지방다당류를 이용한 쥐 모델에서 대뇌 미세출혈 유도

Abstract

출처: Li, D., et al. 쥐에서 리포다당류 주입에 의해 유발된 아급성 대뇌 미세출혈. J. Vis. 특급 (2018).

이 비디오는 리포다당류(LPS)를 사용하여 쥐 모델에서 혈액뇌장벽(BBB) 파괴 및 뇌 미세출혈을 유도하는 과정을 보여줍니다. 이는 BBB 투과성 증가와 그에 따른 뇌 조직 손상으로 이어지는 면역 반응의 순서를 강조합니다.

Protocol

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 재료

1. LPS 주입의 준비
   1. Salmonella typhimurium에서 추출한 LPS 분말 25mg에 증류수 25mL를 최종 농도 1mg/mL까지 추가합니다. 주사를 4°C의 멸균 튜브에 보관하십시오.
      주의: LPS는 독성이 있습니다.

2. 동물

1. 생후 10주(평균 체중: 280 ± 20g)의 수컷 Sprague-Dawley(SD) 쥐에게 복강내 주사로 LPS를 투여합니다.
   주의: 다른 조직에서 쥐를 구입하는 경우 적응 단계는 7일 이상이어야 합니다.

3. LPS 주입

1. 각 쥐에게 1mg/kg의 용량으로 복강내 LPS를 주입하고 쥐를 집 우리로 되돌립니다.
   메모: 마취는 필요하지 않습니다.
2. 6 시간 후, 쥐에게 동일한 용량의 LPS 주사를 주입합니다.
3. 16시간 후 동일한 용량의 LPS를 쥐에게 주입합니다.
   주의: SD 랫트에 1mg/kg의 용량으로 LPS를 주입하면 5%의 폐사율이 발생할 수 있습니다. 사망률은 젊거나 나이가 많은 쥐 또는 임신한 암컷 쥐에서 더 증가할 수 있습니다.
4. LPS 주입 후 쥐를 우리로 되돌리고 음식과 음료에 대한 임시방편을 제공합니다.
   메모: 쥐는 뚜렷한 전신 염증 반응을 보이므로 실험 내내 케이지를 깨끗하게 유지해야 합니다. 쥐는 첫 번째 LPS 주입 후 체중, 일반적인 외모 및 태도에 대해 자주(2일) 모니터링해야 합니다. 쥐가 구부정한 자세, 움직이기를 꺼리거나, 현저한 체중 감소(>20%), 포르피린 염색을 보이기 시작하면 7일간의 연구 종료 전에 인도적으로 안락사시켜야 합니다.

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
증권 시세	시그마-알드리치	L-2630	염증 유도에
인산염 완충액 식염수(PBS)	솔라바이오	P1022	실험에 일반적으로 사용되는 일종의 완충 용액