마우스 모델에서 대뇌 해면상 기형의 Cre-LoxP 매개 유도

초록

출처: Choi, J. P., et al. 마우스 모델에서 대뇌 해면상 기형의 유도 및 마이크로 CT 이미징. J. Vis. 특급 (2017년)

이 비디오에서는 loxP 부위와 에스트로겐 수용체에 융합된 Cre 재조합효소 옆에 있는 Ccm2 유전자를 가진 유전자 변형 쥐 강아지가 뇌 해면체 기형(CCM)을 유도하는 데 사용됩니다. 4-하이드록시타목시펜의 투여는 내피 세포에서 Cre를 활성화하여 Ccm2의 결실과 뇌의 CCM 형성으로 이어집니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 마우스 모델에서 대뇌 해면상 기형 또는 CCM의 유도

1. 크로스 Cdh5-CreErt2; Cdh5-CreErt2로 깔짚을 생성하기 위해 Ccm2fl/fl을 가진 Ccm2 fl/fl 마우스; Ccm2fl/fl(Ccm2iECKO) 새끼 및 새끼 대조군(Ccm2fl/fl). Cdh5-CreErt2 및 Ccm2fl/fl 동물은 이전에 기술되었습니다19.
2. 4HT를 100 % 에탄올에 용해시키고 30 μL 4- 하이드 록시 타모시펜 (4HT) (농도 : 10 mg / mL)의 분취액에 -80 °C에서 보관하십시오. 사용 당일, 옥수수 기름 (0.5 mg / mL)에 묽은 분주 4HT를 희석합니다.
3. 인슐린 주사기를 사용하여 실험적 CCM 병변을 유도하기 위해 P1의 신생아 새끼에게 50μL의 4HT(0.5mg/mL)를 위강내 주
사합니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
4-하이드록시 타목시펜	시그마-알드리치	H6278	Cdh5-CreErt2를 활성화하려면
옥수수 기름	시그마-알드리치	C8267-500ML	4-하이드록시 타목시펜을 희석하기 위해
인슐린 주사기