레이저로 유도된 뇌 손상 쥐 모델에서 혈액-뇌 장벽 무결성 평가

초록

출처: Kuts, R. et al. 쥐의 운동 피질에서 레이저로 인한 뇌 손상. J. Vis. Exp. (2020)

이 비디오는 쥐의 레이저 유도 뇌 손상 후 혈액 뇌 장벽(BBB) 무결성을 평가하는 방법을 보여줍니다. 추적 염료를 꼬리 정맥에 주입하여 뇌로 순환하고 손상된 BBB를 통해 조직으로 누출되도록 합니다. 그런 다음 뇌를 추출하고 가공하여 염료를 방출합니다. 염료의 형광 강도는 레이저로 인한 BBB 손상의 정도를 정량화하기 위해 측정됩니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 레이저 유발 뇌 손상 실험 절차

1. 레이저 그룹으로 표시된 그룹에 20마리의 쥐를 할당하고 다른 대조군(가짜 작동)에 20마리의 쥐를 할당합니다.
2. 레이저 그룹 쥐에게 다음과 같은 방식으로 50J X 10 포인트에서 레이저 방사선 조사를 실시합니다.
   1. 산소에 2% 이소플루란을 혼합하여 쥐를 마취시켜 자발적 환기를 가능하게 합니다. 집게로 꼬리를 꼬집어 충분한 마취 깊이를 확인하여 금단 반사가 없....

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
50% 트리클로로아세트산	SIGMA - ALDRICH	76-03-9
Brain & Tissue Matrices	SIGMA - ALDRICH	15013
Cannula Venflon 22 G	KD-FIX	1.84E+11
Centrifuge Sigma 2-16P	SIGMA - ALDRICH	Sigma 2-16P
Compact Analytical Balances	SIGMA - ALDRICH	HR-AZ/HR-A
디지털 저울	SIGMA - ALDRICH	Rs 4,000
해부 가위	SIGMA - ALDRICH	Z265969
Eppendorf pipette	SIGMA - ALDRICH	Z683884 <
SIGMA - ALDRICH	EP0030119460
에탄올 96 %	ROMICAL		가연성 액체
Evans Blue 2%	SIGMA - ALDRICH	314-13-6
형광 검출기	Tecan, Männedorf Switzerland	모델 Infinite 200 PRO 다중 모드 리더
온도계가 있는 히터	Heatingpad-1	모델: HEATINGPAD-1/2
Infusion Cuff	ABN	IC-500
이소플루란, USP 100%	Piramamal Critical Care, Inc	NDC 66794-017
멀티셋	TEVA MEDICAL	998702
올림푸스 BX 40 현미경	올림푸스
페트리 접시	SIGMA - ALDRICH	P5606
메스 블레이드 11	SIGMA - ALDRICH	S2771
Sharplan 3000 Nd:YAG (네오디뮴 도핑 이트륨 알루미늄 가넷) 레이저 기계	Laser Industries Ltd
Stereotaxic head holder	KOPF	900LS
Sterile Syringe 2 ml	브라운	4606027V
주사기 바늘 27G	브라운	305620

td style='height:15.0pt;'>Eppendorf Tube