마우스 뇌에 외상성 뇌 손상 전달

초록

출처: Zhong, J., et al. 이광자 현미경을 사용한 폐쇄형 두개골 외상성 뇌 손상 및 두개골 창이 있는 마우스에서 형광 단백질 발현의 생체 내 이미징. J. Vis. 특급 (2023)

이 비디오는 마우스의 외상성 뇌 손상(TBI)을 보여줍니다. 두개골을 노출시킨 후 TBI 부위를 표시합니다. 그런 다음 마우스가 TBI 장치 아래에 위치합니다. 충격은 금속 막대를 들어 올려 두개골과 접촉하는 임팩터에 자유롭게 떨어뜨릴 수 있도록 함으로써 전달됩니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 반복적 외상성 뇌 손상(TBI) 유도 투여

참고: TBI 매개변수는 TBI 영향이 한 번 전달된 이전 보고서에서 조정되었습니다. 여기서 프로토콜은 총 영향 수를 10으로 늘리는 것을 제외하고 동일한 매개 변수를 적용합니다.

1. TBI 장비
   1. 주문 제작된 휴대용 장치를 사용하여 그림 1B와 같이 오른쪽의 마우스 헤드에 닫힌 두개골 TBI(그림 1A)를 관리합니다.
2. 수술 전 준비 사항
   1. 일반 가위, 수술용 캘리퍼스, 수술용 스프링 가위, 수술용 겸자, 모기 집게, 헤드포스트 조각, 거즈 및 면 팁 애플리케이터를 포함한 오토클레이브 수술 장비.
   2. 수술 2시간 전에 마우스의 체중을 측정하고 기록합니다. 두개골 창 이식 중 뇌부종을 최소화하기 위해 인슐린 주사기를 사용하여 덱사메타손 인산나트륨을 4.8mg/kg[2mg/mL, 보통 ~70μl(두 부위에 ....

결과

그림 1: TBI 장치, TBI 영향 부위 및 창 준비에 대한 다이어그램. (A) 중량 강하 TBI 장치용 장비. 1: 받침대, 2: 브래킷, 3: 조정 가능한 클램프, 4: 나일론 스트링, 5: 중량 낙하 터널, 6: 금속 중량 기둥(50g), 7: 임팩터, 8: 버퍼 쿠션. (B) 바이러스 주입 및 TBI 충격 부위의 개략도, 좌표는 브레그마 뒤쪽 2.5mm, 시상 봉합선에서 오른쪽 측면 2mm입니다. (C) 유리창을 준비하기 위한 개략도. 3mm 및 5mm 직경의 두 개의 유리 커버 슬립이 광학 접착제를 사용하여 결합됩니다. (D) 금속 헤드 포스트 및 이미징 우물의 사진.

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재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
조정 가능한 정밀 어플리케이터 브러시	파켈	S379
BD 인슐린 주사기	BD (영어)	NDC/HRI#08290-3284-38	5/16 인치 x 31G
베타딘	퍼듀	NDC67618-151-17	포비돈 요오드 7.5% 포함
부프레노르핀	PAR 제약	표준편차 42023-179-05
에토날	피셔 사이언티픽	04355223EA	75%
난방 장치	증권 시세	TC-1000 마우스	입체 기구를 장착하여 수술 중 사용
난방 담요	CVS 약국	E12107	여분의 가열 장치 및 수술 후 사용
윤활제 안연고	피케탈	재질 보기 NDC 46066-753-55
마커 펜	델라스코	SMP-BK
모기 집게	캐롤라이나	상품 #:625314	스테인리스 스틸, 곡선형, 5인치
제모제	맥케슨 코퍼레이션	해당 사항 없음	Nair 헤어 알로에 & 라놀린 제모 로션
일반 가위 1	유로스탯(Eurostat)	유로스타트 ES5-300
일반 가위 2	세계적인 정밀 기기	번호 501759-G
생리	바이오월드	L19102411PR
봄 가위 1	세계적인 정밀 기기	번호 91500-09	팁 스트레이트
봄 가위 2	세계적인 정밀 기기	번호 91501-09	팁 스트레이트
Stereotaxic 플랫폼	코프	모델 900LS
수술용 겸자 1	전자 현미경 과학	캣로그# 0508-5/45-PO	스타일 5/45, 곡선
수술 겸자 2	전자 현미경 과학	catlog# 0103-5-PO	스타일 5, 스트레이트
외과 겸자 3	전자 현미경 과학	캣로그# 72912
수술 겸자 4	전자 현미경 과학	캣로그# 0508-5/45-PO	스타일 5/45, 곡선
수술용 램프	라이카	라이카 KL300 LED
Vetbond 티슈 접착제	3M 동물 보호	부품 번호:014006

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