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방법 논문

하부 대정 맥 혈전증의 마우스 완전한 스테이 시스 모델

18.5K 조회수

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DOI:

10.3791/2738

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2011년 6월 15일

이 논문에서

요약

하부 대정 맥 혈전증의 마우스 전체 스태시스 모델은 정맥 벽 조직 및 혈전의 같지는 금액을 산출. 이것은 정맥 벽과 occlusive 혈전 사이에 만성 염증으로 급성에서 진행을 평가 상호 작용을 평가하기위한 유용한 입증되었습니다.

초록

정맥 thromboembolism (VTE)은 깊은 정맥 혈전증 (DVT)과 폐 색전증 (PE) 모두를 포함합니다. 미국 (미국), 높은 병적 상태와 사망률에 요금은 심각한 건강 관심사 1-2 VTE합니다. 심장 질환과 뇌졸중 후 VTE는 세 번째 가장 일반적인 혈관 질환 3. 혼자 미국에서는, 매년 영향을 추정 90만명은 300,000 사망자가 연간 3 발생과 함께있다. 이 질병의 메커니즘을 연구 생체내 동물 모델에서 신뢰성이 필요합니다.

하부 대정 맥 혈전증의 마우스 전체 스태시스 모델을 사용하는 장점은 몇 가지 있습니다. 마우스 모델은 극적으로 비용을 절감, 제한된 가용성 테스트 에이전트의 아주 작은 볼륨 관리를위한 수 있습니다. 대부분의 유망 구체적인 염증과 응고 인자의 기능을 delineated 수 있도록 유전자 knockouts와 마우스에 대한 가능성이 있습니다. 현재 분자 assays은 정맥 벽, 혈전, 전체 혈액 및 assays를위한 플라즈마의 quantitation를위한 수 있습니다. 그러나,이 모델과 관련된 주요 관심사는 수술 크기 제약과 혈관의 취쇄성입니다. 또한, 작은 IVC 샘플 무게 (0.005 g을 의미)로 인해이 같은 실시간 중합 효소의 연쇄 반응 (RT - PCR), 서양 얼룩 같은 동물 조직에 대한 정확한 통계 분석을 위해 숫자, 혈전과 혈액 assays을 높일 필요가 있습니다 효소 링크된 면역 (엘리사), zymography, 정맥 벽 및 혈전 셀룰러 분석하고, 전체 혈액 및 플라즈마 assays 4-8.

스테이시 모델의 주요 단점은 혈액 흐름의 부족은 혈전과 정맥 벽에 관리 체계 치료 대리인의 최대한의 효과를 억제한다는 것입니다.

프로토콜

1. 마우스 아나스타샤 절차

  1. 동물은 분당 0.5 리터 (기화기 제어)의 유속에서 자신의 케이지에서 제거하고 5% isoflurane과 100 % 산소로 가스 유도를위한 마취 미리 수술 유도 챔버에 배치됩니다.
  2. 생쥐는 마취 유도 챔버에서 진정 챔버에서 제거하고 머리 depilatory가 (1min) 사용되는 경우 복부 복부는 전기 면도기로 면도, 또는 챔버 내에 유지집니다.
  3. 아직 진정제를 맞았 는데도, 그들은 무게가 있지만, 내 눈을는 isoflurane과 산소를​​ 사용, 코 콘과 살균 안과 연고와 윤활 후 전신 마취 하에서 가열 장치를 순환 따뜻한 물 등의 recumbancy에 배치됩니다. 이 시점에서 산소 요금은 분당 0.2 리터로 축소됩니다.
  4. 복부는 chlorhexidine 솔루션을 뿌려놓은 (chlorhexidine의 디아 세 테이트 빠르게 bacterialcidal 및 영구이다) 및 멸균 거즈로 세 번 닦아 또는 외과 사이트 깨끗한까지입니다.

2. 마우스 미세 수술 및 복구 절차

  1. 복부 정중선 절개 (2cm)은 복부를 노출 피부와 복벽을 통해 홍채 가위로 이루어집니다. 멸균 생리 젖었 2x2in의 거즈는 동물의 왼쪽에 장내를 반영....

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토론

하부 대정 맥 혈전증의 마우스 완전한 스테이 시스 모델은 다양한 연령의 마우스의 여러 변종을 수행할 수 있습니다. 모델은 대부분의 무게가 최소한 20g의 마우스에 적합합니다. 정맥 혈전증의이 동물 모델은 조사관이 정맥 벽 및 occlusive 정맥 혈전 간의 염증 상호 작용을 공부하실 수 있습니다. 우리의 경험에서, 우리는 그룹 당 10 명 이상 동물이 혈전 무게, 정맥 벽 염증성 세포 카운트, 정맥 벽 단백질, 정맥 벽 유전자 표현 및 활동에 대한 전체 혈액이나 혈장 분석에 대한 집단 간의 통계적 중요성을 얻기 위해 필요한 것으로 나타났습니다 assays.

....

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공개 사항

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
용품 및 장비
Isoflurane 가스
Prolene 7-0 봉합사
Vicryl 5-0 봉합사
스킨 접착제
아이 윤활유
Nolvasan 솔루션 또는 정균 솔루션
Stereomicroscope 범위
MediCapture
커튼 Applicators
2x2 거즈
손난로
마취 기계
유리 구슬 악기 살균기
마이크로 수술 악기
복부 Restrainers

참고문헌

  1. Naess, I. A., Christiansen, S. C., Romundstad, P., Cannegieter, S. C., Rosendaal, F. R., Hammerstrom, J. Incidence and mortality of venous thrombosis: a population-based study. J Thromb Haemost. 5, 692-699 (2007).
  2. White, R. H., Keenan, C. R. Effects of race and ethnicity....

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재인쇄 및 허가

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