마우스 모델에서 Theta Oscillations의 선택적 조작

초록

출처: Bender, F. et al., 행동하는 생쥐에서 해마 세타 진동의 광유전학적 동반. J. Vis. 특급 (2018)

이 비디오는 GABAergic 내측 중격 뉴런에 빛에 민감한 이온 채널이 있는 유전자 조작 마우스 모델에서 세타 진동을 조절하는 프로토콜을 보여줍니다. 이 프로토콜은 광 펄스를 해마에 전달함으로써 뉴런 활동을 동기화하고 국소 자기장 전위로 기록되는 세타 진동을 생성하는 것을 목표로 합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

PV-Cre 넉인 수컷 마우스, 10-25 주를 사용했습니다. 생쥐는 동물 시설의 표준 조건에서 수용되었으며 12 개의 빛 / 어두운 주기로 유지되었습니다.

1. LFP 녹음을위한 텅스텐 와이어 어레이 준비

1. 하나의 광섬유를 와이어 어레이에 붙여서 광섬유의 끝이 가장 짧은 와이어 수준에 있고 섬유 팁이 가까이 있지만 텅스텐 와이어에 닿지 않도록 합니다. 이식 중 조직 손상을 방지하기 위해 섬유의 각도를 가능한 한 작게 유지하십시오.

2. 광유전학적 자극 및 전기생리학적 데이터 수집

1. 패치 코드의 광 출력을 확인하십시오. 이식된 광섬유의 투과율에 따라 연결 후 광섬유 팁에서 출력되는 광을 추정합니다. 파이버 팁의 광 출력이 5-15mW 사이인지 확인하여 안정적인 동반을 가능하게 합니다.
2. 헤드스테이지 프리를 연결하십시오.amp만성적으로 이식된 커넥터에 liifier. 광유전학적 자극 실험을 위해 만성적으로 이식....

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
PV-Cre 마우스	잭슨 연구소	나6; 129P2-PVALBTM1(cre)Arbr/J
473nm DPSS 레이저	Laserglow Technologies, 토론토, 온타리오, 캐나다	R471005FX	LRS-0473 시리즈
593nm DPSS 레이저	레이저글로우 기술	R591005FX	LRS-0594 시리즈
MC_Stimulus II	Multichannel Systems, 독일 로이틀링겐	재질 보기 STG 4004
텅스텐 와이어	California Fine Wire Company, 그로버 비치, 캘리포니아, 미국	CFW0010954	40 μm, 99.95%
헤드스테이지	Neuralynx, Bozeman, 미국 몬태나	고등학교-8	소형 헤드스테이지 Unity 게인 프리앰프
발광 다이오드	뉴럴릴스	HS-LED-레드-옴니-10V
MATLAB을	Mathworks, Natick, MA, 미국
MC_Stimulus 소프트웨어	다중 채널, 시스템
다중 모드 광섬유	ThorLabs, 독일 다하우	FG105LCA	0.22 NA, Low-OH, Ø105 μm 코어, 400 - 2400 nm
다중 모드 광섬유 커플러	쏘랩스	FCMM50-50A-FC	1x2 MM 커플러, 50:50 분할 비율, 50 μm GI 파이버, FC/PC

참조하십시오.