본 영상에서는 투과 전자 현미경을 사용하여 감염된 아메바 배양물로부터 Faustovirus 입자를 이미징하는 과정을 보여줍니다. 그리드 준비, 대비 증강을 위한 몰리브덴산 암모늄을 이용한 음성 염색, 그리고 현미경을 통한 바이러스 시각화 과정을 다룹니다. 프로토콜은 현미경의 통합 소프트웨어 도구를 사용하여 Faustovirus의 크기를 측정하는 것으로 마무리됩니다.
방법 논문
전자현미경을 이용한 Faustovirus의 시각화 및 크기 측정
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2026년 8월 31일
이 논문에서
초록
프로토콜
- 전자 현미경 검사
- 슬라이드에서 1차 확인을 마친 후, 상층액 배양물을 전자 현미경으로 관찰하여 거대 바이러스의 존재 여부를 평가합니다.
- 글로우 방전 처리된 그리드 위에 양성 샘플 5 µl를 떨어뜨립니다. 실온에서 약 20분 동안 대기합니다.
- 그리드를 조심스럽게 건조시킨 후, 1% ammonium molybdate 한 방울을 10초 동안 처리합니다. 그리드를 5분 동안 건조시킵니다.
- 20 keV에서 전자 현미경 관찰을 진행합니다.
- 그리드를 홀더에 장착하고 홀더를 현미경 내부로 삽입합니다. 해당 아이콘을 클릭하여 진공 상태를 확인합니다. 밸브를 닫고 spot size 5, 배율 x 25,0에서 관찰을 시작합니다.
- ImageJ를 사용하거나 획득 화면에 있는 현미경 측정 도구를 사용하여 거대 바이러스의 크기를 측정합니다.
참고: 캡시드 크기가 약 20 nm인 경우 샘플을 Faustovirus 그룹으로 분류합니다.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| Amoeba 균주 CDC-19 | ATCC | France | 50237 |
| 플레이트 | Cellstar | France | 65180 |
| 진공 구동 필터 | Thermo scientific | France | BPV450 / 2017015 |
| 인산염 완충 식염수 | Thermo Fisher scientific | France | 1010-023 |
| DAPI 염색약 | Life Technologies | France | D1306 |
| 카본 그리드 | Euromedex | France | FCF40NI |
| 몰리브덴산 암모늄 | VWR internationanl | France | 21276185 |
| 플라스크 | SARSTEDT | Germany | 8391 |
| 0.2 μm 필터 | Milex millipor | France | SE2M229104 |
| 초원심분리기 Sorval WX 80 | Thermo scientific | France | 910248 |
| 급속 유량 필터 | Nalgene | France | 450-0020 |
