비브리오 콜레라 생물형 구별을 위한 보게스-프로스카우어 검사법

초록

출처: Brumfield, K. D. 외, Vibrio 콜레라의 생물형 유지 및 구분을 위한 임상 및 환경 분리 실험실 기법. J. Vis. 경험 (2017).

이 영상은 콜 레라 균의 세 가지 생물형인 고전형, 야생형 엘 토르, 그리고 엘 토르 변종을 구별하기 위한 보게스-프로스카우어(VP) 검사를 시연합니다. 각 배양액은 포도당 함유 배지에 접종되어 배양 후 α-나프톨과 수산화칼륨으로 처리하여 아세톤 존재를 검출합니다. 분홍빛이 도는 붉은색은 양성 VP 반응을 나타내며, 야생형 엘 토르 생물형에서만 관찰되어 고전형과 변종형과 구별됩니다.

프로토콜

Voges-Proskauer (VP) 분석법

1. 액체 LB 육수에 하룻밤 배양을 준비하세요.
2. 4mL의 메틸 레드 Voges-Proskauer 또는 MR-VP 육수를 접종하여, 10 μL 미리 준비한 배양물을 멸균 배양관에서 4 mL MR-VP 육수에 피펫팅하여 225rpm 셰이커 인큐베이터에서 산소 공급 상태로 37 °C에서 12시간에서 16시간 배양합니다.
3. 멸균 배양관 내 MR-VP 1박 배양액에 각각 5% (w/v) α-나프톨 150 μL 및 40% (w/v) KOH 50 μL 40% (w/v) KOH를 첨가합니다.
4. 잠시 소용돌이를 한 뒤 상온에서 최대 4시간 동안 두고, 색이 변할 때까지 기다려 주세요.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
부통령 브로스	디프코	216300	http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=216300&parentCategory=&parentCategoryName=&categoryId=&categoryName=&searchUrl=%2FsearchResults%3Fkeyword%3Dmr-vp%2Bmedium%26typeOfSearch%3DproductSearch
코	피셔 사이언티브	P250-500	https://www.fishersci.com/shop/products/potassium-hydroxide-pellets-certified-acs-fisher-chemical-5/p250500?searchHijack=true&searchTerm=P250500&searchType=RAPID
α-냅톨	MP 생의학	204189	http://www.mpbio.com/product.php?pid=05204189