신경병리학

뇌 위축을 감지하려면 다양한 연령대의 신경퇴행성 마우스 모델에서 탈파라핀화된 뇌 단면을 운반하는 슬라이드로 시작하십시오.

이러한 NP를 시각화하려면 탈파라핀화되고 고정된 인간 뇌 절편을 취하십시오.

이중 증류수를 추가하여 섹션을 씻으십시오.

조직을 오스뮴 테트록사이드로 처리하여 리포푸신을 포함한 세포 구조를 안정화합니다.

조직을 균질화하여 단백질을 완충액으로 방출합니다. 프로테아제 억제제는 프로테아제 활성을 차단하여 단백질 분해를 방지합니다.

세제, 환원제 및 추적 염료가 포함된 로딩 버퍼를 추가합니다.

단백질 분해 효소로 배양하여 정상적인 프리온을 소화하고 저항성 응집체는 그대로 둡니다.

과산화수소 용액으로 배양하여 내인성 과산화효소를 억제하고 비특이적 염색을 방지합니다.

이 부분에는 신경섬유다발(neurofibrillary tangles)이 포함되어 있는데, 이는 해마 뉴런 내에서 발견되는 타우 단백질의 비정상적인 응집체입니다.

헤파란 설페이트를 시각화하려면 아밀로이드 플라크를 포함하는 병든 인간 해마 조직 절편부터 시작합니다.

샘플을 원심분리하여 세포 파편을 펠릿화하고 상층액을 수집합니다.

이 프로토콜은 신경암 세포에서 단백질을 추출하는 방법을 설명합니다. 세포는 완충액으로 세척되고 효소 및 기계적 파괴를 통해 용해됩니다. 추출된 단백질이 풍부한 상등액은 원심분리 후 회수됩니다.

이 비디오는 현미경 검사를 위해 쥐 피질 뉴런을 형광 염색하는 절차를 보여줍니다. F-액틴 및 수지상 단백질을 표적으로 하여 구조적 무결성을 분석하고 신경 기능과 건강을 연구하는 데 중요한 F-액틴 밀도를 계산합니다.

이 비디오는 비아밀로이드 단백질의 밀도 구배 원심분리 및 분해를 사용하여 마우스 뇌 조직 추출물에서 아밀로이드 원섬유를 분리하는 프로토콜을 보여줍니다.

이 비디오는 마우스의 1차 소뇌 과립 뉴런에서 ROS(Reactive Oxygen Species)를 사용하여 뉴런 손상 모델을 생성하는 방법을 간략하게 설명합니다. 고농도의 과산화수소를 첨가하여 산화 스트레스를 유발하는 과정을 자세히 설명합니다. ROS 노출은 DNA 가닥 단절과 게놈 불안정성을 유발합니다. 또한 세포 단백질의 산화는 기능을 손상시키고 지질 과산화는 멤브레인 무결성을 손상시킵니다. 이 연쇄 반응은 사이토크롬 c 방출 및 카스파아제 활성화로 이어져 신경 세포 사멸을 초래합니다.

이 비디오는 미세아교세포를 사용하여 나노 입자의 신경독성 효과를 평가하는 방법을 보여줍니다. 나노 입자로 미세아교세포를 활성화하고, 조절된 매체를 필터링하여 미세아교세포 유래 전염증성 사이토카인을 분리하고, 조절된 배지로 시상하부 뉴런 독성을 테스트하는 단계를 간략하게 설명합니다.

이 비디오는 기계적 손상을 통해 초파리 유충 분절 신경에 신경 퇴화를 유도하는 방법을 보여줍니다. 마취된 유충의 복부 표피는 집게를 사용하여 꼬집어 분절 신경에 손상을 입힙니다. 다친 유충은 음식으로 유지되며, 이로 인해 신경의 운동 뉴런이 퇴화되어 신경근 접합부(NMJ)가 파괴될 수 있습니다.

이 비디오는 신경독 6-하이드록시도파민(6-OHDA)을 뇌에 주입하여 파킨슨병의 쥐 모델을 만드는 절차를 보여줍니다. 내측 전뇌 다발(MFB)에 주입된 신경독은 운동 조절을 담당하는 도파민 뉴런을 특이적으로 표적으로 삼아 파괴하고 파킨슨병 증상을 복제합니다.

이 비디오에서는 인간 배아 줄기 세포를 신경 오가노이드로 만드는 단계적 프로토콜을 보여줍니다. 이 방법은 신경 로제트 형성을 유도한 다음 조절된 성숙 및 소수성 막에서 최종 배양하여 완전히 발달된 신경 오가노이드를 달성하는 것을 포함합니다.

이 비디오는 파킨슨병 연구를 위한 모델을 제공하기 위해 인간 배아 줄기 세포(hESC)를 도파민 뉴런으로 분화하는 방법을 보여줍니다. hESC는 마이크로웰 플레이트의 신경 유도 매체에서 배양되어 3D 신경구를 형성합니다. 그런 다음 이들은 도파민 전구 뉴런으로의 분화를 촉진하기 위해 신경 유도 배지에서 배양됩니다. 뉴런의 최종 성숙은 공기-액체 계면 조건의 배양 삽입물에서 발생하여 성숙한 도파민 뉴런으로 구성된 3D 오가노이드가 생성됩니다.

이 비디오는 아밀로이드 β(Aβ) 응집체에 의한 신경 성장 원뿔 붕괴의 체외 평가를 보여줍니다. 뉴런을 Aβ 응집체로 처리하면 세포골격 불안정화가 발생하여 축삭돌기 끝에 있는 성장 원뿔이 붕괴됩니다. 성장 원뿔의 붕괴 정도를 평가하기 위해 처리된 세포를 대조 세포와 비교합니다.

이 비디오는 MALDI-IMS(Matrix-assisted Laser Desorption/Ionization Imaging Mass Spectrometry)를 사용하여 아밀로이드-베타(Aβ) 펩타이드의 침착을 분석하기 위해 알츠하이머병 환자의 인간 피질 뇌 절편을 준비하는 절차를 보여줍니다. 단계에는 슬라이드 준비, 이온화를 강화하기 위한 조직 처리, 아밀로이드-베타 펩타이드의 공간 분포 분석이 포함됩니다.

이 비디오는 알파-시누클레인(αS) 응집체로 처리된 뉴런의 면역 염색을 보여줍니다. 뉴런은 먼저 αS 응집체로 처리됩니다. 그런 다음 고정, 투과화 및 차단 용액으로 처리됩니다. 1차 항체가 추가되고, 그 다음에 형광 표지된 2차 항체와 핵 염색이 추가됩니다. 그런 다음 샘플을 장착하고 현미경으로 관찰합니다.

이 비디오는 레이저 손상을 사용하여 성인 제브라피시의 망막 변성을 유도하는 절차를 보여줍니다. 레이저는 망막의 광수용체 세포를 표적으로 삼아 세포 사멸과 퇴행성 과정을 유발합니다. 이 손상은 뮐러 신경교세포(MG) 세포를 활성화하여 망막 재생을 돕는 줄기세포 전구세포로 역분화시킵니다.

이 비디오는 알츠하이머병에서 볼 수 있는 신경 손상을 모방하여 아밀로이드 독성을 생성하기 위해 성인 제브라피쉬의 전뇌에 단량체 아밀로이드 펩타이드를 주입하는 절차를...

이 동영상은 cAMP(cyclic adenosine monophosphate) 바이오센서 및 발광 검출을 사용하여 형질 주입된 세포에서 냄새 수용체 활성화를 측정하는 프로토콜을 보여줍니다. 이 방법은 후각 뉴런의 수용체-리간드 상호 작용 및 신호 경로를 연구하는 데 적용됩니다.

이 동영상은 해마 부위의 독성 아밀로이드 플라크 형성을 총체적으로 돕는 아밀로이드-베타 펩타이드, 염화알루미늄 및 신경염증 성장 인자를 주입하는 절차를 보여줍니다. 이것은 쥐에게 알츠하이머병의 특징인 기억력 장애를 일으킵니다.

이 비디오는 알츠하이머병의 마우스 모델을 확립하기 위해 아밀로이드 베타를 치상회에 정확하게 입체적으로 주입하는 방법을 보여줍니다. 정확한 좌표 결정과 아밀로이드 베타 단백질의 제어된 전달은 신경 세포 분해를 초래하여 기억 처리를 방해하고 알츠하이머병 발병에 기여합니다.

이 비디오는 신경 염증을 유도하기 위해 알파-시누클레인 피브릴을 마우스에 주입하는 방법을 보여줍니다. 원섬유는 돌연변이된 알파-시누클레인 단백질을 발현하는 형질전환 마우스에 복강내로 주입됩니다. 중추신경계에 도달하면, 원섬유는 뉴런으로 들어가 돌연변이된 단백질의 응집을 유도합니다. 응집체는 인접한 뉴런, 미세아교세포 및 성상세포로 퍼집니다. 응집체의 인식은 미세아교세포를 유발하여 신경 염증을 유발하여 뉴런을 손상시킵니다.

이 비디오는 적색 형광 단백질로 표지된 프리온 유사 단백질을 발현하는 예쁜꼬마선충의 생체 내 이미징 절차를 보여줍니다. 이 프로토콜은 타임 랩스 컨포칼 현미경 검사를 위해 아가로스 패드에 선충을 고정시켜 세포 내부 및 세포 간 단백질 응집 및 이동을 밝히는 것입니다. 이 기술은 neurodegenerative 질병과 관련있는 단백질 응집을 공부하기를 위해 결정적입니다.

이 비디오는 파킨슨병을 모델링하기 위해 쥐의 흑질에 바이러스 벡터를 주입하는 과정을 보여줍니다. 쥐를 준비하고, 바이러스 벡터를 흑질에 미세주입하는 단계와 회수 절차를 간략하게 설명합니다.

이 비디오는 냉동된 사후 인간 뇌 조직에서 세제 불용성 단백질 응집체를 분리하고 농축하는 과정을 설명합니다. 이는 균질화, 세제 처리, 초음파 처리 및 초원심분리를 포함한 주요 단계를 보여주어 불용성 응집체를 분리하고 정제합니다. 마지막 단계는 추가 분석을 위해 요소 완충액에서 응집체를 용해하는 것입니다.

이 비디오는 유전자 변형 초파리 뇌에서 단백질 응집체의 이미징 및 정량화를 보여줍니다. 뇌는 장착하기 전에 고정, 세척 및 페이딩 방지제로 처리됩니다. 이미지는 컨포칼 현미경을 사용하여 캡처하고 정량화하여 돌연변이 단백질 응집체의 전달을 관찰합니다.

이 비디오는 면역형광을 사용하여 정상 및 식이 유도 비만(DIO) 성인 제브라피시 뇌 조직에서 오렉신과 카나비노이드 수용체의 공동 국소화를 조사하기 위한 프로토콜을 보여줍니다.

이 비디오는 알파-시누클레인 미리 형성된 섬유로 전처리된 배아 마우스 도파민 뉴런에서 알파-시누클레인 축적을 정량화하는 과정을 보여줍니다. 면역 형광을 사용하여 알파-시누클레인 응집체를 포함하는 도파민 뉴런을 고정, 염색 및 정량화하는 단계를 설명합니다.

이 비디오는 형량 펩타이드 분석을 사용하여 공포에 질린 쥐의 뇌와 대조군의 뇌에서 측면 편도체의 다양한 세포 내 구획에서 프로테아솜 활성을 측정하는 방법을 보여줍니다. 프로테아좀은 형광 펩타이드 기질을 절단하여 형광 분자를 방출하며, 이 분자는 핵 및 시냅스 단백질 분획에서 프로테아솜 활성을 평가하기 위해 플레이트 리더를 사용하여 정량화됩니다. 핵 활동이 증가하면 유전자 발현의 변화가 일어나고, 시냅스 활동이 감소하면 장기 기억 유지에 필요한 단백질 안정화를 나타냅니다.

이 비디오는 도파민 전환 억제제와 함께 레보도파를 투여하여 파킨슨병 쥐 모델에서 레보도파에 의한 운동이상증을 유발하는 과정을 보여줍니다. 반복적인 주사는 뇌 뉴런을 과도하게 자극하여 운동 기능 장애를 일으킵니다.

이 비디오는 안와하신경을 결찰하여 쥐 모델에서 구강안면 신경병성 통증을 유도하는 방법을 보여줍니다. 그 결과 신경 손상과 염증이 발생하여 비정상적인 통증 신호를 유발하고 만성 통증 상태를 모방할 수 있으며, 이는 구강 안면 통증 분석을 연구하는 데 사용할 수 있습니다.

이 비디오는 노화 세포에서 증가하는 베타-갈락토시다아제 활성을 염색하여 피질 오가노이드 절편에서 노화 뉴런을 감지하는 방법을 보여줍니다. 이 효소는 기질을 절단하여 파란색 산물을 생성하고, 이어서 염색된 뉴런을 현미경으로 관찰합니다.

이 비디오는 2점 Lysophosphatidylcholine(LPC) 주입을 사용하여 국소 탈수초화 마우스 모델을 생성하는 방법을 보여줍니다. 마취된 쥐의 두개골이 노출되어 있습니다. 주입 좌표가 결정되고 대상 부위에서 LPC 주입이 가능하도록 구멍을 뚫습니다. LPC는 염증을 통해 뉴런의 국소 탈수초화를 유도하며, 2점 주입은 지속가능성을 보장합니다.

이 비디오는 쥐 해마 절편에서 바이오사이틴으로 채워진 인터뉴런을 시각화하는 과정을 보여주며, 특정 항체 및 형광 현미경을 사용하여 신경화학적 정체성을 강조합니다.

이 비디오는 직장 흡입 생검 절편에서 S-100 단백질의 면역조직화학적 염색을 보여줍니다. 항원 채취 절편을 차단하고 1차 항체로 치료한 후 히르슈스프룽병의 지표인 S-100에 대한 2차 항체를 투여합니다. 발색 기질(chromogenic substrate)을 첨가하여 표적 세포를 염색합니다. 샘플은 현미경으로 시각화하기 전에 탈수 및 장착됩니다.

이 비디오는 리솔레시틴 주사를 사용하여 마우스 척수 뉴런에서 탈수초화를 유도한 후 희소돌기아교세포 전구세포의 이동 및 분화를 통해 재수초화를 유도하는 방법을 보여줍니다. 이 과정은 신경 세포 신호 전달을 손상시킨 다음 점차적으로 복원합니다.

이 비디오는 단백질 응집을 연구하기 위해 노란색 형광 단백질(YFP)로 태그된 돌연변이 인간 타우 단백질을 인코딩하는 렌티바이러스로 인간 신경 세포를 transduction하는 과정을 보여줍니다. 이는 바이러스 진입에서 돌연변이 타우 발현까지의 단계를 간략하게 설명하며, 뉴런에서 눈에 보이는 세포질 타우 응집체의 형성으로 절정에 이릅니다.

이 동영상은 미토콘드리아 호흡 사슬 복합체, 미토콘드리아 DNA 관련 단백질 및 미토콘드리아 외막 단백질에 대한 항체로 신경 세포를 라벨링한 후 유세포 분석을 통해 그 수준을 정량화하는 방법을 보여줍니다.

이 비디오는 테트라사이클린 유도 시스템을 사용하여 유전자 변형 인간 세포에서 γ-secretase 활성을 측정하는 절차를 보여줍니다. 이 과정에는 테트라사이클린으로 APP 유전자 발현을 유도하고, 아밀로이드 β 펩타이드를 생성하고, 루시페라아제 생산을 활성화하는 것이 포함됩니다. 그런 다음 루시퍼라제-기질 반응으로 인한 생물 발광을 측정하여 γ-secretase 활성을 반영합니다.

이 프로토콜은 마우스 뇌 절편에서 유전자좌 coeruleus 영역을 식별하기 위해 면역조직화학을 사용하는 방법을 설명합니다. 녹색 형광단 표지 항체로 도파민 β-하이드록실라제를 표적으로 삼음으로써, 노르에피네프린 생성 뉴런은 현미경에서 녹색 형광으로 시각화됩니다.

이 동영상은 미세 투석 프로브를 사용하여 마우스 뇌의 간질액(ISF)에서 세포 외 단백질을 수집하는 과정을 보여줍니다. 고분자량 컷오프 반투과성 멤브레인이 장착된 미세 투석 프로브는 이식된 가이드 캐뉼라를 통해 마취된 마우스의 뇌에 삽입됩니다. 펌프에 연결된 프로브는 생리학적 완충액이 뇌 조직을 관류하고 ISF와 혼합할 수 있도록 합니다. ISF의 단백질은 반투과성 멤브레인을 통해 확산되고 분석을 위해 수집됩니다.

이 영상은 반복적인 고정을 통해 마우스의 만성 스트레스를 유발하여 코르티코스테론이 분비되고 뉴런의 글루타메이트 수용체 활성을 감소시켜 우울증과 유사한 행동을 유발하는 방법을 보여줍니다.

이 비디오는 신경 퇴행을 모방하기 위해 신경독성 펩타이드로 쥐의 뇌 반조각을 준비하고 치료하는 절차를 보여줍니다. 이 프로토콜은 동일한 해부학적 평면에서 대조군과 처리된 절편을 직접 비교하여 신경퇴행성 사건을 분석할 수 있습니다.

이 비디오는 형질주입된 등뿌리 신경절 세포를 사용하여 신경펩타이드 수용체 작용제로 신경전달물질 방출을 자극하여 신경전달물질 방출을 연구하는 방법을 보여줍니다.

이 비디오는 마우스 뇌 절편의 Meynert 영역의 핵 기저부에 있는 콜린성 섬유의 면역조직화학적 염색을 보여줍니다. 절편을 차단하고 콜린 아세틸전이효소에 대한 1차 투여한 후 비오틴화된 2차 항체를 투여합니다. Avidin-biotin-peroxidase 복합체가 추가되어 2차 항체에 결합한 다음 발색 기질에 결합합니다. 그런 다음 단면을 탈수하고 장착한 후 현미경으로 시각화합니다.

이 비디오는 쥐의 뇌에서 채취한 시냅토솜의 도파민 흡수 평가를 보여줍니다. 도파민 수송체를 통한 도파민 흡수를 위해 시냅토솜을 준비하고, 다양한 농도의 방사성 표지된 도파민으로 처리하고, 시냅토솜을 분리하고, 도파민 흡수를 정량화하기 위해 방사능을 측정하는 단계를 간략하게 설명합니다.

이 비디오는 바이오사이틴으로 채워진 중간뉴런을 포함하는 고정된 쥐의 뇌 절편을 염색하는 절차를 보여줍니다. 이 프로토콜에는 아비딘-비오틴 복합체(ABC)를 사용한 배양, HRP 및 발색 기질로 염색, 사산화오스뮴으로 구조 보존, 이미징을 위해 조직을 수지에 삽입하는 것이 포함됩니다.

이 비디오는 세로토닌 증후군의 영향을 받는 쥐의 뇌 조직에서 올리고뉴클레오티드 프로브를 사용하여 세로토닌 수용체 RNA 합성을 감지하는 방법을 보여줍니다. 이 프로토콜에는 조직 전처리, 프로브 혼성화 및 효소 검출이 포함되어 현미경으로 세로토닌 수용체 RNA 발현을 시각화하고 정량화합니다.

이 비디오에서는 마우스 소뇌 절편을 사용하여 운동 제어에 필수적인 평행 섬유, 등반 섬유 및 Purkinje 세포 간의 시냅스 상호 작용을 조사했습니다. 등반 섬유의 자극은 Purkinje 세포에 장기 우울증(LTD)을 유발하여 시냅스 강도를 약화시키고 평행 섬유 자극에 대한 반응을 감소시켰습니다.

이 비디오는 신경교세포의 단세포 이미징을 위한 형질전환 초파리 뇌의 면역형광 염색을 보여줍니다. 뇌는 신경교세포 특이적 재조합효소 시스템의 제어 하에 항원 항원결정기의 다양한 조합과 융합된 막 표적 단백질을 발현합니다. 분리되고 고정된 뇌는 항원 항원결정기에 특이적인 1차 항체로 염색된 후 형광단 접합 2차 항체로 염색됩니다. 이 라벨링을 통해 다양한 뇌 영역에 걸쳐 서로 다른 신경교세포 하위 집단을 동시에 이미징할 수 있습니다.

이 비디오는 쥐의 청각 피질을 절제하기 위한 정위 유도 수술 절차를 보여줍니다. 이 단계에는 정위 프레임에 고정된 마취된 쥐에서 해부학적 랜드마크를 식별하고, 청각 피질 위의 두개골에 창을 만들고, 피질층을 흡인하고, 절제가 소리 처리에 미치는 영향을 평가하기 위한 수술 후 관리를 제공하는 것이 포함됩니다.

이 비디오에서는 세포골격 조직을 시각화하고 분석하기 위해 다양한 강성의 하이드로겔에서 배양된 신경능선세포의 팔로이딘 염색을 시연하기 위해 형광 현미경을 사용하여 형광 염색을 수행하는 절차를 설명합니다.

이 비디오는 Bis-sulfosuccinimidyl suberate 또는 BS3를 사용하여 신경 세포 표면 단백질의 교차결합을 보여줍니다. 고립되고 차가워진 쥐의 뇌는 관상으로 절편되어 있습니다. 원하는 부위를 절편에서 추출하고, 다지고, BS3로 처리합니다. BS3는 GABA 수용체와 같은 표면 단백질을 가교하여 내부 단백질을 변경하지 않습니다. 추가 분석을 위해 샘플을 처리하기 전에 반응물을 글리신으로 담금질합니다.

이 비디오는 형광 공명 에너지 전달(FRET) 기반 세포 내 포도당 센서를 사용하여 초파리 애벌레 운동 뉴런의 포도당 흡수를 측정하는 기술을 보여줍니다. 유충을 해부하여 복부 신경삭을 노출시킨 후, 센서의 공여체 형광단에서 방출되는 형광을 통해 운동 뉴런을 시각화합니다. 포도당으로 자극되면 센서의 공여자와 수용체 형광단 사이의 FRET는 수용체에서 형광 방출을 유발하여 상향 조절된 포도당 대사를 가진 대조군 유충과 돌연변이 유충 사이의 포도당 흡수를 비교할 수 있습니다.

이 동영상은 1차 및 2차 항체를 사용하여 형광 표지된 성상세포로 고정된 마우스 뇌 조직 절편을 면역 염색하고 컨포칼 현미경을 통해 염색된 성상세포의 이미지를 캡처하는 절차를 보여줍니다.

이 비디오는 레이저 캡처 현미해부를 사용하여 인간 사후 소뇌 조직에서 Purkinje 세포를 분리하는 방법을 보여줍니다.

이 동영상은 다운스트림 분석을 위해 동결된 마우스 뇌 조직 절편을 준비하기 위한 자세한 단계별 프로토콜을 보여줍니다.

이 비디오는 TNF-α를 사용하여 초기 단계 추간판(IVD) 질환에 대한 전염증 및 퇴행성 장기 배양 모델의 개발을 보여줍니다. TNF-α를 추간판에 주입하는 절차를 설명하고 TNF-α가 IVD의 염증 및 저하를 유도하는 메커니즘을 설명합니다.

이 비디오는 효소 분해와 기계적 분쇄를 사용하여 얼어붙은 쥐의 뇌 조직을 단세포 현탁액으로 해리하는 방법을 보여줍니다. 준비된 세포는 유세포 분석 또는 유전자 발현 분석과 같은 다운스트림 응용 분야를 위해 에탄올로 고정되고 투과화됩니다.

이 비디오는 마우스 뇌 조직에서 분리된 세포막 단백질의 팔미토일화 상태 분석을 보여줍니다. 이 과정에는 비팔미토일화 시스테인을 노출시키고 차단한 다음 팔미토일화 시스테인에 결합하는 폴리머를 사용하여 분리된 단백질의 팔미토일화 상태를 평가하는 데 도움이 됩니다.

이 동영상은 신경독성 아밀로이드-베타 분비 세포를 캡슐화하는 고분자 마이크로비드를 제조하는 방법을 보여줍니다. 세포-폴리머 현탁액은 마이크로비드 제조 장치를 통해 처리되며, 칼슘 가교를 통해 폴리머 겔화가 이루어지며 세포 주위에 구형 마이크로비드를 형성합니다. 이 폴리머는 세포 증식을 가능하게 하는 동시에 통제된 장기 아밀로이드-베타 방출을 가능하게 하여 알츠하이머병에 축적되는 것을 시뮬레이션합니다.

이 비디오는 고정된 사후 인간 뇌를 대칭적으로 해부하고 추가 분석을 위해 더 작은 조직 블록을 준비하는 단계별 절차를 보여줍니다.

이 동영상은 미토콘드리아가 칼슘을 흡수함에 따라 형광의 실시간 변화를 모니터링하여 미토콘드리아 칼슘 보유 능력을 평가하는 절차를 보여줍니다. 이 분석은 미토콘드리아 기능 및 세포사멸 및 신경퇴행성 질환을 포함한 칼슘 관련 과정을 연구하는 데 유용합니다.

이 비디오는 쥐의 뇌에 지속적으로 약물을 주입하는 것이 혈당 수치에 미치는 영향을 보여줍니다. 포도당 대사는 공복 한 쥐의 꼬리에서 혈액을 채취하고 경구 포도당 투여 전후의 포도당 수치를 측정하여 평가합니다. 인슐린 내성은 특정 간격으로 포도당 수치를 기록하여 마우스에 인슐린을 주입하여 평가합니다.

이 비디오에서 마취된 쥐는 홍채각막각을 차단하기 위해 자기장 아래 전방에 자기 구슬을 주입하는 안구 시술을 받습니다. 이 막힘은 섬유주 그물망을 방해하여 수액 배출을 막고 안압을 증가시켜 망막 신경절 세포와 시신경을 손상시킵니다. 이것은 녹내장과 같은 상태로 발전합니다.

출처: Kummari, E., et. al., Laser Capture Microdissection - A Demonstration of the isolation of individual dopamine neurons and the entire ventral tegmental area., J. vis. exp. (2015)이 비디오에서는 후속 레이저 캡처 미세해부를 위한 뇌 조직 절편의 도파민 뉴런에 대한 면역조직화학 프로토콜을 시연합니다.

출처: Bennett, S. A., et al., 효모 신경퇴행성 단백질병증 모델에서 히스톤 번역 후 변형 특성화. J. Vis. 특급 (2019). 이 비디오는 신경퇴행성 단백질을 과발현하는 효모 세포의 히스톤 변형을 평가하는 절차를 보여줍니다. 이 단계에는 세포 용해, 원심분리, 전기영동, 멤브레인 전달 및 변형된 히스톤의 항체 기반 검출이 포함됩니다.

출처: Yan, Z., et al. 만성 스트레스를 받은 마우스에 대한 Xiaoyaosan의 항우울증 효과 평가. J. Vis. 특급 (2019). 이 비디오는 만성 스트레스로 인한 우울증에 대한 마우스 모델을 구축하고 우울 행동을 평가하는 과정을 보여줍니다. 다양한 스트레스 요인의 만성적인 적용은 코르티코스테론의 방출을 유발하여 뉴런의 과잉 흥분과 궁극적인 뉴런 사멸로 이어지며, 이는 생쥐에서 우울증과 유사한 증상을 초래합니다.

출처: Bétemps, D., et al., Detection of Disease-associated α-synuclein by Enhanced ELISA in the Brain in the Brain of Transgenic Mice Overexpressing Human A53T Mutated α-synuclein. J. Vis. 특급 (2015). 이 비디오는 ELISA를 사용하여 형질전환 마우스의 뇌 조직에서 신경퇴행성 질환 관련 단백질 α-synuclein을 검출하는 절차를 보여줍니다. 단계에는 조직 균질화, 원심분리 및 α-synuclein 단백질의 ELISA 검출이 포함되어 질병 관련 형태를 정량화합니다.

출처: Wulf, M., et.al. 뉴로멜라닌 과립의 단백질체 프로파일에 대한 LC-MS/MS 분석을 위한 레이저 미세해부 기반 프로토콜. J. Vis. 특급 (2021). 이 동영상은 인간의 사후 뇌 조직에서 분리한 뉴로멜라닌 과립(NMG)의 펩타이드 시료 분석을 보여줍니다. 펩타이드는 먼저 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 사용하여 분리한 다음 질량 분석법으로 분석하여 질량 대 전하 비율(m/z)을 측정합니다. 표적 펩타이드는 번역 후 변형을 식별하기 위해 단편화되고 결과 데이터는 NMG의 단백질체 프로파일을 결정하기 위해 참조 데이터베이스와 비교됩니다.

출처: Zhi, L. et al., 성체 마우스의 급성 선조체 절편의 산소 소비율 측정. J. Vis. 특급 (2022). 이 비디오는 마우스 선조체 뇌 절편에서 미토콘드리아 산소 소비율(OCR)을 측정하는 방법을 보여줍니다. 티슈 플레이트와 센서 카트리지를 준비하고 플럭스 분석기에 로드하는 단계를 자세히 설명하고 OCR 패턴의 기초가 되는 세포 과정을 설명합니다.

출처: Josiah, S. S., et al. 웨스턴 블로팅을 이용한 Neuronal K-Cl Co-Transporter KCC2의 기능 및 활성에 관한 연구. J. Vis. 특급. (2022). 이 동영상은 세포 용해물에서 인산화된 염화칼륨 공동수송체 2(KCC2) 단백질을 검출하고 정량화하는 단계를 보여줍니다. 이 과정에는 인산화된 KCC2를 분리하기 위한 면역침전과 분리된 단백질을 정량화하기 위한 화학발광이 포함됩니다.

출처: Lani-Louzada, R., et al. 설치류에서 외과적으로 유도된 녹내장에 대한 변지 혈관 신경총의 전원형 소작. J. Vis. 특급 (2022). 이 비디오는 윤부 혈관 신경총의 완전한 원형 소작술을 받은 화학적으로 고정된 쥐 망막에서 망막 신경절 세포의 정량화를 보여줍니다. 이 과정에는 투과화(pereabilization), 항체 염색(antibody staining), 핵 대조염색(nuclear counterstaining)이 포함되며, 이어서 상형(epifluorescence) 현미경으로 시각화하여 안압 상승이 망막 신경절 세포 생존력에 미치는 영향을 평가합니다.

출처: Jensen, V. N., et al. 신경근 질환의 마우스 모델에서 호흡기 근육 활동 및 환기의 반복 측정. J. Vis. 특급 (2017). 이 비디오는 자유롭게 움직이는 ALS 마우스 모델에서 동시 혈량측정과 근전도 신호를 기록하는 방법을 보여줍니다. 이 시술에는 이식된 전극과 송신기를 사용하여 근육 활동을 캡처하고, 혈량측정실을 사용하여 호흡 패턴을 모니터링하여 ALS 쥐에서 보조 근육의 역할을 조사하는 것이 포함됩니다.

출처: Jiang, X., et al. 실험적 근시의 쥐 모델의 유도 및 평가. J. Vis. Exp. (2019)이 영상은 커스텀 렌즈 프레임을 장착하여 마우스에 근시를 유발하는 시술을 보여줍니다. 프레임은 치과 접착제로 노출된 두개골에 고정되고 오목 렌즈를 삽입하여 망막 뒤의 초점을 이동합니다. 이 설정은 안구 신장을 자극하여 근시를 유발합니다.

출처: Jolly, S., et.al. 이중 형광 In situ hybridization과 면역 라벨링을 결합하여 마우스 뇌 섹션에서 3개의 유전자 발현을 검출합니다. J. Vis. 특급 (2016). 이 비디오는 이중 형광 in situ hybridization을 사용하여 마우스 뇌 섹션에서 두 RNA 표적의 발현을 시각화하는 방법을 보여줍니다. 이 프로토콜은 플루오레세인 이소티오시아네이트 및 디곡시게닌으로 표지된 프로브를 사용하여 RNA를 순차적으로 검출한 다음 효소 신호 증폭을 통해 감도를 향상시키는 것을 포함합니다. 그 결과 생성된 형광은 조직 내 표적 RNA의 공동 국소화 분석을 가능하게 합니다.

출처: Baleriola, J., et. al., Detection of Axonally localized mRNAs in Brain Sections Using High-Resolution In Situ Hybridization(고해상도 현장 혼성화를 사용한 뇌 절편에서 축삭 국소화 mRNA 검출). J. Vis. Exp. (2015)이 비디오는 형광 현장 혼성화 및 항체 염색을 사용하여 고정 마우스 해마 절편의 콜린성 축삭 내에서 mRNA를 검출하는 방법을 보여줍니다. 형광 현미경 검사는 콜린성 뉴런에서 프로브 태그가 지정된 mRNA와 콜린 아세틸전이효소의 공간적 국소화를 보여줍니다.

출처: Zhang, J., et al. High-Resolution Quantitative Immunogold Analysis of Membrane Receptors at Retinal Ribbon Synapses(망막 리본 시냅스에서 막 수용체의 고분해능 정량적 면역금 분석). J. Vis. Exp. (2016)이 비디오는 망막 시냅스에서 신경전달물질 수용체 국소화를 시각화하기 위한 전자 현미경 기술을 보여줍니다. 망막 절편에는 막으로 결합된 신경전달물질 수용체를 나타내는 망막 신경절 세포가 포함되어 있으며 콜레라 독소 소단위 B(CTB)로 표지되어 있습니다. 마커를 금 나노 입자 접합 항체로 라벨링하고 중금속으로 단면을 대조염색하면 망막 신경절 세포 수용체가 현미경으로 시각화됩니다.

출처: de March, C. A. et. al., 증기 단계에서 냄새 물질에 의한 냄새 수용체 활성화의 실시간 체외 모니터링. J. Vis. Exp. (2019)이 비디오는 발광 측정을 사용하여 재조합 포유류 세포에서 냄새 수용체의 실시간 활성화를 모니터링하는 방법을 보여줍니다. 냄새 물질 결합은 G-단백질 활성화 및 cAMP 생산을 유발하여 기질 결합 시 발광을 방출하는 글로센서 단백질을 활성화하여 수용체 반응의 정량적 측정을 제공합니다.

출처: Alluri, H., et al. 혈액-뇌 장벽 기능 장애 연구를 위한 체외 허혈-재관류 손상 모델로서의 산소-포도당 결핍 및 재산소화. J. Vis. Exp. (2015). 이 비디오는 쥐의 뇌 미세혈관 내피 세포(RBMEC)에서 밀접 접합 단백질과 스트레스 섬유의 형광 국소화를 보여줍니다. 스트레스 단층에서는 형광 표지된 항체를 사용하여 밀착 접합 단백질을 표지하고, 형광단 표지된 팔로이딘은 응력 섬유를 표지합니다. 그런 다음 표지된 분자는 컨포칼 현미경을 통해 시각화됩니다.

출처: Eid, L. & Parent, M. Preparation of Non-human Primate Brain Tissue for Pre-embedding Immunohistochemistry and Electron Microscopy. J. Vis. Exp. (2017). 이 비디오는 전자 현미경을 위한 사전 임베딩 면역조직화학을 사용하여 알데히드가 고정된 비인간 영장류 뇌 조직의 준비를 보여줍니다. 특정 신경 단백질에 대한 면역 표지 단계를 간략하게 설명한 다음 착색된 침전물을 생성하는 과산화효소 반응을 통해 전자 현미경에서 표적 단백질을 시각화할 수 있습니다.

출처: Evilsizor, M. N., et. al., 저온 절개 쥐 뇌 조직에 대한 면역 조직 화학을 위한 프라이머: 미세아교세포 및 뉴런에 대한 염색 예. J. Vis. Exp. (2015)이 비디오는 미세아교세포와 뉴런의 공간 배열을 시각화하기 위해 동결절제된 쥐 뇌 조직에 대한 단계별 면역조직화학 염색 절차를 보여줍니다.

출처: Kirchner, K.N., et al., 쥐 뇌 조직에 대한 소수성 조직 세척 방법. J. Vis. 특급 (2020). 이 비디오는 쥐의 뇌 조직 샘플의 소수성 조직 세척 방법을 보여줍니다. 샘플은 메탄올에서 순차적으로 탈수되고 디클로로메탄과 메탄올 혼합물로 처리되어 지질과 색소를 용해시키고 완전한 조직 투명화를 위해 디벤질 에테르로 옮겨져 얇은 절편 없이 상세한 이미징이 가능합니다.

이러한 박테리아를 검출하려면 단백질 항원이 노출되고 불활성화된 내인성 인산가수분해효소가 있는 탈파라핀화되고 재수화된 박테리아 감염 인간 뇌 절편을 취하십시오.

이 바이러스는 대뇌 피질의 피라미드 뉴런을 감염시키며, 발현된 바이러스 단백질은 봉입체(inclusion body)로 알려진 세포질 내 과립 구조 내에 국한됩니다.

씻어서 파라핀을 제거한 다음 감소된 알코올 농도를 사용하여 조직에 수분을 보충하십시오.

이 비디오는 성상교세포 배양에서 세포 표면 및 세포 내 단백질의 분리를 보여줍니다. 성상세포 배양액을 얼음 위에 올려 세포내이입(endocytosis)을 억제한 다음 세포 표면 단백질을 비오틴화(biotinylation) 시약으로 표지합니다. 세포는 비오틴화된 세포 표면 단백질과 비오틴화된 세포 내 단백질을 방출하기 위해 용해됩니다. 마지막으로, 스트렙타비딘으로 코팅된 비드를 사용하여 세포 내 단백질에서 비오틴화된 세포 표면 단백질을 분리합니다.

이 비디오는 신생아 마우스 뇌에서 쥐 거대세포바이러스(MCMV) 분포를 연구하기 위한 뇌내폐 주사 과정을 보여줍니다. 가시성을 위해 강화된 녹색 형광 단백질(EGFP)을 발현하도록 설계된 MCMV는 새끼 쥐의 뇌 외측심실에 주입됩니다. 주입된 바이러스는 뇌척수액을 통해 순환하여 가장자리 영역, 맥락막 신경총 및 심실하 영역을 포함한 뇌실 주위 영역의 세포를 감염시킵니다.

이 비디오는 발달 중인 뇌에서 지카 바이러스 감염의 체외 모델을 확립하는 방법을 보여줍니다. 줄기세포, 신경전구세포(NPC) 및 뉴런의 장미를 포함하는 인간 대뇌 오가노이드는 지카 바이러스에 감염되었습니다. 이 바이러스는 NPC를 감염시키고 세포사멸을 유발하여 오가노이드 발달을 방해합니다.

이 비디오는 신경 염증을 유발하기 위해 제브라피시 유충의 뇌에 지질다당류(LPS)를 미세 주입하는 방법을 보여줍니다. 유충은 아가로스를 깐 접시에 놓고 바늘을 뇌실에 삽입하고 LPS를 주입합니다. 주입된 LPS는 신경 염증을 유발하는 면역 반응을 유발합니다.

이 비디오는 미토콘드리아 내에서 형광 단백질을 발현하는 유전자 변형 성상세포의 미토콘드리아 건강 평가를 보여줍니다. 이 단백질은 미토콘드리아 형광이 녹색에서 빨간색으로 변할 때 미토콘드리아 건강의 변화를 추적하는 데 도움이 되며, 이는 스트레스나 손상을 나타냅니다. 이미지는 다양한 매개변수를 사용하여 캡처되고 분석됩니다.

이 비디오는 키메라 HIV 바이러스를 쥐의 뇌 피질에 주입하는 절차를 보여주며, 여기서 바이러스 RNA는 숙주 게놈에 통합되고 복제 및 확산되어 실험 모델에서 활성 HIV 감염을 확립합니다.

이 비디오는 CNS에 감염된 마우스 모델의 생성을 보여줍니다. 젖먹이 새끼는 두개골 내 및 복강 내 바이러스를 주입합니다. 바이러스가 퍼져 중추신경계를 감염시켜 신경 세포 사멸과 염증을 일으킵니다. 새끼는 질병이 진행됨에 따라 감염 증상을 평가합니다.

이 비디오는 마우스 모델에서 신경염증이 발생하는 과정을 보여줍니다. 미세 상처가 있는 마취된 마우스를 채취하여 상처에 가성 광견병 바이러스(PRV)를 접종합니다. 이 바이러스는 말초 신경을 감염시키고 배근 신경절(DRG)로 퍼지며 척수와 뇌를 더 감염시킵니다. 신경계의 뉴런이 감염되면 면역 반응이 일어나 뉴런 손상을 유발하여 신경 염증을 유발합니다.

이 비디오는 신경 퇴행을 유도하기 위해 성인 마우스에 지카 바이러스 현탁액을 뇌내 주사하는 방법을 보여줍니다. 마취된 마우스는 입체성 프레임에 고정되고 주입을 위해 노출된 두개골에 구멍을 뚫습니다. 지카 바이러스의 현탁액이 뇌 조직에 주입됩니다. 바이러스 감염은 염증을 일으켜 신경 퇴행을 유발합니다.

이 비디오는 리스테리아 모노사이토제네스에 감염된 관류된 쥐 뇌의 감염성 박테리아 부하를 정량화하는 방법을 보여줍니다.

이 동영상은 유리 FITC 및 FITC 로딩 페리틴과 함께 막 삽입부의 성상세포와 내피 세포를 사용하여 시험관 내 혈액 뇌 장벽(BBB) 모델을 통한 투과를 연구하는 방법을 보여줍니다. FITC-페리틴은 내피 세포의 수용체에 결합하여 막 장벽을 넘어 하부 챔버로 이동한 반면, 자유 FITC는 제한된 투과를 보이며 상부 챔버에 머물렀습니다.

이 비디오는 인간 태아의 신경 줄기 세포를 지카 바이러스에 감염시키는 절차를 보여줍니다. 감염된 세포는 추가 연구에 사용할 수 있습니다.

이 비디오는 혈액뇌장벽(BBB)을 통과하는 병원체를 연구하기 위한 체외 모델을 보여줍니다. 밀접한 연접을 발현하는 미세혈관 내피 세포는 상부 챔버에서 내피층을 형성하고, 뉴런, 성상세포, 미세아교세포는 다공성 막으로 분리된 하부 챔버의 뇌 실질을 나타냅니다. BBB 모델의 바이러스 감염은 혈액에서 뇌로 전달되는 병원체를 모방합니다. 신경친화성 바이러스를 도입하면 트랜스사이토시스(transcytosis)를 통해 BBB를 교차하여 신경 세포를 감염시키고 바이러스 자손을 복제 및 방출하여 성공적인 신경 침입을 보여줍니다.

출처: Funes, S., et. al., Human Microglia-like Cells: Differentiation from Induced Pluripotent Stem Cells and In Vitro Live-cell Phagocytosis Assay using Human Synaptosomes(인간 시냅토솜을 사용한 유도 만능 줄기세포 및 체외 생세포 식세포작용 분석의 분화). J. Vis. Exp. (2022)이 비디오는 pH에 민감한 형광 염료 표지 시냅토솜을 사용하여 미세아교세포와 같은 세포의 식세포 능력을 연구하는 분석을 보여줍니다.

조직을 자일렌에 담궈 파라핀을 용해시킵니다.

손상된 BBB를 교차하여 뇌에 도달하는 형광단 태그가 붙은 알부민을 정맥 주사합니다.

이 조직은 대뇌 혈관 벽에서 아밀로이드 섬유와 비정상적인 단백질 응집체를 보여주며, 이는 신경 장애의 주요 지표입니다.

MCCH는 뇌로 가는 혈류가 감소하는 것이 특징입니다. 이는 뇌혈관의 내피 세포층으로의 산소와 영양분 공급을 제한하여 세포를 손상시킵니다.

세포 혼합물을 세포외 기질 또는 ECM 용액에 현탁시킵니다.

목을 절개하여 양측 총경동맥을 노출시키고 느슨하게 결찰합니다.

이 동영상은 뇌로 이동하는 자가반응성 T세포를 활성화하기 위해 미엘린 유래 펩타이드에 보조제를 주입하여 실험적 자가면역 뇌척수염(EAE)을 유발하는 방법을 보여줍니다. 백일해 독소는 혈액 뇌 장벽 투과성을 증가시켜 이러한 T 세포와 다른 면역 세포가 뇌로 들어갈 수 있도록 하기 위해 투여됩니다. 이러한 면역 세포는 탈수초화를 일으켜 신경 전달 장애와 EAE 발병을 유발합니다.

이 비디오는 EAE 마우스 모델에서 혈액-뇌 장벽 파괴를 평가하는 절차를 보여줍니다. 다양한 크기의 형광 염료를 역궤도로 주입하여 뇌의 혈관을 순환합니다. 작은 염료는 틈을 통해 뇌 조직으로 누출되는 반면, 큰 염료는 장벽 손상 정도와 상관관계가 있는 파괴가 심한 경우에만 들어갑니다.

이 비디오는 전기 자극을 사용하여 마취된 쥐의 폰즈에서 조직 손상 또는 경색을 유도하는 절차를 보여줍니다.

이 비디오에서는 수정된 제브라피시 배아를 실체 현미경으로 적척한 다음 콜레스테롤 합성 억제제에 노출시켜 유충에서 혈관 파열과 뇌출혈을 유발합니다. 뚜렷한 붉은 반점으로 식별할 수 있는 출혈성 유충은 이후 추가 분석을 위해 현미경으로 분리됩니다.

이 비디오는 리포다당류(LPS)를 사용하여 쥐 모델에서 혈액뇌장벽(BBB) 파괴 및 뇌 미세출혈을 유도하는 과정을 보여줍니다. 이는 BBB 투과성 증가와 그에 따른 뇌 조직 손상으로 이어지는 면역 반응의 순서를 강조합니다.

이 비디오는 쥐 모델에서 뇌 미세출혈(CMH)을 감지하는 분석을 보여줍니다. CMH는 누출된 적혈구(RBC)로 식별되는 혈액-뇌 장벽 파괴로 인한 뇌출혈입니다. 쥐 모델에서 고정된 뇌 조직은 적혈구에 대한 헤마톡실린-에오신(hematoxylin-eosin)으로 동결 보호되고 절편화되고 염색되어 CMH의 현미경 시각화가 가능합니다. 누출된 적혈구는 현미경에서 빨간색-주황색으로 나타납니다.

이 비디오는 신생아 저산소성-허혈성 뇌 손상을 연구하기 위한 마우스 모델을 만드는 절차를 보여줍니다. 외과적으로 허혈을 유도하고 동물에게 저산소증을 가하여 뇌 손상을 악화시키는 단계를 설명합니다. 마지막으로, 결과로 생성된 뇌 병변을 평가하는 방법을 보여주어 마우스 모델이 추가 과학적 조사를 위해 준비되었는지 확인합니다.

이 동영상은 이온 선택성 및 이온 영동 미세전극을 사용하여 전기 신호를 측정하고 비교함으로써 뇌 절편의 세포 외 공간을 특성화하는 방법을 보여줍니다. 이 프로세스는 공간의 부피 분율과 비틀림 정도를 결정하는 데 도움이 됩니다.

이 비디오에서는 글루타메이트 산화효소로 코팅된 MEA(Multielectrode Array)를 마취된 마우스의 뇌 조직에 이식합니다. 글루타메이트 용액은 MEA가 글루타메이트 수치를 감지하는 세포 외 공간에 주입되어 성상세포의 글루타메이트 흡수를 실시간으로 모니터링할 수 있습니다.

이 비디오에서는 loxP 부위와 에스트로겐 수용체에 융합된 Cre 재조합효소 옆에 있는 Ccm2 유전자를 가진 유전자 변형 쥐 강아지가 뇌 해면체 기형(CCM)을 유도하는 데 사용됩니다. 4-하이드록시타목시펜의 투여는 내피 세포에서 Cre를 활성화하여 Ccm2의 결실과 뇌의 CCM 형성으로 이어집니다.

이 동영상은 뇌졸중 연구에서 염증 반응을 연구하기 위해 허혈성 마우스 뇌 조직에서 뇌 세포와 침투한 면역 세포를 효소 분해로 분리한 다음 밀도 구배 원심분리로 세포 파편과 수초를 제거하는 절차를 보여줍니다.

이 비디오는 마우스 모델에서 혈관 내 천공을 통한 지주막하 출혈의 유도를 보여줍니다. 마취된 마우스의 목 부위를 절개하여 총경동맥과 그 분기점에 접근합니다. 동맥을 통해 필라멘트를 삽입하여 두개내 동맥 가지를 천공하여 지주막하 출혈을 유발합니다.

이 비디오는 신생아 뇌실내 출혈의 랫트 모델을 생성하는 방법을 보여줍니다. 이 절차에서는 마취된 새끼 쥐에게 헤모글로빈을 뇌의 외측심실에 주입합니다. 헤모글로빈은 산화 스트레스를 유발하고 헴을 방출하여 뇌실 내 출혈을 시뮬레이션합니다. 활성 산소종과 염증성 사이토카인에 의해 유발되는 뇌 조직의 손상은 심실 내 출혈의 흔한 결과인 심실 비대를 유발합니다.

이 비디오는 허혈성 뇌졸중을 모델링하기 위해 노화된 쥐에서 총경동맥 또는 CCA 결찰술을 사용하여 영구 원위 중대뇌동맥 폐색(MCAO)을 수행하는 절차를 보여줍니다. 이는 뇌로 가는 혈류를 차단하여 신경 세포의 사멸로 이어지며 뇌졸중 메커니즘과 잠재적 치료법을 연구하기 위한 모델을 생성합니다.

이 비디오는 지주막하 출혈 쥐 모델을 설정하는 절차를 보여줍니다. 마취된 쥐에게는 두개내압과 뇌혈류를 측정하기 위해 프로브를 이식합니다. 표적 부위가 확인되고 바늘이 chiasmatic 전 위치에 삽입됩니다. 그런 다음 자가 혈액을 지주막하 공간으로 주입하여 두개내 압력을 높이고 뇌 혈류를 감소시켜 모델을 확립합니다.

이 비디오는 혈액뇌장벽(BBB) 내피 모델을 통한 림프구 이식에 대한 실험적 조사를 보여줍니다. 인간 뇌 미세혈관 내피 세포(HBMEC)의 단층을 in vitro에서 생성하고, 림프구를 포함하는 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)를 단층에 추가합니다. 그런 다음 세포를 배양하여 림프구 형질전환이 가능하도록 하고, 이동된 세포는 유세포 분석을 사용하여 정량화합니다.

이 비디오는 중대뇌동맥 폐색을 받은 쥐의 뇌 절편에서 경색 영역과 뇌 부종을 평가하는 방법을 보여줍니다. 경색 부위는 산화 환원 염색을 사용하여 식별되며, 이미지 분석 소프트웨어의 블루 필터 및 임계값 기능은 영향을 받은 반구의 경색 영역과 부종을 정량화합니다.

이 비디오는 in vitro에서 마우스 뇌 미세혈관 내피 세포에서 경내피 전기 저항(TEER)을 평가하는 방법을 보여줍니다. TEER 값이 높으면 내피 세포 접합이 손상되지 않았음을 나타내고, 활성화된 T 세포가 추가되면 TEER 값이 낮아져 접합 장벽의 파괴를 반영합니다.

이 비디오는 안지오텐신 II 유도 고혈압 마우스 모델에서 교감신경 기능을 방해하고 혈압을 낮추기 위해 페놀이 사용하는 신장 동맥 교감신경 탈신경 절차를 보여줍니다.

이 비디오는 스레드 볼트를 사용하여 중대뇌동맥(MCA)을 폐색하여 쥐 모델에서 허혈성 뇌졸중을 유도하는 과정을 보여줍니다. 이 시술에는 경동맥을 결찰하고, 외부 경동맥에 실 볼트를 삽입하고, MCA에서 뇌로 가는 혈류를 차단하여 신경 세포를 사멸시키고 허혈성 뇌졸중을 모방하는 것이 포함됩니다.

이 비디오는 마우스 모델에서 오른쪽 총경동맥을 차단하고 마우스를 저산소 환경에 노출시켜 혈전성 뇌졸중을 복제하는 절차를 보여줍니다. 이 과정은 뇌로 가는 혈액과 산소의 흐름을 감소시켜 혈전 형성과 뇌 손상을 유발합니다.

이 비디오는 백질 내의 표적 뇌 좌표에 산화질소 억제제를 주입하여 마취된 마우스에서 백질 뇌졸중을 유도하는 정확한 기술을 보여줍니다. 이는 혈관 수축과 혈액 공급 억제로 이어져 신경 손상과 뇌졸중을 유발합니다.

출처: Wanderer, S., et al. 동맥 주머니 : 토끼의 미세 수술 분기 동맥류 모델. J. Vis. Exp. (2020)이 영상은 엘라스타아제 처리된 혈관 주머니를 사용하여 토끼에서 실험적 동맥류 모델을 만드는 방법을 보여줍니다. 오른쪽 CCA의 일부를 절제한 후 파우치에 엘라스타아제를 투여한 다음 왼쪽 CCA를 봉합하여 혈류를 회복시킵니다. 그 결과 약해진 주머니 벽에 가해지는 스트레스는 동맥류 형성을 유발합니다.

출처: Sharma, T. P., et al., Translaminar Autonomous System Model for the Modulation of Intraocular and Intracranial Pressure in Human Donor Posterior Segments(인간 기증자 후방 분절에서 안구 및 두개내 압력 조절을 위한 경층류 자율 시스템 모델). J. Vis. 특급 (2020). 이 비디오는 층류 횡단 자율 시스템에서 안구 및 두개내 압력을 시뮬레이션하여 망막 신경절 세포 신호에 대한 층상압의 영향을 연구하기 위해 인간의 눈을 준비하는 절차를 보여줍니다.

출처: Lani-Louzada, R., et al., 설치류의 외과적 유도 녹내장에 대한 변지 혈관신경총의 전원형 소작. J. Vis. Exp. (2022)이 비디오는 쥐 모델에서 상승된 안압(IOP)의 유도 및 모니터링을 보여줍니다. 이 과정에는 변부 혈관을 소작하는 것이 포함되며, 그 결과 혈관 폐색과 안압 상승이 발생합니다. 그런 다음 쥐가 회복되도록 하고 IOP는 비교를 위해 실험 눈과 대조 눈 모두에서 정기적으로 모니터링됩니다.

출처: Jungen, C., et al. 생체 외 Langendorff 시스템에서 심장 전기생리학 및 부정맥 형성에 대한 심장 내 뉴런의 영향. J. Vis. 특급 (2018).이 비디오는 심장내 신경계를 자극하여 부정맥에 대한 심장의 민감성을 평가하는 생체 외 기술을 보여줍니다. 관류 장치를 사용하여 분리된 마우스 심장에 산소가 함유된 완충액을 관류합니다. 그런 다음 심장내 신경계는 부정맥을 유발하기 위해 고주파로 자극됩니다.

출처: Hakim, M. A. et al., Isolation and Functional Analysis of Arteriolar Endothelium of Mouse Brain Parenchyma. J. Vis. 특급 (2022).이 비디오는 쥐의 뇌에서 분리된 세동맥 내피관의 기능 분석을 보여줍니다. 이 연구는 기준선에서 그리고 약리학적 자극에 대한 반응으로 세포 내 칼슘 수준과 막 전위를 측정하는 단계를 간략하게 설명합니다.

출처: Tang, X. et. al., 자가 혈액의 이중 주입에 의한 대량 폰틴 출혈. J. Vis. Exp. (2021)이 프로토콜은 쥐 뇌의 폰틴 부위에 자가 혈액을 제어하여 주입하여 대규모 폰틴 출혈을 모델링하는 방법을 설명합니다. 목적은 국소 압력을 증가시켜 국소적인 뇌출혈을 시뮬레이션하는 것입니다.

출처: Alluri, H., et.al. 혈액-뇌 장벽 기능 장애를 연구하기 위한 체외허혈-재관류 손상 모델로서의 산소-포도당 결핍 및 재산소화. J. Vis. 특급 (2015). 이 비디오는 저산소 및 영양 결핍 상태를 시뮬레이션하여 산소-포도당 결핍 및 그에 따른 재산소화가 쥐의 뇌 미세혈관 내피 세포(RBMEC)에 미치는 영향을 보여줍니다. 이러한 상태는 ATP 고갈, 세포 내 칼슘 증가, 반응성 산소종(ROS)의 생성을 초래하여 세포 접합 단백질을 분해하고 스트레스 섬유 형성을 유도하여 세포 간 상호 작용을 약화시킵니다.

출처: Gucciardo, E., et. al., 증식성 당뇨병성 망막병증의 섬유혈관 합병증에 대한 생체 외 조직 배양 모델. J. Vis. Exp. (2019)이 비디오는 피브린 겔에 내장된 섬유혈관 조직의 생체 외 배양에 대한 면역염색 프로토콜에 대해 자세히 설명합니다. 이를 통해 증식성 당뇨병성 망막병증과 관련된 혈관 변화를 자세히 시각화할 수 있습니다.

출처: Talley Watts, L., et al. 컨포칼 광학 이미징 In Vivo에 의한 로즈 벵골 광혈전증: 단일 혈관 뇌졸중 모델. J. Vis. Exp. (2015)이 비디오는 쥐의 뇌에서 혈전 형성을 유도하는 기술을 보여줍니다. 두개골 창과 얇아진 두개골을 가진 마취된 쥐는 고강도 빛을 사용하여 감광성 염료의 활성화를 통해 광혈전증을 겪습니다. 이 과정은 혈관 벽을 손상시키고 혈전 형성을 유발하여 궁극적으로 뇌로 가는 혈류를 방해하는 활성 산소 종을 생성합니다.

출처: Kuts, R. et al. 쥐의 운동 피질에서 레이저로 인한 뇌 손상. J. Vis. Exp. (2020)이 비디오는 쥐의 레이저 유도 뇌 손상 후 혈액 뇌 장벽(BBB) 무결성을 평가하는 방법을 보여줍니다. 추적 염료를 꼬리 정맥에 주입하여 뇌로 순환하고 손상된 BBB를 통해 조직으로 누출되도록 합니다. 그런 다음 뇌를 추출하고 가공하여 염료를 방출합니다. 염료의 형광 강도는 레이저로 인한 BBB 손상의 정도를 정량화하기 위해 측정됩니다.

성상세포는 줄기세포의 성숙과 분화를 촉진하여 뉴런과 성상세포로 만드는 신호 분자를 분비합니다.

이 비디오는 뇌실주위 내피 세포(PVEC)의 화학인력 신호에 대한 반응으로 뉴런 간 이동을 테스트하는 방법을 보여줍니다. 인터뉴런은 중앙 구획에 배치되며, PVEC와 대조 세포는 양쪽에 있습니다. PVEC로의 이주가 증가하면 화학인력 신호에 대한 긍정적인 반응을 나타냅니다.

이 동영상은 오가노이드 성숙을 나타내는 다양한 소뇌 뉴런에서 발현되는 특정 표적 항원을 식별하기 위해 소뇌 오가노이드 절편의 면역형광 염색을 보여줍니다.

이 비디오는 플루오레세인 디아세테이트(FDA)와 프로피듐 요오드화물(PI)을 사용한 이중 염색을 사용하여 소뇌 과립 뉴런과 신경교세포의 혼합 배양에서 뉴런을 식별하는 방법을 보여줍니다.

이 비디오는 돌연변이 초파리 뇌의 버섯체에서 표현형 결함을 시각화하기 위한 상세한 면역염색 프로토콜을 보여줍니다. 이 프로토콜은 버섯 몸체의 적절한 형태학적, 기능적 발달을 촉진하는 축삭 유도에 관여하는 단백질인 Fas2에 대한 항체를 사용하는 것입니다.

이 동영상은 EdU incorpion을 사용하여 뇌 조직 절편에서 새로 증식한 신경 줄기 세포를 염색한 다음 면역 형광을 통해 특정 단백질을 시각화하여 세포 역학 및 증식에 대한 이해를 높이는 절차를 보여줍니다.

이 동영상은 형광 현미경을 사용하여 핵 마커 발현을 평가하고 세포 증식 및 신호 전달 활성을 측정하여 마우스 배아 두개안면 조직에서 냉동 절편의 면역 형광 염색을 보여줍니다.

이 동영상은 신경 소포의 움직임을 시각화하기 위해 특정 형광 단백질로 표지하는 방법을 보여줍니다. 먼저, 형광 단백질에 대한 플라스미드 코딩을 형질주입(transfection)제와 함께 배양한 다음 뉴런 배양액에 도입합니다. 그 후, 뉴런의 이미지를 획득하고 분석하여 소포의 움직임을 추적합니다.

이 비디오는 RA 리포터 세포를 사용하여 신경구 세포에서 레티노산(RA) 분비를 측정하는 방법을 보여줍니다. 신경구 세포와 RA 리포터 세포를 공동 배양하고 RA 수치를 측정하기 위해 비색 RA 분석을 수행하는 단계를 간략하게 설명합니다.

이 비디오는 면역형광 및 컨포칼 현미경을 사용하여 신경 세포 집단 분포를 시각화하고 분석하기 위해 배아 쥐 위장관의 면역 염색을 보여줍니다.

이 비디오는 생체 내 연구를 위한 MGE(Medial ganglionic eminence) 세포의 바이러스 라벨링 및 이식을 보여줍니다. 이 논문은 바이러스 리포터로 MGE 세포를 transduction하고, 이러한 transduction된 세포를 쥐 새끼의 피질에 이식하고, 특정 interneuron subtype에서 리포터 발현을 가능하게 하는 단계를 간략하게 설명합니다.

이 비디오는 신생아 쥐의 뇌에서 옥시토신 수용체가 풍부한 핵을 분리하는 방법을 보여줍니다. 옥시토신 수용체가 풍부한 뇌 핵을 식별하고 정밀하게 펀칭한 후 관상 슬라이싱을 통해 추가 분석을 위해 옥시토신 수용체가 풍부한 핵을 효과적으로 추출할 수 있습니다.

출처: Pericoli, G. et. al., 소아 미만성 정중선 신경교종의 생-3D 세포 면역세포화학 분석. J. Vis. Exp. (2021)이 비디오는 항-CD44 항체를 이용한 면역조직화학적 표지를 사용하여 소아 미만성 정중선 신경교종 세포 이동을 관찰하기 위한 라이브 셀 이미징을 보여줍니다.

출처: Jantzie, L. L., et. al입니다. Modeling Encephalopathy of Prematurity Using Prenatal Hypoxia-ischemia with Intra-amniotic Lipopolysaccharide in Rats(쥐에서 양막내 지방다당류를 사용한 산전 저산소증-허혈을 사용한 미숙아 뇌병증 모델링). J. Vis. Exp. (2015)이 비디오는 자궁 혈류를 제한하고 LPS를 주입하여 태아 쥐에서 저산소성 허혈성 및 염증성 상태를 유도하는 프로토콜을 보여주며, 조산 연구와 관련된 신경 염증 및 뇌 발달 장애를 모델링합니다.

출처: Larpthaveesarp, A., et. al입니다. P10 쥐에서 신생아 뇌졸중의 일시적인 중간 대뇌 동맥 폐색 모델. J. Vis. 특급. (2017)이 비디오는 새끼 쥐에서 Middle Cerebral Artery Occlusion 모델을 설정하는 방법을 보여줍니다. 내부 경동맥(ICA)이 노출되고 결찰자가 고정되어 혈액 범람을 제한합니다. 폐색은 ICA를 통해 삽입되어 중대뇌동맥에 도달합니다. 그런 다음 추가 분석 전에 강아지가 회복할 수 있습니다.

이 질병은 자가반응성 면역 세포가 미엘린 단백질을 공격하도록 유발하여 뉴런 축삭을 둘러싼 수초를 저하시킵니다.

제어 섹션은 동심원 원형질막층을 포함하는 단단히 채워진 미엘린 초를 가진 축삭을 나타냅니다. 손상된 부분은 큰 틈이 있는 감압된 수초를 보여줍니다.

스트레스는 희소돌기아교세포의 기능을 손상시켜 감정을 조절하는 뇌 영역인 내측 전전두엽 피질(medial prefrontal cortex)의 뉴런 축삭돌기를 둘러싸고 있는 지질이 풍부한 수초(myelin sheath)를 파괴합니다.

이 비디오는 표적 단백질 특이적 항체 코팅된 마그네틱 비드를 사용하여 줄기세포 유래 모터 뉴런 용해물에서 표적 단백질과 교차결합된 DNA 단편의 면역침전을 보여줍니다.

이 비디오는 초파리의 등쪽 종방향 근육에서 신경근 접합부의 구조적 무결성을 평가하기 위한 프로토콜을 보여줍니다. 이 절차에는 뉴런과 근육을 두 개의 서로 다른 항체로 염색하고 돌연변이 파리와 야생형 파리 사이의 형광 패턴을 비교하는 것이 포함됩니다. 돌연변이 파리에서 신경 염색의 감소는 근육 구조가 손상되지 않은 상태에서 신경 퇴행을 나타냅니다.

이 비디오는 형광 태그가 지정된 뉴런이 있는 Caenorhabditis elegans에 대한 테스트 화학 물질의 신경 퇴행성 효과를 평가하는 방법을 보여줍니다. 정상 뉴런은 온전한 체세포와 돌기의 밝은 형광을 보이는 반면, 형광 감소, 부풀어 오른 소마, 단속된 돌기는 신경 퇴행을 나타냅니다.

이 비디오는 TRPV1 작용제 레시니페라톡신(RTX)을 사용하여 마우스에서 소섬유 신경병증 모델을 설정하는 방법을 보여줍니다. RTX를 마우스에 투여하는 단계를 간략하게 설명하고, RTX가 어떻게 직경이 작은 감각 뉴런에서 뉴런 사멸을 유도하여 신경병증 모델을 확립하는지 설명합니다.

이 비디오에서는 실험적 자가면역 뇌척수염(EAE)을 사용하여 다발성 경화증의 마우스 모델을 구축합니다. 마우스에 뉴런 펩타이드와 보조제가 포함된 에멀젼을 주입하여 자가반응성 T세포를 활성화하는 면역 반응을 유발합니다. 그 다음에는 백일해 독소(PTX)를 주입하여 혈액뇌장벽 투과성을 높여 자가반응성 T세포가 뇌에 침투할 수 있도록 합니다. 이 침투는 궁극적으로 수초성 손상을 초래하는 신호 폭포를 시작하여 다발성 경화증의 탈수초성 상태를 모방합니다.

이 비디오는 아쿠아포린-4를 표적으로 하는 활성화된 Th17 세포를 마우스 모델로 전달하여 마비를 유도하는 절차를 보여줍니다. 중추신경계에서 활성화된 Th17 세포는 아쿠아포린-4 발현 성상세포와 상호 작용하여 면역 반응을 유발하여 마우스의 꼬리와 사지 마비를 유발합니다.

이 비디오는 백일해 독소와 미엘린 모방 펩타이드 및 보조제를 함유한 접종을 통해 마우스 모델의 운동 기능 장애를 평가한 후 운동 기능을 평가하고 면역 활성화 및 탈수초화로 인한 신경 손상을 평가하기 위한 트레드밀 테스트를 수행하는 과정을 보여줍니다.

이 비디오는 우뇌 병변이 있는 반파킨슨병 쥐의 운동 기능을 평가하기 위한 계단 테스트를 보여줍니다. 병변은 도파민 신호 전달을 방해하여 왼쪽 발 조절을 손상시켜 왼쪽 계단에 더 많은 펠릿이 남아 운동 기능 장애를 나타냅니다.

이 비디오는 야생형 또는 ALS 돌연변이 인간 TDP-43 단백질을 발현하는 예쁜꼬마선충의 운동 기능 장애를 평가하기 위해 방사형 운동 분석을 사용하는 방법을 보여줍니다. 다양한 수준의 야생형 또는 돌연변이 TDP-43 발현을 가진 웜은 크롤링할 수 있으며, 이들의 움직임은 분석 플레이트의 중심점에서 이동한 반경 거리로 측정됩니다. 이 분석은 다양한 예쁜꼬마선충 균주가 이동한 거리에 따라 경증, 중등도 및 중증 운동 장애를 구별합니다.

이 동영상은 배양된 운동 뉴런, 슈반 세포 및 근관을 사용하여 근육을 평가한 후 신경근 차단제로 처리하여 수축을 억제하는 방법을 보여줍니다. 색상으로 구분된 시간 모션 그래픽은 색상으로 구분된 시간 모션 그래픽을 표시합니다. 빨간색은 가장 빠른 움직임을 나타내고 파란색은 가장 느린 움직임을 나타냅니다.

이 동영상은 근접 결찰 분석법(PLA)을 사용하여 초파리 신경근 접합부(NMJ)에서 단백질-단백질 상호 작용의 시각화를 보여줍니다. 체벽을 분리한 후 상호 작용하는 단백질을 1차 항체 및 PLA 접합 2차 항체로 조사합니다. 상호 작용하는 단백질의 근접성은 커넥터 올리고뉴클레오티드와 프로브의 결찰을 용이하게 하여 원형 DNA를 형성한 다음 롤링 서클 증폭에 의해 증폭됩니다. 형광 프로브는 증폭된 DNA에 결합하여 NMJ에서 단백질-단백질 상호 작용을 시각화할 수 있습니다.

출처: Wagner, K. et al., eGFP 태그가 지정된 단백질을 사용하여 초파리 광수용체 세포의 막 단백질 이동을 연구합니다.J. vis. 특급 (2022). 이 동영상은 eGFP 표지된 TRPL 단백질을 사용하여 초파리 광수용체 세포에서 막 단백질 이동을 시각화하는 방법을 보여줍니다. 이미징을 위한 형질전환 파리의 준비, 광수용체 세포의 형광 이미지 캡처, 횡문막에서 상대적 eGFP 형광을 측정하여 TRPL 트래픽의 정량화에 대해 자세히 설명합니다.

출처: Deseure, K., et al. Chronic Constriction Injury of the Rat's Infraorbital Nerve (IoN-CCI) to study Trigeminal Neuropathic Pain. J. Vis. 특급 (2015). 이 비디오는 쥐 모델에서 안와하신경을 수축시켜 신경병성 통증을 유발하는 방법을 보여줍니다. 안와하신경을 노출시키고 결찰자를 묶어 이를 수축시킨 후, 손상 부위의 면역 반응은 통증 신호를 뇌에 전달하는 주변 뉴런의 흥분성을 증가시킵니다.

출처: Brakkee, E. M., et al. Surgery and Behavioral Testing in the Tibial Neuroma Transposition Model in Rats. J. Vis. 특급 (2023). 이 비디오는 쥐 경골 신경종 전위(TNT) 모델을 생성하는 절차를 보여줍니다. 마취된 쥐의 뒷다리에 있는 경골 신경을 노출시킨 후 신경을 절제합니다. 다음으로, 피하 터널을 만들고 절단된 신경을 터널에 꿰매어 제자리에 봉합합니다. 재신경 형성을 위한 표적이 없는 경우, 절단된 신경에서 무질서하게 형성된 축삭 파생물이 신경종을 형성하며, 이는 통각(유해) 수용기를 자극하여 신경병성 통증을 유발합니다.

출처: Lee, D. et. al., 마우스의 소음성 난청 및 청력 기능 및 외부 유모 세포 손상 평가에 대한 수정된 실험 조건. J. Vis. Exp. (2023)이 비디오는 마우스의 소음성 난청 절차를 보여줍니다. 높은 볼륨의 소리는 내이의 유모 세포를 손상시키고 청각 경로를 방해하여 청각 장애를 초래합니다.

출처: Lee, D., et. al입니다. 마우스의 소음성 난청에 대한 수정된 실험 조건과 청력 기능 및 외부 유모 세포 손상 평가. J. Vis. 특급. (2023)이 비디오는 마우스의 청각 뇌간 반응(ABR)을 측정하는 방법을 보여줍니다. 전극은 마취된 쥐의 머리, 귀 뒤, 꼬리 근처에 배치됩니다. 다양한 강도의 음향 자극이 전달되고 생성된 전기 신호가 파형으로 기록됩니다.

출처: Olmstead, D. N., et al., Facial Nerve Axotomy in Mice: A Model to Study Motoneuron Response to Injury. J. Vis. 특급 (2015). 이 비디오는 마우스의 안면 신경 파쇄 절차를 보여주며, 주요 랜드마크를 둔기로 해부하면 스타일로마스토이드 구멍에서 안면 신경 줄기가 노출됩니다. 그런 다음 겸자를 사용하여 신경 줄기를 압박하여 축삭 손상을 유도하고 신경 신호 전달을 방해합니다.

출처: Cheah, M., et al. 등뿌리 신경절 주사(Dorsal Root Ganglion Injection)와 등뿌리 크러시 손상(Dorsal Root Crush Injury)은 감각 축삭 재생의 모델입니다. J. Vis. 특급 (2017). 이 비디오는 바이러스 현탁액을 배측근신경절(DRG)에 주입하고 마취된 쥐에서 등쪽 뿌리 분쇄를 통해 제어된 축삭 손상을 유도하는 단계별 절차를 보여줍니다. 이 프로토콜에는 DRG를 노출시키고, 축삭 재생을 촉진하기 위해 성장 촉진 바이러스 벡터를 전달하고, 감각 신경 손상 및 재생을 모델링하기 위해 척수에 대한 축삭 연결을 절단하는 것이 포함됩니다.

TUNEL 분석을 사용하여 세포사멸 세포사멸을 검출하려면 효소 proteinase-K로 뇌 절편을 처리합니다.

형광 현미경을 사용하여 손상된 신경을 시각화하면 축삭 팽창 및 단절이 점진적으로 증가합니다.

약물 캡슐화는 종양 세포 특이성을 향상시키고 신경 독성을 감소시킵니다.

이 비디오는 마우스의 외상성 뇌 손상(TBI)을 보여줍니다. 두개골을 노출시킨 후 TBI 부위를 표시합니다. 그런 다음 마우스가 TBI 장치 아래에 위치합니다. 충격은 금속 막대를 들어 올려 두개골과 접촉하는 임팩터에 자유롭게 떨어뜨릴 수 있도록 함으로써 전달됩니다.

이 비디오는 신경 세포의 성숙과 연결성을 분석하기 위해 미세유체 칩 내에서 배양된 쥐 해마 뉴런의 면역형광 염색을 보여줍니다.

이 비디오는 마우스의 일차 소뇌 과립 뉴런에서 뉴런 손상 모델의 생성을 보여줍니다. 흥분성 신경전달물질 수용체 작용제인 NMDA와 공동 작용제인 글리신을 사용하여 신경 손상을 유도하는 데 필요한 단계를 설명합니다. NMDA와 글리신은 특정 신경 수용체에 결합하여 과도한 자극을 유발하고 세포 내 칼슘을 대량으로 유입시켜 신경 세포 손상과 사멸을 초래합니다.

이 비디오는 특정 시냅스전 단백질의 분포를 정량화하기 위해 마우스 뇌 절편의 면역형광 염색을 보여줍니다. 이 프로세스에는 비특이적 부위를 차단하고, 표적 단백질에 대한 1차 항체와 참조 마커를 적용한 다음, 2차 항체 라벨링 및 핵 counterstaining이 포함됩니다. 참조 마커는 일관된 기준선을 제공하여 정확한 정량화를 보장하며, 공초점 현미경을 사용하여 뇌 영역 전반에 걸쳐 시냅스전 단백질의 분포를 분석합니다.

이 비디오는 주사 전자 현미경(SEM)과 투과 전자 현미경(TEM)의 요소를 결합하여 고해상도 이미지를 생성하는 기술인 대규모 주사 투과 전자 현미경(STEM)을 사용하여 제브라피시 유충의 뇌 손상을 조사하는 방법을 보여줍니다. 뇌 손상을 식별하기 위해 샘플을 준비하고 고해상도 STEM 이미지를 획득하는 데 필요한 단계를 간략하게 설명합니다.

이 비디오는 마취 준비부터 안면 신경 손상 유도까지 단계를 자세히 설명하는 쥐 모델의 수술 프로토콜을 보여줍니다. 이 프로토콜은 의학 연구에서 신경 재생 및 수술 기법을 연구하는 데 유용합니다.

이 영상은 쥐의 두개골 개방 외상성 뇌 손상을 유도하는 과정을 보여주며, 두개골을 뚫고 구멍을 뚫고 뼈 피판을 제거하여 뇌 피질을 노출시키고 높은 압력을 가하여 외상을 유발하는 절차를 보여줍니다. 그런 다음 상처를 봉합하여 후속 실험을 위해 마우스 모델을 준비합니다.

이 비디오는 자연 뇌사를 모방하여 풍선 카테터를 통해 제어된 두개내압을 증가시켜 마우스 모델에서 뇌사를 유도하는 절차를 보여줍니다.

이 비디오는 레이저를 사용하여 쥐의 운동 피질에서 정확하고 통제된 뇌 손상을 생성하는 절차를 보여줍니다.

이 동영상은 일차 신경 줄기 및 전구 세포, 뉴런에서 변형된 시알로글리코단백질의 비오틴화(biotinylation) 및 형광 라벨링과 형광 현미경을 사용한 시각화를 보여줍니다.

이 비디오에서는 충격관 장치를 사용하여 제어된 가압을 통해 폴리머 다이어프램을 파열시켜 충격파를 생성합니다. 충격파는 안전한 가방에 들어 있는 뇌 조각에 충격을 가하여 뇌 조각에 외상성 손상을 입힙니다.

이 비디오는 재활용된 시냅스 소포의 광학 분석을 위해 배양된 뉴런을 준비하는 절차를 보여줍니다. 이 과정에는 시냅스 소포 단백질의 형광 태깅과 면역 염색을 포함하여 뉴런 내의 재활용된 소포를 라벨링하고 시각화합니다.

이 비디오는 인간 유도 만능 줄기 세포 유래 뉴런(hiPSCN)에 스트레치 손상을 유도하는 과정을 보여줍니다. 세포는 실리콘 멤브레인이 부착된 바닥이 없는 다중 웰 플레이트에서 채취됩니다. 제어된 기계적 응력이 세포막에 가해져 세포골격 파괴 및 세포막 손상을 유도하여 세포에 스트레치 손상 표현형을 유도합니다.

이 비디오는 가스 추진 충격기가 있는 타격 장치를 사용하여 마취된 초파리 파리에게 폐쇄 머리 외상성 부상을 입히는 절차를 보여줍니다. 부상은 신경 기능에 영향을 미치고 보행 능력을 손상시킵니다.

이 비디오는 두개골 노출 및 뇌 병변 생성과 관련된 쥐의 피질 찌르기 손상 절차를 보여줍니다. 성상세포의 신경 보호 반응인 반응성 성상아교세포증을 유도하여 CNS 외상, 염증 및 복구 메커니즘을 연구합니다.

이 비디오는 측면 유체 타악기(LFPI)를 사용하여 외상성 뇌 손상(TBI)의 마우스 모델을 생성하는 방법을 보여줍니다. 쥐를 마취시키면 두개골에 창을 만들어 뇌가 노출됩니다. 식염수로 채워진 캐뉼라를 창에 부착한 다음 LFPI에 연결합니다. 장치의 진자가 해제되어 외상성 뇌 손상을 입히는 압력 펄스를 생성합니다.

이 비디오는 마우스 모델에서 외상성 뇌 손상(TBI)을 유도하는 절차를 보여줍니다. 두개골이 노출된 마취된 쥐를 취하여 두개골에 구멍을 만든 다음 충격 장치를 사용하여 제어된 피질 손상을 유도합니다. 부상은 뇌 조직을 손상시켜 인지 기능과 운동 협응력 장애를 유발합니다.

이 비디오는 쥐에서 흉추 척수 반쪽 절개를 수행하기 위한 수술 절차를 보여줍니다. T8 척수 분절을 노출시키고, 한쪽 신경관을 파괴하기 위해 반쪽 절개를 수행하고, 수술 후 관리를 제공하는 단계를 간략하게 설명합니다.

이 영상은 고출력 레이저를 이용하여 초파리 유충에서 표적 신경 손상을 유도하는 방법을 보여줍니다. 유충을 현미경으로 관찰한 후 저전력 레이저로 형광 뉴런을 스캔한 다음 레이저 출력을 높여 국소 손상을 유도합니다. 부상은 증가된 형광과 부상 부위의 분화구에 의해 확인됩니다.

이 비디오는 초파리에서 폐쇄두부 외상성 뇌손상(TBI)을 유도하기 위해 고충격 외상(HIT) 장치를 사용하는 방법을 보여줍니다. TBI는 신경 기능에 영향을 미치는 기계적 뇌 외상을 유발하며, 이는 시간이 지남에 따라 신경 퇴행과 사망으로 이어집니다.

이 비디오는 초파리 뇌에서 관통 외상성 뇌 손상의 유도를 보여줍니다. 새로 출현한 파리를 선택하고 마취한 후 형광이 장착된 실체 현미경 아래에 배치합니다. GFP 발현 버섯 몸체가 확인되고 Minutien 핀이 삽입되어 부상을 입힙니다. 파리는 추가 연구를 위해 회복할 수 있습니다.

출처: Shandra, O. et al., Inducing post-traumatic epilepsy in a Mouse Model of Repetitive Diffuse Traumatic Brain Injury. J. Vis. 특급...

이 비디오는 측면 유체 타악기 손상(FPI) 장치를 사용하여 쥐의 외상성 뇌 손상(TBI)을 유도하는 방법을 보여줍니다. 이 절차는 마취된 쥐의 두개골에 구멍을 뚫어 경막을 노출시키고 그 위에 캐뉼라를 부착하는 것을 포함합니다. 그런 다음 쥐를 장치에 연결하면 뇌에 도달하는 압력파를 생성하여 신경 세포 사멸과 혈관 손상을 일으킴으로써 TBI를...

출처: Yang, Z., et.al. 생쥐의 반복적 뇌진탕 머리 부상 모델. J. Vis. 특급 (2016). 이 비디오는 전자기 충격 장치를 사용하여 마우스에서 반복적인 뇌진탕 머리 부상의 유도를 보여줍니다. 이 절차에는 마취된 마우스의 두개골에 있는 전두엽 봉합사와 양털 봉합사 사이에 임팩트 팁을 배치하고 프로브 팁을 사용하여 충격 깊이를 정확하게 설정하는 것이 포함됩니다. 충격은 경미한 외상성 뇌 손상을 시뮬레이션하기 위해 통제된 속도와 깊이로 전달되며, 그 후 회복 기간이 이어지며 지정된 간격으로 손상이 반복됩니다.

출처: Logsdon, A. F., et al. 설치류의 폐쇄성 가벼운 외상성 뇌 손상의 전임상 평가를 위한 저강도 폭발파 모델. J. Vis. Exp. (2020)이 비디오는 가압 가스 쇼크 튜브 설정을 사용하여 마우스 모델에서 폐쇄 머리 경증 외상성 뇌 손상의 유도를 보여줍니다. 생성된 압력파는 폴리에스테르 막을 파열시켜 쥐의 머리에 충격파를 전달하여 두개골 내에서 빠른 뇌 움직임을 일으켜 가벼운 외상성 뇌 손상을 일으킵니다.

출처: Macheda, T., et. al. 마우스의 경미한 외상성 뇌 손상의 전자기 제어 폐쇄 머리 모델. J. Vis. Exp. (2022) 이 영상은 입체 프레임을 사용하여 마우스 모델에서 폐쇄 머리 부상을 유도하는 절차를 보여줍니다. 통제된 충격은 경미한 외상성 뇌 손상을 복제하여 연구원들은 부상 후 반사 신경과 행동을 측정하여 신경학적 영향과 회복을 연구할 수 있습니다.

출처: Elzat, E. Y. Y., et al., 최소 침습 기법을 기반으로 한 마우스 타박상 척수 손상 모델 구축. J. Vis. 특급 (2022). 이 비디오는 척수 손상 동축 플랫폼을 사용하여 마우스 모델에서 T9 수준의 척수에 타박상 부상을 유발하는 방법을 보여줍니다. T9 수준의 척수에 체중이 가해져 타박상이 발생하여 즉시 조직이 변색되고 부어오릅니다.

출처: Lakshman, N., et al. 최소한의 척수 손상의 마우스 모델에서 내인성 신경 줄기 세포 활성화를 평가하기 위한 신경구 분석. J. vis. 특급 (2018). 이 비디오는 쥐 척수 손상 모델에서 신경 줄기 세포(NSC)의 활성화 및 이동을 보여줍니다. 척수를 노출시키기 위해, 마취된 마우스에서 척추의 흉부 부위에서 척추를 제거합니다. 그런 다음 구부러진 바늘을 사용하여 척수의 백질에 표면 손상을 만들어 중심관을 보존합니다. 부상 후 운하를 둘러싼 NSC가 활성화되고 조직 복구를 돕기 위해 부상 부위로 이동합니다.

출처: Kumar, S., et. al. 척수 손상 후 욕창의 마우스 모델. J. Vis. Exp. (2019)이 비디오는 마우스의 척수 손상에 대한 자세한 유도를 보여줍니다. 마취된 쥐를 절개하여 T9-T10 척추뼈를 노출시키고 가시돌기를 제거합니다. 그런 다음 노출된 척수를 절제하여 부상을 입힙니다. 그런 다음 수술 부위를 닫고 마우스가 회복할 수 있도록 합니다.

이 동영상은 비오틴화(biotinylation)를 사용하여 마우스 피질 성상세포의 표적 단백질 내재화를 평가한 후 세포 용해, 스트렙타비딘 기반 단백질 추출, 변성 및 웨스턴 블롯 분석을 통해 성공적인 내재화를 확인하는 방법을 보여줍니다.

이 비디오는 패턴화된 단백질 영역에서 해마 뉴런을 사용하여 단백질 활성을 평가하는 방법을 보여줍니다. 뉴런은 테스트 단백질 영역에서 반발력을 보이고 대조 단백질 영역에서 부착을 나타내어 매력적이거나 반발적인 단백질 활동의 효과를 강조합니다.

이 비디오는 마취된 쥐에서 상공막 정맥에 고긴장성 식염수를 주입하여 녹내장 유도를 보여줍니다. 식염수는 슐렘관을 통해 섬유주 그물망으로 들어가 조직 흉터를 유발하여 수액 유출을 차단하고 안압을 높입니다. 높은 압력은 망막 신경절 세포를 손상시켜 녹내장을 유발합니다.

균질화기로 조직을 균질화하여 뇌 기능에 필수적인 글루탐산 탈카르복실라제 또는 GAD 효소 동형을 포함한 단백질을 방출합니다.

이 비디오는 마취된 동물의 시신경에 외과적으로 접근하여 국소 탈수초를 유도하기 위해 리솔레시틴을 정확하게 전달하여 추가 연구를 위한 신경 병리학적 조건을 만드는 절차를 보여줍니다.

형광 거짓 신경전달물질 또는 FFN을 함유한 aCSF에서 슬라이스를 배양합니다.

이 비디오는 Theiler's Murine Encephalomyelitis Virus(TMEV)에 감염된 쥐에서 취급 유발 발작의 유도를 보여줍니다. 과흥분성 뉴런을 가진 감염된 쥐는 외부의 물리적 자극에 노출됩니다. 이러한 노출은 스트레스를 유발하여 뉴런의 비정상적인 전기 활동을 유발하여 발작을 일으킵니다.

이 비디오는 간질 관련 유전자 돌연변이가 있는 형질전환 마우스에서 통제된 챔버에서 체온을 서서히 증가시켜 열 유도 발작을 유도하는 절차를 보여줍니다. 이 프로토콜은 간질에 대한 발작 메커니즘과 잠재적 치료법을 연구하는 데 사용됩니다.

이 비디오는 피질 흥분성 피라미드 뉴런에서 광 활성화 양이온 채널을 발현하는 형질전환 마우스의 관상 피질 절편에서 ictal events의 유도를 보여줍니다. 절편은 기록실에 놓이고, 기록전극은 표재성 피질층에 삽입된다. 칼륨 채널을 차단하는 발작 유도 약물을 관류하면 뉴런은 과흥분 상태가 되고 자발적인 ictal 이벤트를 생성합니다. 온디맨드 ictal 이벤트를 생성하기 위해 짧은 광 펄스를 사용하여 피라미드 뉴런의 양이온 채널을 활성화하여 흥분성 신경 전달 물질의 방출을 트리거하여 시냅스 후 뉴런이 짧은 기간 동안 ictal 이벤트를 생성하도록 유도합니다.

이 비디오는 GABA-A 수용체 길항제인 펜틸렌테트라졸(PTZ) 주사를 사용하여 마우스에서 간질을 유발하는 과정을 보여줍니다. PTZ의 반복적인 복강 내 투여는 염화물 이온 유입을 억제하고 억제성 신경 전달을 방해하며 발작을 유발하는 뉴런의 과흥분성을 유발하여 발작 역치를 점진적으로 낮춥니다. 이 과정은 불을 붙이고 자연 발작을 일으켜 만성 간질을 모방합니다.

출처: Soukupová, M., et al. 자유롭게 움직이는 쥐에서 EEG 기록 중 흥분성 아미노산의 미세 투석. J. Vis. Exp. (2018)이 비디오는 만성 간질 유도가 있는 쥐의 세포외 흥분성 신경전달물질 수치 평가를 보여줍니다. 미세 투석 프로브를 뇌에 이식하고 뇌파검사(EEG)를 사용하여 발작이 없음을 확인한 후, 간질성 쥐의 상승된 신경전달물질 수치를 평가하기 위해 세포외액을 수집합니다. 그런 다음 고칼륨 용액을 주입하여 신경 흥분성을 유지하고 신경 전달 물질의 방출을 증가시키고, 흥분성 신경 전달 물질에서 칼륨 유도 피크를 평가하기 위해 샘플을 수집합니다.

출처: Schönherr, S., et. al. 마우스 편도체에서 글루타메이트 수용체의 입력 특이적 배열을 조사하기 위해 광유전학 및 동결 파괴 복제 면역 라벨링을 결합했습니다. J. Vis. 특급. (2016)이 비디오는 전자 현미경을 위한 마우스 뇌 조직의 동결 파괴 복제본의 면역 라벨링을 보여줍니다. 파쇄되고 코팅된 복제품은 수용체를 노출시키기 위해 소화됩니다. 1차 및 골드 태그가 지정된 2차 항체를 추가하여 특정 신경세포막 수용체를 표지합니다. 복제본은 그리드에 장착되고 전자 현미경으로 시각화됩니다.

이 비디오에서는 교모세포종과 미세아교세포를 고분자 매트릭스 용액과 혼합하여 다공성 챔버 삽입물로 옮겨 겔이 형성되어 세포를 포매합니다. 미세아교세포는 다공성 삽입물을 통한 교모세포종 세포의 이동을 자극하여 종양 세포가 주변 조직으로의 침입을 모방하고, 세포를 고정하고 추가 분석을 위해 준비합니다.

이 비디오에서는 원심분리를 통해 형광 표지된 미토콘드리아를 교모세포종 줄기세포(GSC)로 전달할 수 있는 방법을 보여줍니다. 공여자 미토콘드리아의 성공적인 흡수 및 기능적 통합은 컨포칼 현미경을 사용하여 형광을 검출함으로써 확인됩니다.

출처: Guyon, J., et al. 교모세포종에 대한 3D 스페로이드 모델. J. Vis. Exp. (2020)이 비디오는 종양 세포 침입의 3차원 스페로이드 모델의 생성을 보여줍니다. 스페로이드는 인간의 뇌종양 세포에서 형성되며 콜라겐 매트릭스에 내장되어 있습니다. 스페로이드 말초의 종양 세포는 침습적 표현형을 채택하여 프로테아제를 분비하여 콜라겐을 분해하고 전진하여 주변 기질을 침범합니다.

출처: Lim, M., et al. 암세포의 내부 경동맥 주입에 의한 뇌 전이 모델링. J. Vis. Exp. (2022)이 영상에서는 마취된 쥐가 암세포를 총경동맥(CCA)에 주입하여 뇌로의 표적 전달을 촉진하는 수술을 받습니다. 이 시술에는 경동맥의 정확한 봉합 및 조작이 포함되어 주입된 세포를 내부 경동맥(ICA)으로 향하게 하여 시간이 지남에 따라 뇌의 종양 형성을 촉진합니다.

출처: Ear, P. H., et. al. 소장 신경내분비종양 스페로이드의 확립 및 특성화. J. Vis. Exp. (2019)이 비디오는 소장 신경내분비 종양 스페로이드의 면역 형광 염색을 보여줍니다. 스페로이드는 고정, 투과화 및 차단된 다음 1차 및 2차 항체와 함께 배양됩니다. 형광 현미경으로 핵을 장착하고 시각화하기 전에 염색하기 위해 염료를 첨가합니다.

출처: Mudduluru, G., et. al. 암세포 이동 및 침입의 임피던스 기반 실시간 측정. J. Vis. Exp. (2020)이 비디오는 교모세포종 세포 침입 및 이동을 측정하기 위한 임피던스 기반 분석을 보여줍니다. 세포는 세포외 기질을 분해하고, 미세 다공성 막을 통해 이동하며, 전극에 부착하여 임피던스를 생성합니다. 이 실시간 분석은 암 연구 응용 분야에 대한 침습적 잠재력을 반영합니다.

출처: Bolcaen, J., et. al., 마이크로 조사기를 사용한 교모세포종 쥐 모델의 PET 및 MRI 유도 조사. J. Vis. Exp. (2017)이 비디오는 뇌종양을 유발하는 교모세포종 세포를 전전두엽 피질에 정위 주사하여 교모세포종 쥐 모델을 확립하는 절차를 보여줍니다.

출처: Mendez, F. M. et al., 쥐 뇌 종양 신경구를 사용한 네이티브 염색질 면역침전.J. vis. 특급 (2018). 이 비디오는 천연 염색질 면역침전을 사용하여 마우스 뇌종양에서 유래한 신경구 세포에서 단백질-DNA 복합체를 분리하는 방법을 보여줍니다. 염색질 준비, 면역침전, 세척 및 단백질 분해를 위한 단계를 자세히 설명하여 다운스트림 분석을 위해 DNA를 방출합니다.

출처: Núñez, F. J., et al. 파라핀 함유 3D 신경교종 신경구 배양에 대한 면역조직화학에 의한 신경교종의 바이오마커 평가. J. Vis. 특급. (2019).이 비디오는 파라핀이 포함된 뇌종양 신경구에서 종양 바이오마커를 라벨링하기 위한 면역조직화학 기술을 보여줍니다. 신경구 절편은 파라핀 제거 및 재수화 과정을 거친 후 바이오마커 부위를 노출시키는 치료를 받습니다. 그런 다음 1차 및 2차 항체를 적용하여 이러한 바이오마커를 라벨링합니다. 2차 항체는 아비딘 접합 과산화효소(avidin-conjugated peroxidase enzyme)에 결합되어 있으며, 이 효소는 발색 기질을 산화시켜 바이오마커 위치를 나타냅니다. 마지막으로, 현미경 분석을 위해 핵 counterstaining 및 slide preparation이 완료됩니다.