자동 와이어 Myography를 사용 Mesenteric 동맥 수축과 휴식 연구

요약

절연 mesenteric의 동맥에 힘 측정을위한 자동 myography 방법이 설명되어 있습니다. 그것은 phenylephrine 및 세포외 칼슘에 대한 답변을 결정하기 위해 510A Mulvany - Halpern 자동 듀얼 와이어 Myograph을 사용합니다. 300 μm의, 독립적으로 - 방법은 60 직경의 작은 선박에 agonists에 사시 응답 일관성있는 결정 수 있습니다.

초록

같은 mesenteric 동맥으로 근위 저항 선박, 주변 저항에 크게 기여하고 있습니다. 주로 신체의 전반적인 요구 사항에 따라 여러 기관에 혈액 흐름을 감독의 직경 기능에 100-400 μm의 사이의 이러한 작은 선박. 쥐 mesenteric 동맥은 100 μm의보다 큰 직경있다. 첫째 Mulvay 및 Halpern ¹ 설명한 myography 기술은, Bevan 및 ^Osher이 제안한 방법을 기반으로했다. 기술은 근육 준비 상당한 단축을 방지합니다 사시 조건에 따라 소형 선박에 대한 정보를 제공합니다. 다른 agonists에 선박의 강제 생산과 감도가 활성 긴장 길이 관계에 의하면, 스트레치의 정도에 따라 있기 때문에, 그것은 장착 전선의 준수를 방지하기 위해 사시 조건 하에서 수축 연구를 수행하는 것이 필수적입니다. 스테인레스 스틸 와이어 때문에 기록된 응답 ³ 영향을 후자의 산화의 텅스텐 와이어로 선호하고 있습니다. 기법은 혈관 평활근 세포 수용체의 정상적인 기능에 대한 증거를 얻기 위해 탑재된 혈관 작용제 유도된 수축의 비교를위한 수 있습니다.

우리는 phenylyephrine와 계약 격리 mesenteric 동맥은 세포외 칼슘의 누적 농도 (CA ^{2 +} _E)를 추가시 휴식 여러 연구에 표시합니다. 결과는 우리가 G 단백질 결합 칼슘 ^{2 +} 감지 수용체 (자동차)를 표현하는 것을 perivascular 감각 신경을 빠졌다는 생각이 들어서,이 vasorelaxation 응답을 중재. 자동 와이어 myography 방법을 사용하여, 우리는 Wistar, 달 소금에 민감한 (DS)와 달 소금 방지 (DR)에서 mesenteric 동맥이 쥐이 칼슘 ^{2 +} _전자에 다르게 반응 여기에 표시됩니다. Wistar의 쥐에서 조직은 ⁺ - 감도 DR 및 DS에서 이들에 비해 높은 ^{칼슘이 보여주었다.} DS 쥐에서 mesenteric 동맥의 감소 자동차 표현이 감소 ^칼슘이 절연, 사전 계약 동맥 ⁺ _전자 유도 휴식과 연결합니다. 데이터는, 자동차가 증가 아드레날린 톤 미만 mesenteric 동맥의 이완을 위해 필요하다고 제안하는 등 고혈압의 발생, 그리고 훨씬 더 심각한 DS에 달 동물의 자동차 신호 경로에 내재된 결함을 나타냅니다.

방법 mesenteric 저항 동맥과 다른 agonists 및 / 또는 antagonists 사이에 유사한 작은 혈관과 비교의 혈관 반응의 전의 생체내을 결정하는 데 유용 것은 나란히 ^6,7,8을 평가 쉽고 지속적으로 수 있습니다.

프로토콜

1. 쥐 mesenteric 작은 동맥의 분리

1. 닫힌 실내에서 isoflurane과 동물을 마취하고 알코올로 복부를 닦아냅니다.
2. mesenteric 침대를 폭로하기 위해 중간 라인 개복술을 수행합니다.
3. 가위를 사용하여 뛰어난 mesenteric 동맥과 vasculature 먹이와 소장의 약 85 cm를 제거합니다. 가까운 pylorus에 창자 섹션 ileo - coecal 교차점 근처 말초 엔드의 근위 끝을 잘라. 대장의 세그먼트 오픈 흉부 심장 관통하여 isoflurane과 euthanized와 깊이 anesthetized 아르 쥐에서 격리됩니다.
4. PSS를 포함하는 코팅 배양 접시에있는 excised 섹션을 배치하고 실온에서 mesenteric 동맥의 해부를 수행하십시오.
5. 오른쪽에있는 소장의 근위 끝을 아래로 핀과 intestineina 시계 반대 방향으로 방향의 나머지 부분 (대장의 반대편 왼쪽 먹이 vasculature에 ieproximal 끝)을 핀.
6. 근위 세그먼트의 일부와 함께 지점 II 및 III 세그먼트를 해부하다.
7. 정맥을 절개하다하고 동맥을 분리 (V - 모양의 분기점)와 지방과 결합 조직을 제거하여 청소. 포셉로 부드럽게 당기 및 결합 조직의 세포막을....

토론

고혈압, 심혈관 및 신장 뇌성 병적 상태 / 사망률의 주요 원인이다. 고혈압의 발생은 인구의 높은 소금에 민감한 고혈압은 고령화에 특히 높은, 그리고 백인보다 흑인에서 더 유행이다. 이것은 자신의 신장 ⁹ 나트륨을 유지하는 흑인의 경향에 의한 것으로 생각됩니다. 소금 감도는 신장 질환의 주요 기여 요인이며 내피 기능 장애와 관련된 있지만 메커니즘은 완전히 이해되지 않습니다. 저희 연구실의 최근 연구는 높은 소금 다이어트는 칼슘 ^{2 +} 농도 ([칼슘 ^{2 +]} _IF) 중간 액을 감소하고, 소금에 민감한 쥐 ^10,11에서 수축기 혈압을 증가하는 것으로 나타났습있다. 이러한 효과는 새로운 치료법의 개발을위한 목표를 제공할 수 mesenteric 동맥과 소금에 민감한 신경성 환자의 자동차 수준에서 유사한 감소를 kidneys.Finding의 자동차의 감소 표현으로 표시될 수 있습니다. 우리는 차가 vasculature에서 신호의 메커니즘을.......

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
장비 / 시약의 이름	회사	카탈로그 번호	댓글 (옵션)
자동 듀얼 와이어 Myograph 시스템 - 510A DMT - 미국, 주식	아틀란타, GA.	100151
PowerLab/4SP 데이터 수집 시스템	ADInstruments, 콜로라도 스프링스, (주)	ML750	4-16 입력 채널과 새로운 모델을 사용할 수 있습니다.
델 디멘션 XPS 세대 4 컴퓨터	작은 골짜기
Stemi SV II (APO) 안구와 해부 현미경	칼 자이스 혈구 국제.
Wistar, 달 소금에 민감한, 달 소금 방지 쥐	IN 할렌 스프 Dawley, 인디애나.
설치류 초	Harland Tekland, 매디슨, WI.
Phenylephrine	시그마 - 올드 리치, 세인트 루이스, MO.
기타 화학 제품			사용된 모든 화학 물질 상업적으로 사용할 수있는 순수한 성적했다.