만성 스트레스 노출을 통한 마우스의 우울증 유도 및 평가

초록

출처: Yan, Z., et al. 만성 스트레스를 받은 마우스에 대한 Xiaoyaosan의 항우울증 효과 평가. J. Vis. 특급 (2019).

이 비디오는 만성 스트레스로 인한 우울증에 대한 마우스 모델을 구축하고 우울 행동을 평가하는 과정을 보여줍니다. 다양한 스트레스 요인의 만성적인 적용은 코르티코스테론의 방출을 유발하여 뉴런의 과잉 흥분과 궁극적인 뉴런 사멸로 이어지며, 이는 생쥐에서 우울증과 유사한 증상을 초래합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 실험 절차를 위한 마우스 준비

참고: 실험 절차를 위해 12주 된 건강한 수컷 C57BL/6J 마우스를 선택했으며 각 마우스의 무게는 18g에서 22g 사이였습니다.

1. 일반적인 SPF(Specific Pathogen Free) 실험실 동물실(22 ± 1°C, 12시간/12시간 어둡게/밝게 주기, 상대 습도: 30–40%) CUMS 절차 전 일주일 동안.
2. 모든 마우스를 체중에 따라 무작위로 대조군과 모델 그룹으로 나눕니다. 각 그룹에는 15마리의 쥐가 있습니다.
3. 실험을 시작하기 전에 마킹 펜을 사용하여 각 그룹의 쥐를 꼬리에 번호를 매깁니다.

2. 생쥐의 우울증 유도

참고: 우울증을 유발하기 위해 모델 그룹과 두 치료 그룹의 마우스는 21일 동안 만성 예측 불가능한 가벼운 스트레스(CUMS)를 받았습니다. 계획은 실제 상황에 따라 변경될 수 있지만 동일한 스트레스 요인을 지속적으로 사용할 수 없다는 원칙을 따라야 합니다.

1. 21일 연속으로 다음 7가지 스트레스 요인 중 두 가지에 매일 쥐를 노출시킵니다. 우리의 모델링 계획은 다음과 같이 설계되었습니다 :
   1. 월요일에 쥐를 음식 부족 (24 시간, 8 : 00 오전 8 : 00 - 8 : 00 오전 동안 각 케이지의 음료수 병을 비우십시오) 및 물 부족 (24 시간, 8 : 00 오전 8 : 00 오전 8 : 00 동안 각 케이지의 음료수 병을 제거).
   2. 화요일에는 쥐를 억제 스트레스(8:00 a.m. - 11:00 a.m., 3시간 동안 작은 플라스틱 통에 쥐를 구속)와 빈 우리(11시간 동안 각 우리에서 패딩 제거, 8:00 a.m. - 19:00 p.m.)에 노출시킵니다.
   3. 수요일에는 생쥐를 젖고 더러워진 우리(각 새장에 물을 붓고 24시간, 오전 8:00부터 오전 8:00까지 젖은 상태로 유지)와 붐비는 우리(24시간, 오전 8:00부터 오전 8:00까지 한 케이지에 5마리의 쥐를 넣음)에 노출시킵니다.
   4. 목요일에는 쥐를 억제 스트레스와 얼음처럼 차가운 수영에 노출시킵니다(각 쥐가 얼음물이 있는 투명한 유리 수족관에서 5분 동안 수영하도록 강요).
   5. 위치 금요일에는 쥐를 젖고 더러워진 우리에 노출시키고 음식을 부족하게 만듭니다.
   6. 토요일에는 쥐를 억제 스트레스와 붐비는 우리에 노출시킵니다.
   7. 일요일에는 쥐를 빈 우리에 노출시키고 얼음처럼 차가운 수영을 하십시오.
2. 모델링이 끝날 때까지(21일차) 매주 털 상태와 체중을 기록합니다. 털 상태의 총 점수를 머리, 목, 등쪽 털, 복부 털, 앞발, 꼬리 및 뒷발의 7가지 신체 부위의 점수의 합으로 계산합니다. 점수가 1이면 단정한 털을 나타내고 점수가 0이면 털이 깔끔하지 않음을 나타냅니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
C57BL/6j 마우스	Beijing Vital River of the Charles River Company	SCXK 2011-0004	60마리의 건강한 수컷 C57BL/6J 마우스는 Charles River Company의 Beijing Vital River에서 구입했습니다.
마우스 케이지	스타일링 바이오테크놀러지	34853016	318×202×135 mm
증류수			물은 실험 내내 사용되었습니다.
ACS-2EAS 전자 저울	Beijing Hengzhongheng Electronic Technology Co., Ltd.		여러 단계에서 마우스의 avoirdupois를 측정하는 데 사용되었습니다.
SPSS Statistics 21.0 소프트웨어	IBM		SPSS 21.0 소프트웨어를 사용하여 데이터를 분석하고, 일반 데이터는 정규성 검정과 분산에 대한 동질성 검정을 기반으로 한 일원 분산 분석 또는 비모수 검정을 사용했으며, 그룹 간 비교를 위해 LSD 방법을 채택했습니다.
Graphpad Prism 6.0 소프트웨어	Graphpad Software,Inc.USA -		Graphpad Prism 6.0 소프트웨어는 통계 그래프를 그리는 데 사용되었습니다.