반응성 성상교세포증을 유도하기 위해 마우스 모델에서 피질 찌르기 손상 발생

Abstract

출처: Allahyari, R. V. et al. 전뇌 찌르기 손상에 의한 생체 내 반응성 신경교증 유발. J. Vis. 특급 (2015)

이 비디오는 두개골 노출 및 뇌 병변 생성과 관련된 쥐의 피질 찌르기 손상 절차를 보여줍니다. 성상세포의 신경 보호 반응인 반응성 성상아교세포증을 유도하여 CNS 외상, 염증 및 복구 메커니즘을 연구합니다.

Protocol

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 수술을 위한 마우스 준비

1. 가정용 케이지에서 마우스를 제거하고 무게(g)를 잰다.
2. 마우스를 이소플루란 유도 챔버에 넣고 산소를 2L/분으로, 이소플루란 기화기를 5로 설정하여 약 3-5분 동안 마취 수술면을 유도합니다. 느린 호흡과 고정을 모니터링합니다. 발가락 핀치 반사를 사용하여 마우스가 완전히 진정되었는지 확인하십시오.
3. 마우스가 완전히 진정되면 입체 프레임에 놓고 이소플루란에 튜브로 부착된 노즈 콘에 코를 고정합니다. 이어바를 외이도에 삽입하고 조여 머리가 안정되도록 합니다.
4. 머리를 귀에서 귀로, 눈 사이에서 귀 뒤까지 면도합니다.
5. 이소프로필 알코올과 베타딘 요오드 용액을 각각 3회씩 번갈아 가며 닦아 피부를 살균합니다.
6. 수술 중 양쪽 눈이 건조해지지 않도록 양쪽 눈에 인공 눈물을 바르십시오.

2. 외과 수술 절차

1. 발가락이나 꼬리를 꼬집어 마취 깊이를 모니터링합니다. 마우스....

Results

그림 1: 개두술 부위를 묘사한 쥐 두개골의 개략도. 파란색 선은 시추할 영역의 경계를 식별하는 초기 표시를 나타냅니다. 상단 및 왼쪽 표시는 각각 관상 봉합사 또는 시상 봉합사의 아래 또는 측면에서 1mm 떨어진 곳에서 측정됩니다. 하단 및 오른쪽 표시는 각각 관상 봉합사와 시상 봉합사에서 4mm 떨어진 곳에서 측정됩니다. 개두술은 표시된 경계(점선) 내에 원을 뚫어 직경이 약 3mm(점선)인 개두술을 만들어 수행됩니다. 회로도는 확장되지 않습니다.

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Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
스테레오택스	하버드 기구	726049
고속 마이크로 드릴	하버드 기구	724950
스테인레스 스틸 메스 블레이드, #11	메드벳	JOR581S
5/45 각진 집게	정밀 과학 도구	11251-35
젤폼 스펀지 12cmx7mm	어부	NC9841478
항체 및 다른 시약	생산자	카탈로그 번호	희석 (명시야) 희석(형광)
Rb 안티 GFAP	다코	Z033429-2	1:20K 1:1케이
SHP 안티 BrdU	아브캠	AB1893	1:2K 1:500h
비오틴화 염소 안티 토끼	벡터 연구소	BA-1000	07:40h
비오틴화 토끼 안티 양	벡터 연구소	BA-6000	07:40h
Alexafluor 488 염소 안티 토끼	생명 기술	A-11008	07:40h
Alexafluor 568 당나귀 안티 양	생명 기술	A-21099	17:40h
DAPI 핵산 얼룩	생명 기술	D3571	17:40h
크레실 바이올렛 아세테이트	시그마 알드리치	C5042-10G	1%