에탄올 유도 교감신경절 차단이 개 모델에서 신경 재생에 미치는 영향

초록

출처: Shionoya, Y., et al. 인공 신경을 사용하여 송곳니 하치조 신경 재생을 촉진하기 위한 에탄올 유도 경추 교감 신경절 차단 적용. J. Vis. 경험. (2018년)

이 비디오는 생분해성 스캐폴드와 에탄올 유도 교감신경 차단을 사용하여 하치조신경(IAN) 재생을 위한 송곳니 모델을 보여줍니다. 이 절차에는 경추 교감 신경절에 외과적으로 접근하고 에탄올을 주입하여 혈관 확장을 유도하는 것이 포함됩니다. 결과적으로 손상 부위로의 혈류가 증가하고 Schwann 세포 유도 축삭 재생과 결합되어 신경 재생이 촉진됩니다.

프로토콜

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 마취 및 피부 준비

:

1. 근육주사로 5mg/kg 케타민 염산염과 1mg/kg 자일라진의 혼합물로 개를 마취합니다.
2. 직경 7.5mm, 길이 25cm의 기관관으로 삽관합니다.
3. 개를 오른쪽 측면 위치에 놓습니다. 산소와 함께 3.2% 세보플루란(1.0L/min)으로 전신 마취를 유지합니다.
4. 온열 패드를 사용하여 체온을 37°C로 유지하십시오.
5. 각막 찰과상을 방지하기 위해 눈의 앞쪽 표면에 안과용 젤을 바르십시오.
6. 수술용 이발기를 사용하여 수술 부위(왼쪽 가슴 부위)를 조심스럽게 면도합니다. 수술 부위에 상당한 양의 알코올 용액을 뿌립니다. 15초 이상 기다리십시오. 적용을 3회 반복합니다.
7. 수술 중 심박수와 산소 포화도를 기록합니다.

2. 폴리글리콜산 콜라겐(PGA-C) 튜브를 이용한 하치조신경재건술: 재건 전용 모델 개발

국

1. 소마취제 및 진통제로 27G 바늘을 이용하여 1% 리도카인 3mL를 좌측 하악 치은에 주입한다.
2. 왼쪽 하악 치은에 5번 메스날로 15cm 가로 절개를 하여 동물의 하악을 노출시킵니다.
3. 압전 초음파 진동을 사용하여 하악의 근위부를 후방 정신공을 통해 3cm × 8mm 직사각형으로 연마합니다.
   참고: 진동 주파수는 28 \u2012 32kHz였습니다.
4. 하악골판의 정면 부분(치수, 3cm × 8mm)을 제거하여 왼쪽 IAN을 노출시킵니다(그림 1A).
   참고: 재건 부위는 제1대구치의 치근 정점에 해당
하며
5. 메스로 IAN을 횡단하여 10mm 세그먼트를 제거합니다.
6. 절단된 신경의 근위 및 원위 그루터기를 신경관에 2mm 깊이까지 삽입합니다.
7. 8-0 사용 나일론 봉합사와 8X 배율의 수술용 현미경을 사용하여 튜브를 근위 및 원위 신경 말단에 봉합합니다(그림 1B).
8. 뼈판을 하악의 원래 위치로 되돌립니다.
9. 4-0 나일론 봉합사로 상처를 봉합합니다.
10. 수술 후 하루 후 하악골판이 올바른 위치에 있는지 확인합니다.
    1. 4.10.1 마취 하에 안면 뼈의 컴퓨터 단층촬영(CT) 영상을 수행합니다. CT 매개변수를 120kVp, 200mAs, 0.5mm/s, 0.5mm 슬라이스 두께로 설정합니다.
       1. 5mg/kg 케타민 염산염과 1mg/kg 자일라진의 혼합물을 사용하여 마취를 시행합니다(그림 2).
11. 수술 후 일주일 동안 암피실린(100mg/일)을 항생제로, 아세트아미노펜(100mg/일)

을 진통제로 투여한다.

3. 에탄올 유발 경추 교감신경절 차단(CSGB): 재건 + CSGB 모델 개발

1. 섹션 2에 설명된 대로 IAN 재건을 수행하고 회복을 위해 일주일이 소요됩니다.
2. 산소(4L/min)와 공기(6L/min)에서 1.5% 세보플루란으로 동물을 마취시킵니다. 섹션 3에 설명된 대로 의도한 수술 부위를 면도하고 청소하십시오.
3. 왼쪽 가슴 부위에 선을 그려 수술용 피부 마커로 절개선을 표시합니다(그림 3, 절개선 길이는 20cm).
4. 국소 마취제 및 진통제로 21G 바늘을 사용하여 왼쪽 흉부 부위에 1% 리도카인 5mL를 주입합니다.
5. 10번 메스 칼날로 왼쪽 가슴 피부를 절개합니다.
6. 전동 메스로 지방층을 절개하여 근육 근막을 노출시킵니다.
7. 복측 톱니근과 비늘근을 노출시킵니다.
8. 복부 톱니근과 비늘근을 복부에서 등쪽으로 들어 올려 두 번째와 세 번째 갈비뼈를 노출시킵니다(그림 4).
9. 왼쪽 경추 교감신경절을 노출시키기 위해 두 번째 및 세 번째 늑간 공간에서 왼쪽 측면 개흉술을 수행합니다(그림 5).
10. 직접 시각화 하에서 30G 바늘을 사용하여 경추 교감 신경절에 0.2mL의 99.5% 에탄올을 주입합니다(그림 6).
11. 중단된 1-0 흡수성 스티치로 늑간 공간을 닫습니다.
12. 중단된 3-0 나일론 스티치로 피부를 닫습니다.
13. 수술 후 일주일 동안 암피실린(100mg/일)을 항생제로, 아세트아미노펜(100mg/일)
을 진통제로 투여한다.
14. CSGB 후 1주일 후 적외선 열화상 촬영으로 안면 피부 온도를 측정하여 CSGB를 확인합니다.

결과

그림 1: 좌하치조신경(IAN) 재건 전후. A) 왼쪽 IAN에 노출된 후 재건 전 이미지 뼈 제거. B) 폴리글리콜산-콜라겐 튜브를 사용하여 재구성된 왼쪽 IAN의 재구성 후 이미지.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록

이름	회사	카탈로그 번호	댓글
수술용 이발기	Roboz Surgical Instrument Company	RC-5903
일회용 메스(No.15)	Kai medical	219ABBZX00073000
VarioSurg3	Nakanishi	VS3-LED-HPSC, E1133	뼈 가공용 압전 수술
4-0 나일론 봉합사	에티콘	8881H
8-0 나일론 봉합사	에티콘	2775G
이세파마이신 황산염	니치이코	620005641
일회용 메스(No.10)	카이 메디컬	219ABBZX00073000
30게이지 바늘	니프로	1134
1-0 흡수성 스티치	Ethicon	J347H
3-0 나일론 스티치	Ethicon	8872H
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