마우스의 청각 뇌간 반응 측정(Measuring the Auditory Brainstem Response in Mice)

초록

출처: Lee, D., et. al입니다. 마우스의 소음성 난청에 대한 수정된 실험 조건과 청력 기능 및 외부 유모 세포 손상 평가. J. Vis. 특급. (2023)

이 비디오는 마우스의 청각 뇌간 반응(ABR)을 측정하는 방법을 보여줍니다. 전극은 마취된 쥐의 머리, 귀 뒤, 꼬리 근처에 배치됩니다. 다양한 강도의 음향 자극이 전달되고 생성된 전기 신호가 파형으로 기록됩니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 청각 뇌간 반응(ABR) 기반 청력 역치

1. 평가작은 동물을 위해 특별히 설계된 상용 ABR 테스트 시스템을 사용하십시오.
2. 복강내에 틸레타민과 졸라제팜(40mg/kg) 및 자일라진(9.3mg/kg)의 혼합물을 전신 마취를 위해 마우스에 주입합니다.
   참고: ABR 평가는 ~2시간이 소요됩니다. 발열 패드를 통해 열 지원을 제공하고 마우스가 마취 중인 동안 건조를 방지하기 위해 눈 연고를 바르십시오.
3. 전신 마취 하에 마우스의 ABR을 측정합니다. 피하 바늘 전극(12mm)을 꼭지점, 왼쪽 귀 귓바퀴 뒤, 꼬리 근처에 놓고 청력 역치를 측정합니다.
4. 동물의 왼쪽 귀에서 1cm 떨어진 곳에 위치한 스피커를 사용하여 음향 자극을 나타냅니다.
5. 오실로스코프를 사용하여 음향 자극을 제어합니다. 자극에 대해 Sine Wave를 선택하고 창 스케일에 대해 10k를 선택합니다. 주파수 노브를 돌려 원하는 음향 자극 주파수를 얻습니다.
6. 함수 발생기의 진폭 또는 AMLP 노브를 돌려 자극 강도를 조정합니다. AMLP 노브를 적절한 볼륨으로 돌려 원하는 자극 강도를 얻습니다.tage, 보정에서 계산됩니다.
7. 10dB 음압 수준 SPL에서 100dB SPL까지 10dB 단계 크기로 일련의 자극 강도에서 ABR 측정값을 수집합니다.
   참고: 방음 상자에서 청력 역치를 측정합니다. 수집된 신호에서 식별 가능한 파동 V를 발생시킬 수 있는 최소 자극 강도 수준은 ABR 임계값으로 가정되었습니다(그림 1). ABR 평가 후 마취에서 회복될 때까지(~1시간) 동물을 모니터링합니다.

결과

그림 1: 청력의 ABR 측정. 12kHz에서 대표적인 ABR 결과는 13일째(소음 노출 후 1주일)에 수집되었습니다. 각 강도의 파동 V는 식별 가능한 경우 레이블이 지정됩니다.

재료