하이드로겔 기반 마이크로컬럼을 이용한 미세조직 공학 신경망 개발

Abstract

출처: Struzyna, LA 외, 신경계 재건, 변조 및 모델링을 위한 해부학적으로 영감을 받은 3차원 미세 조직 공학 신경망. J. Vis. 경험. (2017년)

이 비디오는 세포외 기질 코어가 있는 하이드로겔 마이크로 컬럼을 사용하여 미세 조직 공학 신경망의 개발을 보여줍니다. 시드된 신경 응집체는 부착하고, 투영을 확장하며, 구조화된 신경망을 형성하여 신경 발달 및 신경치료 연구의 발전에 기여합니다.

Protocol

동물 모델과 관련된 모든 절차는 지역 기관 동물 관리 위원회와 JoVE 수의학 검토 위원회에서 검토되었습니다.

1. 아가로스 하이드로겔 개발(미세 조직 공학 신경망(micro-TEN)의 무세포 구성 요소)아

1. 가로스 용액 준비
   1. 생물 안전 캐비닛 내에서 20mL의 Dulbecco's phosphate-buffered 식염수(DPBS)를 두 개의 10cm 페트리 접시 각각에 옮겨 마이크로 컬럼용 저장소를 준비합니다. 뜨거운 구슬 살균기로 미세한 집게와 마이크로메스를 소독합니다.
   2. 아가로스 3g의 무게를 측정하고 생물 안전 캐비닛 내부의 멸균 비커로 옮깁니다. 3% 중량/부피(w/v)의 최종 농도를 위해 DPBS 100mL를 첨가합니다. 깨끗한 마그네틱 바를 포함하고 비커를 알루미늄 호일로 덮습니다.
   3. 핫 플레이트/교반기를 사용하여 비커를 100°C로 데우고 120-200rpm으로 저어주어 아가로스를 완전히 용해시킵니다(용액이 탁함에서 투명함으로 변함). 겔화를 방지하기 위해 가열 및 교반을 유지하고 아가로스가 타지 않도록 필요에 따라 가열 온도를 변경하십시오.
      참고: 레이저 절단 장치와 모세관을 모두 사용한 제조는 각각 아래 하위 섹션 1....

Results

그림 1: 세포 응집을 위한 레이저 절단 마이크로 컬럼 제조 장치 및 3D 프린팅 피라미드 형 마이크로웰 몰드의 청사진. (A)-(B) 하이드로겔 마이크로 컬럼을 제작하는 데 각각 사용되는 원통형 채널 어레이의 하단 및 상단 절반의 청사진 및 이미지. (C) 장치를 함께 고정하는 데 사용되는 캡의 청사진 및 이미지. 앞쪽과 뒤쪽 조각은 모두 동일한 치수를 공유합니다. (D) 마이크로 컬럼을 제작하는 데 필요한 조립된 장치의 이미지. 두 개의 캡과 아래쪽.......

Materials