비브리오 종의 신속한 검출을 위한 새로운 발색 배지

초록

출처: Yeung, M., et al. Vibrio parahaemolyticus 및 기타 Vibrio 종의 검출을 위한 보다 민감하고 특이적인 발색 한천 배지 개발. J. Vis. 경험. (2016년)

이 비디오는 비브리오 종을 식별하기 위한 배양 기반 방법을 보여주며, 일반적으로 사용되는 티오황산염-구연산염-담즙염-자당 또는 TCBS 한천에 대한 보다 정확한 대안으로 발색성 한천을 강조합니다. 발색 한천은 종 특이적 효소 활성을 검출하여 비브리오 균주의 우수한 분화를 제공합니다.

프로토콜

선택적 및 차등 매체의 성장

1. 실험 2-4일 전에, 콜로니 분리를 위해 비선택적 배지(TSAS, BHI 또는 초콜릿 한천)에 모든 미생물 균주를 줄무늬로 선불로 만듭니다. 플레이트를 35-37°C에서 48시간 동안 배양합니다. 배양 후 콜로니 형태를 관찰하여 배양의 순도를 확인합니다. 순수한 배양은 유사한 군집 형태를 나타내는 군집을 생산해야 합니다.
2. 몇 개의 분리된 콜로니를 국물 5ml에 옮깁니다. 튜브를 35-37°C에서 16-24시간 동안 배양합니다.

메모: 생후 4일 미만의 어린 콜로니를 사용하여 모든 실험에서 하룻밤 배양을 준비합니다.

3. 콜로니 분리를 위해 선택적 및 차등 배지(TCBS 및 발색 한천)에서 하룻밤 배양을 줄무늬로 줄무늬로 줄무늬로 만듭니다. 플레이트를 35-37°C에서 최대 96시간 동안 배양합니다.
4. 플레이트의 배양 밀도와 분리된 콜로니의 크기를 모두 검사하여 모든 균주의 전반적인 성장을 기록합니다. 주변 및/또는 UV 광선 아래에서 콜로니의 색상을 기록합니다. 고립된 식민지의 다른 특성, 예를 들어 고도, 여백 및 형태에 유의하십시오.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
시약/장비
한천	피셔 사이언티픽	DF0140-15-4	다른 브랜드를 사용할 수 있습니다.
BHI 분말	피셔 사이언티픽	DF0418-17-7	다른 브랜드를 사용할 수 있습니다.
CampyGen 가스 발생기	Hardy 진단	CN035A	미호기성 분위기를 제공하기 위해; 다른 브랜드를 사용할 수 있습니다.
초콜릿 한천 접시	Hardy 진단	14회	다른 브랜드를 사용할 수 있습니다.
배양 튜브	피셔 사이언티픽	S50712	다른 브랜드를 사용할 수 있습니다.
HardyChrom 비브리오 한천 플레이트	Hardy 진단	지319	이 연구는 이 매체를 평가합니다.
부 화기	어떤
접종 루프	피셔 사이언티픽	22-363-606	이 연구에서는 10마이크로리터 크기가 사용되었습니다.
페트리 접시	피셔 사이언티픽	FB0875713	다른 브랜드를 사용할 수 있습니다.
피펫 및 팁	멸균된 팁
TCBS 분말	Hardy 진단	265020	이 연구는 이 매체를 평가합니다.
TSB 분말	피셔 사이언티픽	DF0370-07-5	다른 브랜드를 사용할 수 있습니다.
UV 보기 캐비닛	어떤		장파 UV 광선 방출
수조	어떤
박테리아 종 및 균주
에어로모나스 하이드로필라	ATCC
칸디다 알비칸스	ATCC
캄필로박터 제주니	ATCC
대장균	ATCC
프로테우스 미라빌리스	ATCC
녹농균	ATCC
황색포도상구균	ATCC
살모넬라 콜레라수이스	ATCC
시겔라 보이디	ATCC
시겔라 플렉스네리	ATCC
시겔라 손네이	ATCC
비브리오 알지노용해쿠스	ATCC
V. 콜레라 (혈청형에는 O139, O1, 비 O1, El Tor 생물형이 포함됨)	FDA, ATCC
V. 담셀라	미국 식품 FDA
V. 피세리	환경
V. 하천	CDC
V. 푸르니시	CDC
V. 홀리제	미국 식품 FDA
V. 메트슈니코비	ATCC
V. 미미쿠스	미국 식품 FDA
V. parahaemolyticus (혈청형에는 O3:K6, O1:K56, O4:K8, O5:K15, O8 등이 포함됨)	ATCC, FDA, CDC, 환경
V. 단백질 분해	미국 식품 FDA
V. 불니피쿠스	미국 식품 FDA