다음 프로토콜은 환기를 분리하고 오른쪽 심실 afterload에 혈액의 흐름, 공기 흐름,기도 변화와 혈관 변화의 효과를 계량하기 위해서는 안정이나 타악기 폐동맥 혈관 압력 유량 관계를 측정하는 마우스 폐가 instrumenting 과정을 설명합니다.
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이 논문에서
요약
초록
절연은 환기 및기구 마우스 폐 준비는 안정과 타악기 폐동맥 혈관 압력 유량 관계가 폐 동맥 유량, 유량 파형,기도 압력과 왼쪽 심방 압력 이상의 독립적인 컨트롤과 함께 측정할 수 있습니다. 폐 혈관 저항이 멀티 포인트, 지속적인 압력 - 유량 곡선을 기준으로 계산되며 폐동맥 혈관 임피던스는 주파수의 범위에서 얻은 타악기 압력 유량 곡선에서 계산됩니다. 그것이 무시할 수없는 혈관 준수의 영향, 특히 폐동맥 순환에 포함되어 있기 때문에 현재 임상 인식으로, 임피던스는 저항보다 오른쪽 심실 afterload의 우수한 측정하기위한 한 방법입니다. 임피던스 세 중요한 통계 수치 - 제로 헤르츠 임피던스 Z 0, 특성 임피던스 Z C 및 전파 반사 R W의 색인 - 흐름에 사용할 수 말초 동맥 단면적, 근위 동맥 강성과 상류 - 하류 임피던스에 대한 통찰력을 제공합니다 불일치, 각각. 고립에서 얻어진 모든 결과는, 환기 및 perfused 폐 동정 신경계 톤, 볼륨 상태 및 마취의 효과에 독립적입니다. 우리는 폐의 emboli과 저항 및 임피던스에 대한 만성 hypoxia의 영향을 계량이 기술을 사용 있고, Z C의 압력 의존성을 사용 vasoactive 요원과 질병의 행동 사이트 (즉, 근위 대 말초) 구별할 수 있습니다. 또한, 이러한 기술은 마우스의 유전자 조작 종자의 폐에와 함께 사용하는 경우, 폐의 혈관 구조와 기능에 대한 분자 수준의 결함의 영향을 확인할 수 있습니다.
프로토콜
Tuchscherer 외,이 프로토콜에서 우리는 이전에 타악기 폐의 혈관 압력 유량의 관계에 대한 폐 emboli과 만성 hypoxia의 영향을 (Tuchscherer, 웹스터, & Chesler 2006 년 계량하는 데 사용되었습니다 절연, 환기, perfused 마우스 폐 준비를 보여줍니다 ., 2007). 간단히 마우스 폐는 수술 가열 챔버에 배치, 주변 조직으로부터 격리 (IL - 1, 하버드 장치, 홀리스튼, MA)하고 통풍 (Ventilatory 제어 모듈 (VCM) - R 타이머 카운터 모듈 (TCM)를, 하버드 장치). 폐 vasculature은 지속적인 흐름 파형 또는 고주파 oscillatory 펌프 (보스 - 전기 힘, 에덴을 생성하는 주사기 펌프 (콜 - 파머, 버논 힐스, IL)를 사용하여 3.5 %의 Ficoll 온수 RPMI 1640 세포 배양 매체와 perfused입니다 타악기 폐 혈관 흐름 파형을 만들 수있는 주사기 펌프와 병행하여 프레리, MN). 압력 트랜스 듀서 (P75, 하버드 장치)는 순간 폐동맥 압력 (PAP)와 왼쪽 심방 압력 (무릎)를 측정합니다. 순간 유량 (Q)는 인라인 유량계 (천음속 시스템즈, 이타카, 뉴욕)와 측정됩니다. 타악기 압력 - 유량 관계가 폐 혈관 생리학 및 병리학과 오른쪽 심실 afterload에 대한 통찰력을 제공합니다 이....
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토론
수술의 중요 단계
이것은 폐 떨어져 갈빗대를 절단하면 치료가 함락되는 것이 중요합니다. 폐 완전히 노출과 노골적인 주변 조직에 의해 인플레이션 중에 있지만 고립의 과정에서 손상되지해야합니다. 포셉의 백 엔드와 같은 평면 객체의 사용은 줄일 가위에 대한 명확한 경로가되도록 가슴 벽 가까이 폐를 개최하는 데 사용할 수 있습니다. 또 다른 중요한 단계는 폐동맥과 대동맥 주위 봉합의 위치입니다. 무딘 직선 핀셋을 사용하면 폐동맥을 펑쳐링의 위험을 줄일 수 있습니다. 수술 중에 마지막 중요한 단계는 cannulas의 위치입니다. cannulas들이 마음을 출구로 큰 혈관의 비행기 위에 너무 높은 경우, cannulas는 폐동맥이나 폐동맥 혈관 중 하나를 당겨 수 있습니다. 좌심방에있는 정맥이 너무 낮으면, 그것은 왼쪽 폐에 흐름을 차단할 수 있습니다. 그 결과, 더 많은 흐름 PAP 증가하고 오른쪽 폐 부종의 발전을 hastening, 오른쪽 폐로 이동합니다.
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공개 사항
관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.
감사의 글
이 연구는 보건 부여 R01HL086939 (NCC)의 국립 연구소에 의해 지원되었다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 1 ml 주사기 | Fisher Scientific | 14-829-10F | |
| 10 ml 주사기 | Fisher Scientific | 14-823-2A | |
| 60 ml 주사기 | Fisher Scientific | 13-689-8 | |
| GLN 6/PK가 포함된 RPMI | Fisher Scientific | MT10040CV | |
| 보틀 탑 필터 | Fisher Scientific | 09-761-57 | |
| Ficoll PM 70 | Sigma-Aldrich | F2878-100g | |
| 헤파린 | Sigma-Aldrich | ||
| Y27632 | Sigma-Aldrich | Y0503 | |
| 각도 조절형 볼 아이리스 가위 | Fine Science Tools | 14109-09 | |
| 반나스 스프링 가위 - 4mm 날 | Fine Science Tools | 15018-10 | |
| 미세 아이리스 가위 - 직선형 | Fine Science Tools | 14106-09 | |
| Dumont #5/45 핀셋 | Fine Science Tools | 11251-35 | |
| Dumont 의료 생물학용 핀셋 | Fine Science Tools | 11254-20 | |
| Lauda E100 ECO-line 003 | VWR international | Lauda-Brinkmann E-103, 62400-922와 동등한 제품 | |
| IL-1 분리 관류 마우스 폐 시스템 | Harvard Apparatus | 739904 | |
| PLUGSYS 모듈용 혈압 트랜스듀서 P75 | Harvard Apparatus | 730020 | |
| TS410 유량 모듈 | 천음속 | TS410 | |
| ME 4 PXN 정밀 PXN 인라인 유량 센서 | 천음속 | ME 4 PXN | |
| Cole-Parmer 멀티 시린지 펌프 | Cole-Parmer | EW-74900-20 | |
| Nembutal 50MG/ML 20ML 바이알 | Amatheon |
참고문헌
- Pace, J. Sympathetic control of pulmonary vascular impedance in anesthetized dogs. Circ Res. 29, 555-568 (1971).
- Ewalenko, P., Stefanidis, C., Holoye, A., Brimioulle, S., Naeije, R. Pulmonary vascular impedance vs. resistance in hypoxic....
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