드립 흐름 반응기로 개방형 시스템 흐름 biofilms을 활용하여 디스크 원자로 회전을위한 프로토콜이 상세하게 제공됩니다.
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이 논문에서
정오 공지
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요약
초록
자연의 대부분의 미생물이 1 세균성 biofilms는 매트릭스 안에 쌌다 있습니다. biofilms의 표면 관련된 커뮤니티와 같은 존재로 생각하고 표면 2. Biofilm 형성과 발전에 연결된하는 것은 일반적으로 이러한 microtiter 접시 또는 흐름으로 배치 시스템을 사용하여 실험실에서 연구 아르 이러한 흐름 - 세포와 같은 시스템. 이러한 방법은 돌연변이와 화학 라이브러리 (microtiter 접시) 시각화 (유동 세포) 4 3 또는 성장 biofilms를 검사하는 데 유용합니다. 드립 흐름 biofilm 반응기와 회전 디스크 biofilm 반응기 : 여기 우리는 흐름 시스템 biofilms 두 가지 추가적인 유형의 성장 포도상 구균에 대한 자세한 프로토콜을 제시한다.
드립 흐름 biofilm 원자로는 낮은 전단 조건 하에서 재배 biofilms의 연구를 위해 설계되었습니다. 5 드립 흐름 반응기 네 가지 병렬 테스트 채널 하나의 표준 유리 현미경 슬라이드 크기의 쿠폰을 가지고 각각의 능력, 또는 카테 테르 또는 정량의 길이로 구성되어 있습니다. 드립 흐름 반응기 microsensor 모니터링, 일반 biofilm 연구, biofilm cryosectioning 샘플, 높은 바이오 매스 생산, 의료 재료 평가하고, 내재하는 의료 기기 테스트에 이상적입니다. 6,7,8,9가
회전 디스크 반응기 이동식 쿠폰에 대한 recesses를 포함하는 독보적인 디스크로 구성되어 있습니다. 10 이동식 쿠폰 어떠한 machinable 재료로 만든 수 있습니다. 회전 디스크의 아래쪽의 디스크 회전이 표면 플러시 쿠폰 걸쳐 액체 표면 전단을 만들 수 있도록하는 막대 자석이 포함되어 있습니다. 18 쿠폰을 포함하여 전체 디스크는 1000 ML 유리 사이드 암 원자로 용기에 배치됩니다. 디스크가 자기 활동가에 의해 회전하는 동안 액체 성장 미디어는 혈관을 통해 순환됩니다. 쿠폰은 원자로 용기에서 제거 후 진학이나 현미경 이미징을위한 biofilm 샘플을 수집하는 스크랩한 있습니다. 회전 디스크 원자로는 biocide의 효능, biofilm 제거 및 방지 오염 물질의 성능 실험실 평가를 위해 설계되었습니다. 9,11,12,13
프로토콜
1. 드립 흐름 Biofilm 반응기
- 드립 흐름 biofilm 반응기가 조립 autoclaved입니다 (Biosurface 기술 또는 사용자 정의 디자인 버전에서 사용할 수 일반적으로 대학의 기계 상점으로 만들 수 있습니다, 그림 1 참조). 조립 실 및 확보 챔버 뚜껑에 affixing 쿠폰을 포함한다. biofilm 매체 (tryptic 간장 국물 2g / L과 포도당 2g / L) 및 유입 영양 튜브와 함께 챔버는 autoclaving 소독을하고 있습니다.
- 드립 흐름 반응기의 접종은 평평한 표면에 반응기를 삽입 유출 튜브 라인을 클램핑, 10 ML tryptic 간장 국물과 함께 각각의 챔버를 작성하고 S. 10 μL를 추가하여 preformed입니다 구균 문화는 tryptic 간장 국물에 하룻밤 성장. 주사 원자로 그때가 18 시간 동안 37 ° C 배양기에서 개최됩니다.
- 배양 18 시간 후, 유출 튜브는 unclamped되고 반응은 10 ° 각도로 절단 나무 블록에 위치합니다.
- 무균 지속적인 흐름 영양의 국물이 들어있는 병에 유입 영양 튜브를 연결합니다. 최대 속도 (펌프 모델에 따라 달라질 수 있습니다)에서 펌프를 실행하여 펌프 및 주요 튜브를 통해 튜브 라인 피드.
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토론
다른 원자로 재배 Biofilms는 종종 서로 다른 특성을 것입니다 각 반응기의 다른 응용 프로그램이 있습니다. 드립 흐름 biofilm 반응기와 회전 디스크 반응 :이 작품에서 우리는 두 biofilm 원자로의 사용을 설명합니다. 드립 흐름 원자로 공기 - 액체 인터페이스 낮은 전단 biofilms 성장을위한 유용하고 다양한 상황에 적용할 수 있습니다. 우리는 biofilm의 바이오 매스의 대량이 바람직 연구들이 매우 편리하게 찾아보세요. 이 설정은 쉽게 microsensor 감시하고 잠재적인 antibiofilm 표면의 테스트를 포함 공부를 적용할 수 있습니다.
회전 디스크 반응기 중간 전단 환경에서 제거하는 디스크에서 여러 동일한 biofilm 성장하는 데 유용합니다. 이동식 디스크에 여러 개의 동일한 biofilms를 생산하는이 원자로의 능력 항균 화합물 및 biofilm 모성 표면의 테스트를 포함 연구에 적합합니다. 이러한 biofilm의 원자로를 사용하고 연구자가 .......
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공개 사항
관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.
감사의 글
NIAID 부여 K22AI081748.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 점적 흐름 반응기 | BioSurface Technologies Corporation | DFR 110 | |
| 회전 원판 반응기 | BioSurface Technologies Corporation |
참고문헌
- Costerton, J. W., Lewandowski, Z., Caldwell, D. E., Korber, D. R., Lappin-Scott, H. M. Microbial Biofilms. Annu. Rev. Microbiol. 49, 711-745 (1995).
- Costerton, J. W., Cheng, K. J., Gessey, G. G., Ladd, T. I., Nickel, J. C., Dasgupta, M., Marrie, T. J. Bacterial biofilms in nature and disease. Ann. Rev. Microbiol. 41
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재인쇄 및 허가
정오
Formal Correction: Erratum: The Use of Drip Flow and Rotating Disk Reactors for Staphylococcus aureus Biofilm Analysis
Posted by JoVE Editors on 3/14/2011. Citeable Link.
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