신경근 차단제 치료를 통한 근육 수축 평가

초록

출처: Lin, C. U., et al., 인간 유도 만능 줄기 세포에서 유도된 체외 신경근 접합부. J. Vis. 특급 (2020)

이 동영상은 배양된 운동 뉴런, 슈반 세포 및 근관을 사용하여 근육을 평가한 후 신경근 차단제로 처리하여 수축을 억제하는 방법을 보여줍니다. 색상으로 구분된 시간 모션 그래픽은 색상으로 구분된 시간 모션 그래픽을 표시합니다. 빨간색은 가장 빠른 움직임을 나타내고 파란색은 가장 느린 움직임을 나타냅니다.

프로토콜

1. 근육 수축 및 큐어 치료

1. 근관 수축을 유발하려면 배양 배지에 25mM 염화칼슘(CaCl₂)을 첨가합니다. 근관의 움직임은 1\u20122분 후에 관찰할 수 있습니다.
2. 6웰 플레이트를 도립 현미경의 스테이지에 놓습니다. 라이브 셀 현미경으로 근관 수축을 동영상으로 녹화합니다.
3. 근관수축을 멈추려면 배양 배지에 큐라레(300ng/mL)를 첨가합니다. 그런 다음 1.2단계로 동영상을 녹화합니다.
4. 모션 벡터 분석 소프트웨어로 동영상 파일을 연 다음 모션 분석 버튼을 클릭하여 동영상을 분석합니다.
   참고: 근관 수축은 시간-모션 그래픽으로 표시됩니다. 영화는 myotubes의 이동 속도를 보여주기 위해 색상으로 구분되어 있습니다. 색상으로 구분된 반짝이는 신호는 근관의 움직임을 나타내며 빨간색은 가장 빠른 이동 속도를 나타내고 파란색은 가장 느린 이동 속도를 나타냅니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
배지, 성장 인자 및 시약	항목	브랜드	고양이. 숫자
	B27, 기코	기코	12587-001
	BDNF	R&D 시스템	248-BD
	ECM, 마트리겔 (성장인자 감소)	코닝	356230
	지그니파이	R&D 시스템	212-GD
	이온 코터	일본 전자	JEC3000FC
	생세포 현미경	니콘	이클립스 Ti 현미경
	모션 벡터 분석 소프트웨어	소니	SI8000
	N2, 기코	기코	17502-048
	신경기저 매체	기코	21103-049
	NT3	R&D 시스템	267-N3