미세아교세포와 뉴런을 위한 쥐 코로나 조직 동결절편의 면역조직화학적 염색

초록

출처: Evilsizor, M. N., et. al., 저온 절개 쥐 뇌 조직에 대한 면역 조직 화학을 위한 프라이머: 미세아교세포 및 뉴런에 대한 염색 예. J. Vis. Exp. (2015)

이 비디오는 미세아교세포와 뉴런의 공간 배열을 시각화하기 위해 동결절제된 쥐 뇌 조직에 대한 단계별 면역조직화학 염색 절차를 보여줍니다.

프로토콜

동물 샘플과 관련된 모든 절차는 해당 동물 윤리 검토 위원회에서 검토되고 승인되었습니다.

1. 조직 염색
   1. 빛이 새지 않는 염색 상자에 탈이온수를 적신 보푸라기가 없는 조직으로 "습도 챔버"를 만듭니다.
   2. 보푸라기가 없는 티슈로 슬라이드의 가장자리를 말리고 미니 파펜을 사용하여 티슈 섹션에서 멀리 떨어진 슬라이드 가장자리에 방수 테두리를 만듭니다. 이 경계는 액체의 반월판과 조직의 가장자리 사이에 충분한 공간을 확보하여 표면 장력이 염색에 영향을 미치지 않도록 해야 합니다.
      참고: pap 펜 구충제 테....

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
재료/장비 이름
Fisherbrand Superfrost Plus Glass Slides	Fisher Scientific	22-034-979	조직 장착에 사용
오븐	Thermo Scientific	51028112
미니 파펜	라이프 테크놀로지스	00-8877
앤드윈 사이언티픽 티슈-텍 슬라이드 염색 접시	피셔 사이언티픽	22-149-429	염색 중 모든 세척에 사용, Hoechst 단계
Kimwipes	Fisher Scientific	06-666-A	슬라이드 건조에 사용
블랙 염색 상자	Ted Pella	21050	블로킹 및 염색 단계에 사용
노멀 당나귀 혈청	피셔 사이언티픽	50-413-253	블록 및 항체 배양에 사용
마우스 α-범뉴런	밀리포어	MAB2300	1차 항체에 사용
토끼 α-IBA1	와코화학{{TAG_ 103}}	019-19741	1차 항체에 사용
당나귀 α-토끼 594	Jackson ImmunoResearch	711-585-152	2차 항체에 사용
당나귀 α-mouse 488	Jackson ImmunoResearch	715-545-150	2차 항체에 사용 항체
플루오로마운트-G	서던 바이오텍	0100-01	커버 슬립에 사용
커버 슬립	Fisher Scientific	12544E	커버 슬립에 사용
Axio Observer.Z1 및 LSM 710 (레이저 스캐닝, 컨포칼)	칼 자이스	해당 없음	이미징에 사용
Axioskop A2	칼 자이스	N/A	이미징에 사용

{{TAG_ 36}}조직 건조에 사용 {{TAG_ 79}}