쥐 모델에서 사타구니 배출 림프절 수확

초록

출처: Rezende, R. M. et al., 생체 외 공초점 현미경을 사용한 림프절 구조 및 세포 국소화 시각화.J. Vis. 특급(2019년)

이 비디오는 마우스 모델에서 서혜부 배출 림프절의 외과적 분리 절차를 보여줍니다. 복부 부위를 절개하면 서혜부 림프절에 접근할 수 있으며, 이 림프절은 외과적으로 적출됩니다. 채취된 반투명 서혜부 림프절은 면역학 연구에 사용할 수 있습니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 실험에 사용된 마우스

1. B6 배경에 8주 된 수컷과 암컷 마우스를 사용합니다.

2. 서혜부 배출 림프절을 제거하는 수술 절차

1. CO₂ 질식 후 자궁 경부 탈구를 사용하여 마우스를 안락사시킵니다.
2. 접착 테이프로 아크릴 스테이지에서 마우스를 고정시키고 면봉으로 복부 피부에 미네랄 오일을 도포하여 절개 부위 주변에 털이 쌓이는 것을 방지합니다(그림 1B). 털 제거는 필요하지 않습니다.
3. 치골에서 치골 돌기까지 복부에 미세수술 구부러진 가위(11.5cm)와 미세수술 구부러진 집게(12.5cm)를 사용하여 정중선 절개를 수행합니다(그림 1C).
4. 복부 근육 조직을 피부에서 분리시킵니다(그림 1D).
5. 수직 절개 라인의 상단과 하단을 수평으로 절개하여 관심 쪽에 피부 피판을 만들고(항체 믹스 주사 측면에 따라) 피부를 플랩하여 림프절을 시각화합니다(그림 1E).
6. 아크릴 판의 피부 덮개를 테이프로 붙입니다(그림 1F).
7. 미세 수술 곡선 겸자를 사용하여 서혜부 배출 림프절을 제거합니다(그림 1F). 림프절은 피부 아래에서 반투명, 일반적으로 이중의 구체로 나타납니다.

결과

그림 1: 서혜부 림프절 준비.
(A) 허벅지 안쪽에 FACS 항체 마스터 믹스를 피하 주사합니다. (B) 주사 후 3시간 후에 마우스를 안락사시키고 접착 테이프로 아크릴 판에 마우스를 고정시키고 절개 부위 주변에 털이 쌓이는 것을 방지하기 위해 복부 피부에 미네랄 오일을 도포합니다. (C) 치골에서 xiphoid process까지 복부의 정중선 절개를 수행합니다. (D) 복부 근육 조직을 피부에서 분리하고 피부 플랩을 수행합니다. (E) 아크릴 판에 피부 덮개를 테이프로 붙입니다. (F) 미세 수술 곡선 겸자를 사용하여 서혜부 림프절을 제거합니다. (지-H)...

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
미세 수술 곡선 겸자	WEP 수술 기구	주문 제작	12.5 cm
미세 수술 곡선 가위	WEP 수술 기구	주문 제작	11.5 cm