생존 세포 수를 이용한 병원성 박테리아에 의한 토마토 묘목의 뿌리 정착 평가

Abstract

출처: Matthysse, A. G. 실험실에서 측정한 박테리아의 식물 표면 부착 현상. J. 비스캐스트 익스피스, (2018)

이 영상은 야생형 및 셀룰로오스 결핍 병원성 박테리아에 의한 토마토 묘목의 뿌리 정착 측정 프로토콜을 시연합니다. 밀착된 박테리아의 유효한 개체 수는 야생형 균주에 의한 더 높은 부착력과 미세군집 형성을 보여주며, 셀룰로오스가 안정적인 뿌리 집락화에서 역할을 함을 강조합니다.

Protocol

1. 접착력 측정 가능한 세포 수를 이용한

1. 모래에서 자란 식물에 결합된 생존 박테리아의 수를 확인하세요.
   1. 식물을 용기에서 꺼내 사포질하세요. 식물을 용기에서 꺼내려면 먼저 용기 상단과 하단의 밀봉 재료를 제거하세요. 용기를 멸균 종이 위에 올려놓고, 용기를 부드럽게 표면에 부딪혀 재료를 느슨하게 하여 모래나 토양 전체를 하나의 큰 원통처럼 제거하세요.

1. 필요하다면 주걱이나 막대를 사용해 용기 바닥을 통해 들어가는 가장자리의 재료를 느슨하게 만드세요.

2. 식물이 담긴 모래나 흙 원통이 종이 위에 자유로워지면, 가운데로 갈라서 뿌리를 드러내세요. 원한다면 용기 가장자리와 뿌리 근처에서 모래 샘플을 채취하세요. 이는 박테리아의 확산(및 축적, 증식)을 파악하는 데 유용할 수 있습니다.
3. 뿌리 길이를 측정하세요. 뿌리를 들어 올리고 뿌리에 느슨하게 달라붙은 모래와 박테리아(근구권 물질)를 적절한 양의 물이나 완충제에 담근 뒤 부드럽게 흔들어 제거합니다. 적절한 배지인 루리아 아가(Luria agar)에 도금하여 결과 부탁액 내 박테리아의 생존 가능한 세포 수를 결정합니다. 이는 뿌리와 느슨하게 연관된 박테리아의 수를 나타냅니다.
4. 조교 검사로 단단히 결합한 박테리아를 제거하고 그 수를 측정하세요.

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
씨앗	어떤 것이든	해당 없음	씨앗 밭 번호와 품종을 기록해 두세요
모래	시샌드 피셔 사이언티브	S25
모래	시그마-올드리치	S9887
코네테이너	스튜우 앤 선즈 주식회사	레이-리치 원뿔-테이너	키우고자 하는 식물 종류에 맞는 다양한 크기의 제품이 있습니다
배스 소닉 케이터	과학 용품 회사	해당 없음
파라필름	과학 용품 회사	해당 없음