쥐 교모세포종 모델에서 치료용 나노입자의 정맥 투여

초록

출처: Kim, BD, et al. 다형 교모세포종 동물 모델에서 올리고뉴클레오티드 페이로드의 나노입자 전달. J. Vis. 경험. (2024년)

이 비디오는 교모세포종 보유 마우스에 치료용 나노입자를 정맥 주사하는 방법을 보여줍니다. 이 방법은 혈액-뇌 장벽을 가로질러 표적 전달을 가능하게 하고 뇌종양에서 나노입자 생체분포 및 치료 효능을 평가하기 위한 비침습적 이미징을 지원합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. MN-anti-miR10b 투여

참고: 본 연구에서는 이식 후 7일부터 6주 동안 일주일에 한 번 주사를 시행하였으나, 다양한 주사 빈도에 대해 동일한 프로토콜을 사용할 수 있다.

1. 마우스의 무게를 측정하고 마우스에 투여할 MN(자성 나노입자)-anti-miR10b의 부피를 계산합니다. MN-항-miR10b의 용량은 쥐 GBM(다형성 교모세포종) 모델에서 20mg Fe(철)/kg으로 제공됩니다. 예를 들어, 20g 마우스는 80μL 용량의 5mg Fe/mL MN-anti-miR10b를 받습니다. 대조군 마우스는 이 투여 방식과 일치하는 동일한 양의 PBS(인산염 완충 식염수)를 받습니다.
2. MN-anti-miR10b 용량으로 28G 주사기를 준비하고 주사 용액에 기포가 없는지 확인합니다.
3. 유도 상자에서 1.5L/min 유속으로 유도를 위해 2%-4% 이소플루란, 유지를 위해 1.5%-2%로 마우스를 마취합니다. 마우스를 노즈 콘으로 옮기고 마취를 계속합니다. 마취 깊이를 확인하고 수의사 연고를 바르십시오.
4. 70% 이소프로판올 물티슈로 꼬리를 소독하고 과도한 알코올을 건조시킵니다.
5. 꼬리를 돌려 측면 꼬리 정맥을 꼬리 상단에 위치시킵니다. 그런 다음 정맥을 겨냥하여 바늘을 꼬리에 삽입하고 플런저를 뒤로 당겨 진공을 만듭니다.
6. 혈액이 주사기에 들어갈 때까지 바늘을 삽입하면 정맥에 성공적으로 들어갔음을 나타냅니다.
7. MN-anti-miR10b를 천천히 주입하고 전달이 완료된 후 바늘을 집어넣습니다. 출혈이 멈출 때까지 거즈로 주사 부위를 압박합니다.
8. 노즈콘에서 마우스를 제거합니다. 완전히 회복되어 걸을 수 있을 때까지 마우스를 모니터링합니다.
   참고: 나노입자의 일시 투여는 호흡 곤란을 유발할 수 있습니다. 마우스를 주의 깊게 모니터링하고 호흡 곤란의 징후가 있으면 즉시 가벼운 흉부 압박을 가하십시오.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
Athymic nude "J:NU" 마우스	Jackson Laboratory RRID	:IMSR_JAX:007850	면역저하 마우스 모델
70% 이소프로포일 알코올 물티슈	Cardinal	MW-APL	종양 이식 및 꼬리 정맥 주사를 위한 국소 소독 물티슈
이소플루란	코베트러스	11695067772	아네테시아
이소플루란 기화기	SOMNI Scientific	VS6002	아네테시아 장치
슐린 주사기 1CC 29G X 1/2"	Becton, Dickinson	324704	노입자의 D-루시페린 주사 및 꼬리 정맥 주사

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용 주사기