다전극 배열을 사용한 병아리 배아 신경망 발달에 대한 독소의 영향 평가

1. 뉴런 네트워크 활동 기록

1. 획득 당일, 배양 배지를 새로운 neurobasal 배지로 교환하고 기록하기 전에 최소 2시간 동안 MEA를 CO₂ 인큐베이터에 반환합니다. 기록 소프트웨어를 시작하고 온도 아이콘을 클릭하여 MEA의 온도를 37°C로 설정합니다.
   메모: 기록은 도금 3일차부터 시작할 수 있으며 배양이 살아 있는 한 계속될 수 있습니다.
2. "Muse" 아이콘(왼쪽 창 패널의 스트림 아래)을 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 "Add Processing" 및 "Spike Detector"를 선택한 다음 팝업 창에서 OK를 클릭하여 획득 매개변수를 설정합니다."Spike Detector (6 x STD)"가 파일 이름 아래에 나타납니다.
3. 그런 다음 스파이크 감지기를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 "처리 추가" 및 "버스트 감지기"를 선택한 다음 팝업 창에서 확인을 클릭합니다. "버스트 감지기"(ISI)가 Muse 아이콘 아래에 나타납니다.
4. 그런 다음 Burst Detector를 마우스 오른쪽 버튼으로 클릭하고 "Add Processing" 및 "Neural Statistics Compiler"를 선택합니다.팝업 창에서 File Header, Aggregated Well Statistics 및 Synchrony가 선택되어 있는지 확인합니다. 확인을 클릭합니다. 아래에 "Statistics Compiler"가 나타납니다.
   메모: 이렇게 하면 적응형 임계값 교차(6x STD 필터), 100ms의 스파이크 간 간격과 최소 스파이크 수가 5, 20ms의 동기화 매개변수로 10초의 평균 발사 속도 감지, 분당 0.083333 스파이크의 최소 스파이크 속도가 설정됩니다.
5. 하단의 시계 아이콘을 클릭하여 녹화 시간을 5분(300,000ms)으로 예약 녹화합니다. 이는 설정 섹션의 정보를 5.1분마다 기록하고 5분 동안 기록하도록 변경하여 달성됩니다. 이 작업은 즉시 시작되고 한 번 실행됩니다.
6. MEA를 이동하기 전에 MEA의 온도가 37°C에 도달했는지 확인하십시오. 인큐베이터에서 MEA를 제거하고 기록 장치에 놓고 MEA를 잠급니다. 예약 녹화 섹션에서 녹화 시작 또는 "파일 재생" 창에서 녹화 아이콘을 클릭하여 네트워크 활동 녹화를 시작합니다. 일반적으로 5분(300,000ms)의 기록 시간이면 충분하지만 최대 10분의 더 긴 기록을 얻을 수 있습니다.
7. 기록 후 MEA를 인큐베이터로 반환합니다.
   메모: 멸균 상태를 유지하고 MEA가 인큐베이터 외부에 있는 시간을 최소화하기 위해 주의를 기울여야 합니다.