박테리아 병원체에 감염된 Ex vivo Ovine Wounded Skin 모델 생성

초록

출처: Regan, H. C., et al. 신흥 항생제 테스트를 위한 새로운 고처리량 생체 내 난소 피부 상처 모델. J. Vis. 특급. (2022).

이 비디오는 황색포도상구균에 감염된 생체 외 양피부 모델의 생성을 보여줍니다. 여기에는 양의 이마 피부 생검 부위를 항생제로 치료하고, 상처 부위를 확립하고, 무항생제 배지가 있는 멀티웰 플레이트의 투과성 멤브레인에 배치하고, 피부 상처에 박테리아 감염을 확립하는 것이 포함됩니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 살균

1. 깨끗한 집게를 가지고 200°C의 오븐에서 1시간 동안 건열 살균을 수행하여 머리를 수거하기 전에 집게를 소독합니다. 사용하기 전에 121°C에서 15분 동안 모든 유리 제품을 고압멸균합니다.
2. 미생물학 클래스 2 캐비닛 내에서 설명된 모든 작업을 수행하십시오. 제조업체의 지침에 따라 모든 시약을 준비하십시오.

2. 샘플 수집

1. 도살장에서 스웨일데일 양들은 전기나 포로 볼트 권총을 사용하여 기절시켜 도살하고 피를 흘렸습니다. 도축 후 4시간 이내에 양고기 머리를 수거하십시오.

3. 머리의 준비

1. 샘플 영역에 약 100mL의 200ppm 이산화염소 용액을 부어 양고기의 이마 부분을 소독합니다. 전기 이발기를 사용하여 머리의 이마 부분을 면도하고 200ppm 이산화염소 용액 200mL로 해당 부위를 씻습니다.
2. 에탄올과 블....

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
24 웰 컴패니언 플레이트	증권 시세	353504
4mm 생검 펀치	윌리엄스 메디컬	D7484
50ml 원심분리기 튜브	피셔 사이언티픽	10788561
8mm 바이옵시 펀치	윌리엄스 메디컬	D7488
암포테리신 B 용액, 멸균	시그마	A2942 (영어
컬러 프로 스타일 무선 이발기	왈	9639-2117엑스	이발기
듀얼 오븐 인큐베이터	증권 시세	오베1020	살균 오븐
표피 성장 인자	증권 시세	E5036-200UG
에탄올	니 웰	458600-2.5L
F12 햄	시그마	N4888
소 태아 세럼	랩텍 인터내셔널	캘리포니아-115/500
집게	피셔 사이언티픽	15307805
제모 크림	비트	해당 없음
헤라셀 VIOS 160i	써모 사이언티픽(Thermo Scientific	15373212	조직 배양 인큐베이터
헤레우스 메가퍼지 16R	폭스바겐	521-2242	원심 분리기
개별 24웰 0.4um 멤브레인 삽입	VWR 국제공항	353095
인슐린, 재조합 인간	증권 시세	91077C-1지
미디엄 199 (MK 미디어)	시그마	M0393
마이크로플레이트, 세포 배양 Costar 96 웰	피셔 사이언티픽	10687551
멀티트론	인포서	해당 없음	박테리아 인큐베이터
PBS 정제	시그마	P4417-100탭
페니실린-스트렙토마이신	증권 시세	P0781
플레이트 씰	피셔 사이언티픽	ESI-B-100
안전한 2020	피셔 사이언티픽	1284804	Class II 미생물학 안전 캐비닛
메스 칼날 번호 15	피셔 사이언티픽	O305
메스 스완 모튼	피셔 사이언티픽	11849002
중탄산나트륨	시그마	S5761-1KG
이가 있는 Allis 조직 집게	로시알레	RSPU500-322
트립틱 소이 브로스	Merck Life Science UK Limited (머크 생명 과학 영국 유한회사	41298-500지-F
Vimoba 정제	Quip 랩	VMTAB75BX

표시기 ) 표시기 표시기 ) 년 표시기 표시기 시리즈 )