쥐 뇌 조직 샘플에 대한 소수성 조직 세척 방법

초록

출처: Kirchner, K.N., et al., 쥐 뇌 조직에 대한 소수성 조직 세척 방법. J. Vis. 특급 (2020).

이 비디오는 쥐의 뇌 조직 샘플의 소수성 조직 세척 방법을 보여줍니다. 샘플은 메탄올에서 순차적으로 탈수되고 디클로로메탄과 메탄올 혼합물로 처리되어 지질과 색소를 용해시키고 완전한 조직 투명화를 위해 디벤질 에테르로 옮겨져 얇은 절편 없이 상세한 이미징이 가능합니다.

프로토콜

동물 샘플과 관련된 모든 절차는 해당 동물 윤리 검토 위원회에서 검토되고 승인되었습니다.

1. 조직 투명화

1. 실온(RT)에서 1시간 동안 20% 메탄올/80% 탈이온수 용액에 시료를 배양합니다.
2. RT에서 1시간 동안 40% 메탄올/60% 탈이온수 용액에서 샘플을 배양합니다.
3. RT에서 1시간 동안 60% 메탄올/40% 탈이온수 용액에서 샘플을 배양합니다.
4. RT에서 1시간 동안 80% 메탄올/20% 탈이온수 용액에서 샘플을 배양합니다.
5. RT에서 1시간 동안 100% 메탄올에서 샘플을 배양합니다.
6. RT에서 신선한 100% 메탄올에서 하룻밤 동안 배양합니다.
7. RT에서 66% 디클로로메탄(DCM)/33% 메탄올을 3시간 동안 흔들면서 배양합니다.
8. 흔들지 않고 디벤질 에테르(DBE)에서 배양합니다. 깨끗해질 때까지 샘플을 DBE에 그대로 두고 이미징할 때까지 DBE에 보관하십시오.

재료