이터 또는 큐렛을 사용하여 추판의 꼬리 가장자리와 중심관 사이의 전환을 촉진합니다.
참고: 촉진 기구를 앞쪽으로 강제로 밀면 경막낭과 척수에 닿을 수 있으므로 주의하십시오. 돼지의 척수는 요추를 지나 확장됩니다. 추간판 롱저를 사용하여 촉진을 용이하게 하기 위해 이 부위 위에 있는 추가 연조직을 제거할 수 있습니다. - 2mm 위쪽 물린 45도 Kerrison rongeur를 사용하여 조각별로 뼈를 추출합니다. 극돌기의 기저부를 따라 척추경의 꼬리 표면에 바로 뒤쪽 수준까지 뼈를 제거하고 측면으로 전체 범위까지 제거합니다.
- 각진 뼈 롱저를 사용하여 뼈 제거를 돕습니다. 추궁 절개술이 대부분 완료될 때까지 박판에 연결된 하관절 돌기를 그대로 두십시오.
- 하관절 돌기가 자유롭게 움직이고 zygapophyseal 관절 캡슐에 의해서만 부착되는지 확인합니다. #15 또는 #11 칼날을 사용하여 캡슐을 절개합니다.
- 하관절돌기는 조각별로 제거하되 인접한 상관절돌기는 그대로 둡니다.
참고: 후궁절개술이 완료되면 양극성 전기수술로 지혈을 시행합니다. 단극 전기수술은 신경 구조가 근접하기 때문에 사용되지 않습니다. 뼈 왁스는 노출된 뼈에서 출혈 부위를 따라 배치할 수 있으며, 흡수성 젤라틴 스펀지를 사용하여 연조직 근처의 지혈을 얻을 수 있습니다. 코토노이드는 장액과 혈액을 해부에서 흡수하는 데 유용한 도구입니다.
후근 신경절 해부(DRG)경
- 막외 지방을 표면에서 깊은 곳으로 내측으로 시작하여 측면으로 진행하는 방식으로 조각별로 배출합니다. 양극성 겸자를 사용하여 부드럽게 해부하고 6 - 10개의 프렌치 프레이저 흡입 팁으로 흡입하여 지방을 제거합니다.
참고: 확대경 확대 또는 해부 현미경의 사용은 경막외 지방을 안전하게 배출하고 양극성 전기 수술을 사용하여 경막외 정맥 신경총의 세심한 지혈을 달성하는 데 필요한 세부 수준을 제공하는 데 도움이 됩니다. - 피부 절개 축과 평행한 상하 방향으로 이어지는 정중선을 따라 경막낭을 식별합니다. 경막낭이 경막근 슬리브를 생성하는 것을 볼 수 있을 때까지 경막낭을 따라 경막외 지방을 제거합니다.
- 경막외 지방 배출을 통해 경막 슬리브를 측면 및 아래쪽으로 추적하고, DRG(등근 신경절) 주변에서 확대되는 것이 보일 때까지 추적합니다.
참고: 타원형 모양과 노란색에서 주황색의 DRG를 식별합니다. 중간 요추에서 DRG는 일반적으로 크기가 4 - 6mm이고 내측에서 측면 방향에서 가장 길며 해당 척추경의 바로 아래쪽 또는 내측 2 - 3mm에 위치합니다. 뭉툭한 직각 신경 갈고리를 사용하여 척추경을 부드럽게 촉진할 수 있습니다. - 인접한 척수 신경이 보일 때까지 DRG를 지나 경막외 지방을 측면으로 배출합니다.
참고: 경막절개술이 발생하면 간단한 러닝 스티치로 6-0 나일론 봉합사와 부드러운 마이크로 니들 드라이버를 사용하여 방수 봉합으로 수리하십시오.
후근 신경절 주사
- 22게이지 척추 바늘을 사용하여 32게이지 대류 강화 전달(CED) 바늘의 궤적을 안내합니다. 22게이지 가이드 바늘을 피부와 척추주위 근육에 구멍을 뚫습니다.
참고: CED 바늘은 압력 구배로 인해 벌크 흐름이라고도 하는 조직에서 유체 대류를 달성하도록 설계되었습니다. - DRG의 세로 축에 근접하는 궤적을 따라 가이드 바늘을 조준하고 바늘 끝이 해부 필드의 측면 척추주위 벽에서 나오도록 합니다.
- 바늘 내강이 DRG의 중심과 정렬될 때까지 바늘 경로를 미세 조정합니다.
참고: 가이드 바늘이 DRG에 닿지 않도록 하십시오. 멸- 균 주사기를 멸균 주사기에 끌어 올리고 주사기를 멸균 주입 튜브에 연결합니다.
- 튜브를 CED 바늘에 고정하고 주사기를 멸균 영역에서 꺼냅니다. 주사기를 프로그래밍 가능한 주사기 펌프에 연결합니다.
알림: 튜브는 멸균성과 이동성이 유지되도록 5피트 길이로 준비됩니다. 또한 용액에 기포가 유입되지 않는 것이 가장 중요합니다. - CED 바늘 끝에서 발현이 보일 때까지 주사액을 전진시킵니다.
- CED 바늘을 가이드 바늘 내강 안에 놓고 CED 바늘이 가이드 바늘 끝에서 나올 때까지 천천히 전진시킵니다. 바늘 정렬 중에 DRG에 구멍이 뚫리지 않았는지 확인하십시오.
- 궤적의 장축을 따라 가이드 바늘 위치를 미세 조정하여 CED 팁의 최종 위치를 결정합니다.
- 가이드와 CED 바늘의 깊이와 정렬이 달성되면 연동 바늘 허브를 사용하여 가이드 바늘과 CED 바늘을 함께 고정합니다.
- 가이드 바늘, CED 바늘 및 주사액이 장착된 연결된 튜브를 포함하여 모든 주사 장치 연결이 완전히 고정되었는지 확인합니다.
- 긴 축을 따라 가이드 바늘을 전진시켜 CED 바늘 끝과 DRG에 근사화합니다.
- CED 바늘 끝으로 DRG에 구멍을 뚫습니다.
- CED 바늘 끝을 DRG의 3차원 중심에 담그십시오.
참고: DRG는 다양한 크기와 모양의 3차원 구조이기 때문에 CED 바늘 끝을 DRG의 실제 중심에 정확하게 배치하려면 DRG 노출이 완료되어야 합니다. 진정한 DRG 중심은 세 개의 해부학적 축, 즉 전방에서 후방, 측면에서 내측, 위쪽에서 하부 축의 교차점에 위치합니다. - 3단계의 점진적 속도와 부피를 사용하여 CED로 100μL의 주사액을 전달합니다.
- 첫 번째 단계에서 2 μL/min으로 4 μl를 전달합니다. 두 번째 단계를 위해 4 μL/min으로 8 μL를 전달합니다. 세 번째이자 마지막 단계를 위해 88μL/min으로 88μL를 전달합니다.
참고: 압력 평형을 허용하기 위해 단계 사이와 마지막 단계 후에 3분 동안 일시 중지합니다. - 최종 주입 단계 후 주입 장치를 빼고 부드럽고 부드러운 동작으로 장축을 따라 3분 동안 일시 중지합니다.
참고: 무색 주입 용액의 경우 주사액 분포의 시각적 평가를 돕기 위해 0.1% 중량/부피 농도로 유색 염료가 용액에 포함됩니다. 또한, 필수 염료 4',6-디아미디노-2-페닐인돌(DAPI)은 연구 설계에 주사액 분포의 조직학적 평가가 필요할 때 0.25μg/μL의 농도로 용액에 포함됩니다.
폐쇄
봉
- 합 전에 수술 부위에 따뜻한 식염수 세척을 3회 적용하여 파편, 즉 뼈 조각의 부위를 동원하고 세척합니다. 흡입을 사용하여 식염수와 잔해물을 회수하십시오.
참고: 관개가 깨끗하게 유지되면 세심한 지혈이 보장됩니다. 이때 지혈제(젤라틴 스펀지)와 코토노이드를 제거합니다. 봉합하기 전에 절개 부위에서 모든 재료와 기구가 제거되었는지 확인하십시오. - 폐쇄를 위해 3중 기술을 사용하십시오.
- 0 봉합사를 사용하여 단순하고 중단적이며 거꾸로 되지 않는 방식으로 흉요추 근막을 봉합합니다. 방수 폐쇄를 위해 5 - 8mm마다 스티치를 놓습니다.
- 적절한 강도를 얻기 위해 5-8mm마다 스티치를 배치하여 간단하고 중단된 거꾸로 된 방식으로 2-0 봉합사를 사용하여 피하 조직을 봉합합니다.
- 0 봉합사를 사용하여 단순, 실행 또는 중단 방식으로 피부를 봉합합니다.
- 바늘 카운터를 사용하여 날카로운 물질이 발견되지 않았는지 확인하십시오.
- 식염수로 피부를 세척하고 피부를 건조시킨 다음 접착 붕대 스트립을 절개 부위에 수직으로 놓습니다.
- 붕대 스트립 위에 거즈를 놓고 최종 접착 항균 절개 드레이프를 부착합니다.