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방법 논문
1.1K 조회수
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2025년 7월 8일
출처: Mao, X., et al. Neuronal Differentiation from Mouse Embryonic Stem Cells In vitro(생쥐 배아 줄기 세포의 신경 세포 분화) In vitro. J. Vis. 특급 (2020).
이 비디오는 신경 전구 세포를 뉴런으로 분화시키는 세포 배양 방법을 선보였습니다. 성장 인자로 보충된 영양이 풍부한 배지에서 세포를 배양함으로써, 전구 세포는 발달된 축삭돌기와 수상돌기를 가진 뉴런으로 성숙했습니다. 안정화제는 세포 생존력을 보장하고 분화 과정 전반에 걸쳐 산화적 손상으로부터 보호했습니다.
1. NPC에서 뉴런으로의 분화 (Phase II)
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표 1: 2단계 차별화에 사용되는 3가지 프로토콜에 대한 세부 정보.
| 차별화 단계 II (10d) | ||
| 프로토콜 | 미디어 | |
| 프로토콜 1 | 자연적으로 감별법: 기초 분화 매체로 I 만 | 기초 분화 매체 I: DMEM/F12 +15%FBS +1%NEAA +0.1mM 2ME+ 1%P/S |
| 프로토콜 2 | N2B27 매체 I를 사용한 차별화 | ... |
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| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 토끼에서 생성된 항β-Tubulin III 항체 | 시그마 알드리치 | T2200 | -80 °C에서 보관하고 동결 및 해동을 반복하지 마십시오. |
| B-27 보충제 (50X), 무혈청 | 지브코 | 17504044 | -20 °C에 저장하고, 빛에서 보호하십시오 |
| DME/F-12 1:1 (1x) | 하이클론 | SH30023.01ᄂ | 4 °C에서 보관 |
| 소 태아 세럼 | 하이클론 | SH30084.03 | -20 °C에서 보관하고 동결 및 해동을 반복하지 마십시오. |
| 형광 현미경 검사 | 올림푸스 | CKX53 | |
| 젤라틴 | 지브코 | CM0635B | 실온에서 보관 |
| 글루타맥스 보충제 | 지브코 | 35050061 | 4 °C에서 보관 |
| Immunol 염색 1차 항체 희석 완충액 | 베이오타임 | P0103 | 4 °C에서 보관 |
| 녹아웃 DMEM/F-12 | 지브코 | 12660012 | 4 °C에서 보관 |
| MEM 비필수 아미노산 용액 | 지브코 | 11140076 | 4 °C에서 보관 |
| N-2 보충제 (100X) | 지브코 | 17502048 | -20 °C에 보관하고 빛으로부터 보호하십시오 |
| 노멀 염소 세럼 | 잭슨 | TEL.005-000-121 | -20°C에서 보관 |
| Neurobasal 배지 | 지브코 | 21103049 | 4 °C에서 보관 |
| 접착성이 없는 세균 접시 | 코 닝 | 3262 | |
| 인산염 완충 식염수(1X) | 하이클론 | SH30256.01ᄂ | 4 °C에서 보관 |
| 페니실린/스트렙토마이신 용액 | 하이클론 | SV30010 | 4 °C에서 보관 |
| PD0325901(미르다메티닙) | 셀렉 | S1036 (영어 | -20°C에서 보관 |
| 레티노산 | 시그마 | R2625 | -80 °C에 보관하고 빛으로부터 보호하십시오 |
| Strain 129 마우스 배아 줄기 세포 | 시아겐 | 무아에스-01001 | 피더가 없는 배양 시스템으로 유지 |
| 2-메르캅토에탄올 | 지브코 | 21985023 | 4 °C에 보관하고 빛으로부터 보호하십시오 |
| 파라포름알데히드 4% | 베이오타임 | P0098 | -20°C에서 보관 |
| 6 - 웰 플레이트 | 코 닝 | 3516 | |
| 60mm 세포 배양 접시 | 코 닝 | 430166 | |
| 15ml 원심분리기 튜브 | 증권 시세 | 339650 |
