쥐 모델에서 활동성 HIV 감염 확립

초록

출처: Li, H., McLaurin, et al. EcoHIV 뇌 감염의 쥐 모델. J. Vis. 특급. (2021).

이 비디오는 키메라 HIV 바이러스를 쥐의 뇌 피질에 주입하는 절차를 보여주며, 여기서 바이러스 RNA는 숙주 게놈에 통합되고 복제 및 확산되어 실험 모델에서 활성 HIV 감염을 확립합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. EcoHIV-EGFP [Ecotropic HIV Enhanced Green Fluorescent Protein] 바이러스 입위 수술

1. 3% 세보플루란을 사용하여 쥐를 마취합니다. 쥐가 유해한 자극에 반응하지 않고 반사 신경이 없을 때 1.2 단계로 진행합니다.
2. 뇌 부위의 수염을 면도하고 70% 에탄올과 클로르헥시딘 기반 스크럽으로 피부를 두 번 살균합니다. 입체 장치에서 엎드린 자세로 쥐를 고정합니다.
3. 두피 정중선을 따라 피부를 절개(5-6cm)합니다.
4. 0.8mm 측면, 1.2mm 높이에서 브레그마까지 두 개의 드릴링 위치를 표시합니다. 각 두개골 위치에 구멍(직경 0.4mm)을 뚫습니다.
5. 10μL 주사기에 적정 EcoHIV 렌티바이러스 용액(1.04 ×^{10 6} TU/mL)을 채웁니다. 주사기를 정위 장치에 고정합니다.
6. 드릴 구멍 표면에 가까운 바늘을 아래로 움직입니다. 2.5mm 깊이를 측정하고 이동합니다.
7. 0.2 μL/분의 속도로 1 μL의 바이러스 용액을 주입합니다. 바늘을 주입 부위 내부에 5분 동안 유지합니다. 바늘이 쥐 두개골 바깥쪽에 올 때까지 바늘을 천천히 위로 움직입니다.
8. 4-0 명주실로 피부를 봉합합니다.
9. 절개 부위를 70% 에탄올로 한 번 소독합니다. 부토르판올(Dorolex, 체중 0.1mg/kg)을 피하주사합니다.
10. 쥐가 깨어날 때까지 가열 패드가 있는 회수실로 쥐를 옮깁니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
항생제-항진균 용액	셀그로	30004CI	100배
커버 유리	폭스바겐	637-137
훈련
Ethicon Vicryl Plus 항균, 4-0 Polyglactin 910 봉합사, 27in. FS-2	국제 의료 동물	VCP422H
해밀턴 시린지	해밀턴	1701
홍채 겸자	세계적인 정밀 기기	15914
아이리스 가위	세계적인 정밀 기기	500216
입체택시 장치	Kopf 악기	모델 900
Vannas 가위	세계적인 정밀 기기	500086

년 년 년