마우스의 반복적 저산소 전처리에 대한 신경 적응

초록

출처: Poinsatte, K., et al., 마우스의 반복적인 저산소 전처리 및 일시적인 중대뇌 동맥 폐색에 따른 신경혈관 보호의 정량화. J. Vis. 경험. (2015년)

이 비디오는 허혈성 뇌졸중을 유발하기 전에 제어된 저산소증 주기에 마우스를 노출시켜 반복적인 저산소 전처리(RHP) 방법을 보여줍니다. 이 실험은 혈액-뇌 장벽 안정성, 신경 적응 및 염증에 미치는 영향을 평가합니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 반복적인 저산소 전처리

1. : 가스 조절기에 4개의 유량계를 맞춤 설계하고 폴리염화비닐(PVC) 튜브가 있는 표준 15L 유도 챔버에 부착하여 산소(_O2) 탱크의 압축 가스가 입구 포트를 통해 챔버로 흐를 수 있도록 합니다.
2. 마우스를 2개 그룹으로 나눕니다: 8% 및 11%_O2에 노출되는 반복적 저산소 전처리(RHP) 그룹과 21%_O2(실내 공기)에 동시에 노출되는 대조군
.
3. 각 케이지의 상단 필터 뚜껑을 제거하고 음식과 물병이 손상되지 않은 상태로 케이지를 해당 O₂ 탱크에 연결된 챔버에 놓습니다. 챔버의 뚜껑을 닫고 고정합니다.
   1. 탱크의 주 가스 밸브를 열고 노출 첫 5분 동안 각 유도 챔버의 초기 유량을 분당 2L(LPM)로 설정합니다. 나머지 노출 기간 동안 유속을 1LPM으로 줄입니다.
   2. 노출이 끝나면 유량을 0LPM으로 줄이고 탱크의 가스 밸브를 닫습니다.
   3. 챔버 뚜껑을 열고 각 케이지의 필터 상단 뚜껑을 교체합니다. 다음 저산소 노출까지 케이지를 표준 하우징에 놓습니다.
4. 매번 사용 후 각 유도 챔버에 NPD(Steris) 또는 이에 상응하는 소독제/탈취제를 뿌립니다.
5. 2주 동안 하루 중 같은 시간에 21% 및 RHP 마우스를 모두 노출시킵니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
유량계, 조절기	VetEquip, Inc	특수 주문	4개의 유량계가 플라스틱 암 커넥터로 각 유도 챔버의 입구 포트에 연결되는 6.0mm 유연한 PVC 튜브에 부착됩니다. 이 유량계는 6.5" x 1" x 1" 금속 막대에 볼트로 고정되어 있습니다. 이 금속 막대는 DISS 배출구가 있는 MI-246-P 압력 게이지에 볼트로 고정되어 있습니다. 이 압력 게이지 및 유량계 장비는 렌치를 사용하여 각각의 새 가스 실린더에 부착할 수 있습니다.
21% O₂ 탱크	AirGas	OX USP200
11% O₂ 탱크	AirGas	특수 주문
8% O₂ 탱크	AirGas	특수 주문
15 L 유도 챔버	VetEquip	941454