마우스 모델에서 인간 피부 이식을 위한 기술

초록

출처: Moss, M. I. et al., 생체 내에서 인간 면역 반응을 조작하기 위한 이종 이식 피부 모델.J. Vis. 특급 (2022)

이 비디오는 호중구 반응이 억제된 면역 결핍 마우스에 인간 피부를 이식하는 방법을 보여줍니다. 이 방법은 인간의 분할 두께 피부를 마우스의 이식 침대에 적용하고 밀봉한 다음 복구를 위해 덮는 것입니다. 결국 인간의 피부가 쥐의 피부에 달라붙어 혈관 형성과 순환을 확립하여 성공적인 피부 이종 이식을 가능하게 합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 기증자 인간 피부 샘플 처리

참고: 이 이식에 사용된 인간 피부 샘플은 건강한 환자의 복부에서 채취한 대규모 샘플이었습니다. 샘플은 15cm x 7.5cm 이상이어야 합니다. 크기 제한은 피부를 사용할 수 있는 마우스의 수와 이식편 크기 선택에 영향을 미칠 수 있습니다.

1. 준비 및 이식 전에 피부 샘플을 차가운 온도(얼음 위, 4°C)에서 유지하십시오. 인산염 완충 식염수(PBS)에 거즈를 적신 상태로 밀폐된 검체 채취 컵에 샘플을 촉촉하게 유지합니다.
   참고: 피부 샘플을 4°C에서 2일 이상 보관하는 것은 권장하지 않습니다. 그러나 스킨 샘플이 더 오래 저장되는 보고서가 있습니다.
   주의: 모든 인체 조직은 표준 생물학적 위험 예방 조치로 치료하십시오.
2. 멸균된 해부판의 멸균된 음압 조직 배양 후드에서 인간 피부 샘플을 피부종을 준비합니다.
3. 피부 샘플을 표피 면이 위로 향하게 하여 ....

결과

그림 1 : 이종 이식 연구를 위해 채택된 프로토콜의 타임라인.

그림 2 : 수술 후 마우스에 붕대를 감는 방법. 마우스는 마취 상태에서 바셀린 거즈와 투명 필름 드레싱으로 단단히 감쌉니다. (A) 바셀린 거즈는 수술 상처보다 약간 큰 부위에 놓입니다. (B) 투명 필름 드레싱이 준비됩니다 : 긴 스트립이 바셀린 거즈보다 약간 넓게 절단됩니다. 투명 필름 드레싱의 접착면을 덮고 있는 뒷면이 부분적으로 제거되었습니다. (C) 필름의 접착면이 마우스 뒷면에 단단히 .......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
10% 중성 완충 포르말린	어부	재질 보기 SF100-20	조직학을 위한 정착제
3M Vetbond 티슈 접착제	3엠	1469SB	수술용 접착제
안티 GR1 클론 RB6-8C5	바이오엑스셀	BE0075	거부 방지
오토클레이브 파우치	폭스바겐	89140-800	오토클레이브 도구 및 종이 타월용
부프레넥스 0.3mg/mL	코브트러스	59122	무 통
카프로펜 50 mg/mL	조에티스	나다 # 141-199	무 통
D42 더마톰 블레이드	휴메카	5.D42BL10	Dermatome (샘플 당 1 개의 블레이드)
진피종 D42	휴메카	4.디42	피부종
일회용 메스	바드 파커	371610	피부 준비
T-핀 해부; 1-1/2인치, 1000/CS 1.5	콜-파머	UX-10915-03	dermatome를 위한 피부 견본을 핀으로 고정하기 위하여
해부 가위	메디콘	02.04.10	시료 전처리 및 마우스 해부
DNA제	시그마-알드리치	DN25-1지	피부 소화
전기 가위	켄트	CL8787-키트	제모
집게	메디콘	07.60.07	시료 전처리 및 마우스 해부
사	피셔브랜드	제22-362-178	시료 전처리
난방 램프	모건빌 사이언티픽	HL0100	수술 후 관리
가열 패드 4" x 10"	(주)프리스텍	20415	외과용 열 공급
인슐린 1cc 12.7mm 주사기	BD (영어)	329410	약국
이소플루란	미국 약전(USP)	확인서 66794-013-25	마취
이소플루란 기계	베트핍	911103	마취
남성을 위한 나이르	나이르	10022600588556	제모
Neomycin 및 Polymyxin Bisulfates 및 Bacitracin 아연 안과 연고	데크라	재질 보기 NDC 17478-235-35	건조를 방지하는 안연고
끄덕이다. Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ (NSG) 마우스	잭슨 연구소	5557	마우스
종이 타월	휴지	100848	멸균 표면을 위해 고압멸균
파라필름	피셔 사이언티픽	제13-374-12	반투명 밀봉 필름
페트리 접시 150mm	코 닝	430597	시료 보관
플라스틱 랩	피셔브랜드	Tel.22-305-654	현장 준비
프로비돈-요오드 면봉 스틱	PDI	S41350	사이트 살균
소프트 피드 및 구강 수분 공급(Napa Nectar)	Se 랩 그룹 Inc	NC9066511	수술 후 회복이 잘 되지 않는 마우스를 보충하기 위해
표본 수집 컵	피셔 사이언티픽	Tel.: 22-150-266	시료 보관
멸균 알코올 준비 패드	피셔브랜드	전화: 22-363-750	피부 준비
멸균 PBS	지브코	14190-144	시료 보관용 매체
멸균 식염수	호스피라	국회도서관 0409-4888-02	약물 희석용
Tegaderm 필름 4 "x 43/4"	3엠	1626	투명 필름 상처 드레싱
바셀린 바셀린 바셀린 거즈 3" x 8"	켄 달	414600	상처 드레싱

(영문) 호 년 년 가능 호 년 년